Celice NCI-H1299: Raziskave in klinični učinki celic pljučnega raka NCI-H1299
NCI-H1299 je imortalizirana celična linija človeškega nedrobnoceličnega pljučnega raka, ki se pogosto uporablja v imunski onkologiji, raziskavah raka in odkrivanju zdravil. Poleg tega so raziskovalci te celice uporabili za raziskovanje občutljivosti na zdravila, osnovnih signalnih poti in molekularnih mehanizmov, povezanih s pljučnim rakom. Poleg tega se te celice uporabljajo za preučevanje virusnih okužb, kot je SARS-CoV-2.
Splošne značilnosti in izvor celic NCI-H1299
Prva stvar, ki jo je treba vedeti o celični liniji, je njen izvor in splošne značilnosti, saj vam pomagajo pri načrtovanju njene uporabe v vaši raziskavi. Ta del članka vam bo pomagal izvedeti nekaj pomembnih informacij o izvoru in značilnostih celic NCI-H1299. Na primer, kaj so celice pljučnega raka NCI-H1299? Katera vrsta celic je NCI-H1299? Kakšna je velikost celic NCI-H1299? Kakšna je razlika med A549 in NCI-H1299?
- Celična linija NCI-H1299 izvira iz metastaz v bezgavkah pljuč 43-letnega belopoltega bolnika z rakom.
- Te celice imajo homozigotno delno delecijo gena p53, zato ne izražajo beljakovine p53. Pomanjkanje izražanja beljakovine p53 prispeva k proliferacijski težnji celic pljučnega raka NCI-H1299.
- Poleg p53 naj bi te imortalizirane celice imele tudi mutacijo NCI-H1299 KRAS, ki je odgovorna za njihovo rast, razmnoževanje, migracijo in invazijske lastnosti.
- Kariotip NCI-H1299 je skoraj diploiden.
- Morfologija celic NCI-H1299 je podobna epitelijskim celicam.
- Te celice so sploščene in imajo debelino manj kot 5 µm.
NCI-H1299 in A549
NCI-H1299 in A549 sta celični liniji nemalega pljučnega raka. Celice NCI-H1299 so v primerjavi z A549 agresivnejše in občutljivejše. Obe imata razmeroma podobne mutacije, kot je KRAS. Za razliko od celic NCI-H1299 pa celice A549 izražajo gen P53.
Informacije o gojenju
Vzdrževanje kulture celične linije ni enostavno, dokler ne poznate vseh ključnih informacij o njej, vključno z: Kakšen je čas podvojitve NCI-H1299? Kolikšna je gostota naselitve NCI-H1299? Kaj je celično gojišče NCI-H1299? Kako gojite celične linije NCI-H1299? V tem razdelku boste našli odgovore na vsa ta vprašanja o gojenju celic NCI-H1299.
Ključne točke za gojenje celic NCI-H1299
|
Čas podvojitve: |
Čas podvojitve celic NCI-H1299 je od 22 do 30 ur. |
|
Prilepljene ali v suspenziji: |
NCI-H1299 je adherentna celična linija. |
|
Razmerje subkultiviranja: |
Celice NCI-H1299 se subkultivirajo v priporočenem razmerju 1:3 do 1:6. Za naselitev adherentne celice speremo s 1x PBS in jih 8 do 10 minut pri sobni temperaturi inkubiramo z raztopino za prehod Accutase. Odcepljene celice se dodajo s svežim gojiščem in centrifugirajo. Celični pelet nato ponovno suspendiramo in celice prelijemo v nove erlenmajerice z rastnim medijem. |
|
Rastno gojišče: |
RPM1 1640 je idealno gojišče za celice NCI-H1299. Dopolnjeno je z 10 % fetalnega govejega seruma, 4500 mg/L glukoze, 2,0 mM L-glutamina, 1 mM natrijevega piruvata, 1500 mg/L NaHCO3 in 10 mM HEPES. Medij je treba obnavljati vsakih 2 do 3-krat na teden. |
|
Pogoji za rast: |
NCI-H1299 pljučnega raka vzdržujemo v vlažnem inkubatorju pri 37 °C s 5-odstotnim dovajanjem CO2. |
|
Shranjevanje: |
Celično linijo NCI-H1299 lahko dolgoročno shranjujemo v parni fazi tekočega dušika ali v zamrzovalnikih za zelo nizke temperature pri temperaturi pod -150 °C. |
|
Postopek zamrzovanja in medij: |
CM-1 ali CM-ACF sta medija za zamrzovanje celic NCI-H1299. Celice se zamrznejo s počasnim postopkom zamrzovanja, ki omogoča le 1-stopinjsko znižanje temperature na minuto, da se zaščiti vitalnost celic. |
|
Postopek odtaljevanja: |
Zamrznjene celice NCI-H1299 hitro mešamo v predhodno ogreti vodni kopeli pri 37 stopinjah Celzija 40 do 60 sekund, dokler ne ostane majhen košček ledu. Odmrznjene celice se dodajo s svežim gojiščem in se lahko neposredno gojijo v novih bučkah ali centrifugirajo. V prvem primeru je treba medij zamenjati po 24 urah inkubacije. Centrifugiranje pomaga odstraniti elemente zamrzovalnega medija. Nato se pobrane celice ponovno suspendirajo v svežem gojišču in razporedijo v novo bučko za gojenje. |
|
Raven biološke varnosti: |
Za ravnanje s celično kulturo NCI-H1299 je potreben laboratorij 1. stopnje biološke varnosti. |
Nakup celične linije NCI-H1299: visokokakovostno raziskovalno orodje za raziskovanje biologije pljučnega raka
Prednosti in slabosti celic NCI-H1299
Tako kot druge celične linije človeškega raka ima tudi NCI-H1299 nekatere razlikovalne značilnosti, povezane s posebnimi prednostmi in slabostmi. V nadaljevanju smo povzeli nekaj pomembnih.
Prednosti
Glavne prednosti celične linije NCI-H1299 za nedrobnocelični pljučni rak so:
-
Model pljučnega raka in vitro
Celične linije NCI-H1299 so bile razvite iz metastaz pljučnega karcinoma v bezgavkah, zato imajo razmeroma podobne lastnosti. Zato lahko te celice služijo kot model in vitro za raziskovanje biologije pljučnega raka, celičnih in molekularnih mehanizmov ter pregledovanje in testiranje potencialnih zdravil.
-
Enostavno gojenje
Celice NCI-H1299 je enostavno gojiti in vzdrževati v raziskovalnem laboratoriju. Zahteve in postopki za gojenje celic niso zahtevni.
-
NCI-H1299 P53 in NCI-H1299 KRAS mutacija
Celice NCI-H1299 nimajo izražanja gena p53, kar celicam omogoča intenzivno razmnoževanje. Poleg tega imajo mutacijo KRAS, ki prispeva k rasti, razmnoževanju, invaziji in migraciji celic. Glede na to raziskovalci uporabljajo celice H1299 za raziskovanje molekularnih mehanizmov, povezanih z mutacijami KRAS in P53.
Slabosti
Slabosti celic NCI-H1299 so:
-
Tkivna specifičnost
NCI-H1299 izvirajo iz pljučnega tkiva. Zato je njena uporabnost večinoma omejena na raziskave pljučnega karcinoma. Morda ne predstavlja v celoti heterogenosti in splošnih značilnosti drugih vrst raka.
Raziskovalna uporaba celic NCI-H1299
Celična linija NCI-H1299 se pogosto uporablja pri raziskavah pljučnega raka. V nadaljevanju je navedenih nekaj obetavnih aplikacij te celične linije.
- Biologija raka: Celice NCI-H1299 so odlično raziskovalno orodje za raziskovanje razvoja in napredovanja raka ter z njim povezanih celičnih in molekularnih mehanizmov. Te celice so opremljene z določenimi mutacijami, kar raziskovalcem omogoča, da raziskujejo s tem povezano vedenje rakavih celic, signalne poti in profile izražanja genov. V več študijah je bila za preučevanje biologije pljučnega raka uporabljena celična linija NCI-H1299 za nedrobnocelični pljučni karcinom. V študiji, izvedeni leta 2018, so na primer s celicami NCI-H1299 preučevali signalno pot, vključeno v apoptozo celic pljučnega raka. Raziskovalci so ugotovili, da pot PI3K/AKT prispeva k proliferaciji celic, njena inhibicija pa lahko povzroči smrt rakavih celic [1]. Podobno so v drugi raziskavi preučevali mehanizme, ki so vključeni v prehod iz epitelija v mezenhim (EMT) celic NCI-H1299. Ta študija je predlagala, da zunajcelična beljakovina SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) prispeva k EMT in migraciji NCI-H1299 ter tako spodbuja tumorigenezo celic - beljakovina SPARC deluje kot posrednik signalizacije TGF-β1 [2].
- Odkrivanje in pregledovanje zdravil: NCI-H1299, celična linija človeškega pljučnega raka, se pogosto uporablja za ocenjevanje toksičnosti in učinkovitosti potencialnih zdravil. Poleg tega jo raziskovalci uporabljajo za raziskovanje mehanizma delovanja protitumorskih zdravil. V študijah so te celice uporabili tudi za ugotavljanje možnih tarč za zdravila in mehanizmov odpornosti. V raziskavi, ki so jo opravili Xiao-Yun Shen in sodelavci, so na primer preučevali protirakavi potencial naravne spojine brucein D (BD). Ugotovitve so pokazale, da BD znatno ovira proliferacijo, invazijo in migracijo celic NCI-H1299. Zato jo lahko obravnavamo kot potencialno adjuvantno terapijo za zdravljenje nedrobnoceličnega pljučnega karcinoma [3]. Podobno so v študiji ocenjevali citotoksične učinke ksantofumola samostojno in v kombinaciji s kemoterapevtikom cisplatinom na celice pljučnega raka NCI-H1299 [4].
Raziskovalne publikacije s celicami NCI-H1299
Tukaj so nekatere pomembne in najbolj citirane raziskovalne publikacije o celični liniji pljučnega karcinoma NCI-H1299.
Ta članek je objavljen v reviji Human and Experimental Toxicology (2021). V študiji je bilo predlagano, da indol-3-karbinol povzroči apoptozo v celicah H1299 prek zvišanja ravni reaktivnih kisikovih vrst (ROS).
Ta raziskava je bila objavljena leta 2018 v reviji Cellular Physiology and Biochemistry. Ugotovitve raziskave so pokazale, da kombinacija kofeinske kisline in paklitaksela učinkuje sinergistično protirakavo na celično linijo nedrobnoceličnega pljučnega raka NCI-H1299.
Ta raziskovalni članek je bil objavljen v reviji Molecular Medicine Reports (2018). V študiji je bil ocenjen protitumorski učinek tubeimozida-1, triterpenoidnega saponina, in osnovni mehanizmi v celični liniji NCI-H1299.
Pristimerin povzroča apoptozo ter zavira proliferacijo in migracijo v celicah pljučnega raka H1299
V tem članku, objavljenem v reviji Journal of Cancer (2020), je bilo predlagano, da pristimerin, naravna spojina, zavira proliferacijo in migracijo celic NCI-H1299.
Mehanizem uravnavanja gena VIPR1 v celicah človeškega pljučnega adenokarcinoma H1299
V tej študiji v reviji Medical Oncology (2019) je bil raziskan potencialni učinek prekomerne ekspresije gena VIPR1 na celično linijo adenokarcinoma NCI-H1299.
Viri za celično linijo NCI-H1299: Viri: protokoli, videoposnetki in drugo
Tukaj je nekaj spletnih virov, v katerih so predstavljene celice NCI-H1299.
- Transfekcija NCI-H1299: V tem videoposnetku je razložen protokol za prehodno transfekcijo celičnih linij NCI-H1299.
- Subkultiviranje adherentne celične linije: Ta videoposnetek vam bo pomagal spoznati splošni postopek subkultivacije za adherentno celično linijo.
Naslednja povezava vsebuje informacije o celičnih kulturah za celice NCI-H1299.
- Celična linija NCI-H1299: Ta povezava vam bo pomagala pri spoznavanju protokola pasažiranja in transfekcije celic NCI-H1299.
Pogosto zastavljena vprašanja o celični liniji NCI-H1299
Reference
- Gu, J., et al., Študija apoptoze, povzročene z EGCG, v celicah pljučnega raka z zaviranjem signalne poti PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): p. 4557-4563.
- Sun, W., et al., SPARC deluje kot posrednik TGF-β1 pri spodbujanju epitelijskega prehoda v mezenhimski prehod v celicah pljučnega raka A549 in H1299. Biofaktorji, 2018. 44(5): p. 453-464.
- Shen, X.-Y. in drugi, Študija o mehanizmu bruceina D pri zdravljenju celic nedrobnoceličnega pljučnega raka H1299. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): p. 500.
- Long, B., et al., Cytotoxic Effects of Xanthohumol and Its Combination with Cisplatin on Human Metastatic Lung Cancer H1299 Cells (Citotoksični učinki ksantofumola in njegove kombinacije s cisplatinom na celice človeškega metastatskega pljučnega raka H1299 ). Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): p. 1-15.