Celična linija MG-63: Podroben vodnik po celicah MG-63 v raziskavah osteosarkoma
Celice MG-63 so fibroblastom podobne človeške osteosarkomske celice, ki ponujajo širok spekter raziskovalnih aplikacij na področju biomedicine. To lahko vključuje preučevanje procesov, povezanih s kostmi, kot so razvoj kosti, diferenciacija itd. Poleg tega celična linija MG-63 služi kot primeren in vitro model za preučevanje viabilnosti, proliferacije in adhezije kostnih celic.
Splošne značilnosti in izvor celične linije MG-63
V tem poglavju članka so opisani izvor in splošne značilnosti celične linije MG-63. Naučili se boste: Kaj je celična linija MG-63? Kakšno je poreklo celične linije MG63? Kakšna je morfologija celic MG-63? Kakšna je velikost celic MG-63?
- MG-63 je vrsta celične linije osteoblastov, ki izvira iz kosti 14-letnega moškega bolnika z osteosarkomom (belopoltega). A. Billiau in njegovi sodelavci so to celično linijo deponirali leta 1977.
- Celična linija MG-63 ima morfologijo, podobno fibroblastnim celicam.
- Človeške osteosarkomske celice (MG-63) imajo hipotriploidijo. Modalno število kromosomov za te celice je 66, kar se pojavlja pri približno 44 % celične populacije. Pri skoraj 2 % celične populacije so ugotovljene tudi višje ploidije. Poleg tega je v vseh celicah veliko 18-19 markerskih kromosomov.
Informacije o gojenju celične linije MG-63
Pomembne informacije o zahtevah za gojenje celičnih linij vam lahko olajšajo delo. V tem delu članka so navedene vse ključne točke, ki so pomembne za gojenje in vzdrževanje celic MG-63. Tu boste izvedeli: Kakšen je čas podvojitve celic MG-63? Katera gojišča se uporabljajo za celice MG-63? Kakšna je gostota naselitve celic MG-63?
Ključne točke za gojenje celic MG-63
|
Čas podvojitve |
Čas podvojitve populacije celic MG-63 je od 28 do 38 ur, odvisno od pogojev gojenja. |
|
Lastnosti rasti |
MG-63 je adherentna celična linija. |
|
Gostota naselitve |
zacelice MG-63 je priporočena gostota 1 x104 celic/cm2 . Adherentne celice se sperejo z 1 x fosfatno pufrsko fiziološko raztopino (PBS) brez magnezija in kalcija. Te celice nato inkubiramo z raztopino za disociacijo (Accutase), dodamo sveže gojišče in centrifugiramo. Zbrana celična peleta se ponovno suspendira v svežem gojišču in razporedi v novo erlenmajerico za rast. |
|
Gojišče za rast |
Za gojenje celic MG-63 se uporablja gojišče DMEM ali Ham's F12. Za optimalno rast celic lahko tem medijem dodamo 5 % fetalnega govejega seruma (FBS), 3,0 g/L glukoze, 2,5 mM L-glutamina in 1,2 g/L NaHCO3. Medij je treba zamenjati 2-3-krat na teden. |
|
Pogoji rasti |
Za gojenje celic MG-63 je potreben vlažen inkubator s temperaturo 37 °C in 5-odstotnim dovajanjem CO2. |
|
Shranjevanje |
Te osteoblastom podobne celice lahko shranjujemo v parni fazi tekočega dušika ali pri temperaturi pod -150 °C, da ohranimo njihovo vitalnost. |
|
Postopek zamrzovanja in medij |
Za zamrzovanje celic MG-63 se uporabljajo mediji CM-1 ali CM-ACF. Na splošno se priporoča počasen postopek zamrzovanja, da se prepreči šok za celice in zaščiti njihova sposobnost preživetja. |
|
Postopek odtaljevanja |
Zamrznjene celice inkubiramo 40 do 60 sekund v predhodno ogreti vodni kopeli (37 stopinj Celzija). Celice ponovno suspendiramo v svežem gojišču in jih prelijemo v novo erlenmajerico. Po 24 urah inkubacije se gojišče zamenja, da se odstranijo sestavine zamrzovalnega gojišča. |
|
Raven biološke varnosti |
Za ravnanje s kulturami MG-63 in njihovo vzdrževanje je potrebno laboratorijsko okolje prve stopnje biološke varnosti. |
Celična linija MG-63: Prednosti in slabosti
MG-63 je pogosto uporabljena celična linija osteoblastov. Z njo je povezanih več prednosti in slabosti. V nadaljevanju bomo omenili nekaj glavnih prednosti in slabosti celične linije MG-63.
Prednosti
Prednosti celic MG-63 so:
-
Lastnosti, podobne osteoblastom
Celična linija MG-63 ima osteoblastne lastnosti, zato je primerna za preučevanje procesov in bolezni, povezanih s kostmi. Uporablja se lahko tudi za raziskovanje adhezije, proliferacije in viabilnosti celic na titanovih površinah [1].
-
Možnost transfekcije
Celice MG-63 se pogosto uporabljajo v študijah transfekcije, kar omogoča raziskave izražanja genov, delovanja in celičnih procesov.
-
Proizvodnja interferona na visoki ravni
Celice MG-63 so sposobne proizvajati interferon na visoki ravni. Pri indukciji s cikloheksimidom, polinozinsko kislino, policitidilno kislino in aktinomicinom [2] lahko dajo 3,7-krat večjo količino interferona na cm² kot diploidni fibroblasti.
Slabosti
Slabosti, povezane s celicami B MG-63, so:
-
Heterogenost
Celice MG-63 kažejo heterogenost znotraj populacije celic, kar lahko vpliva na ponovljivost.
-
Linija tumorskih celic
MG-63 je rakava celična linija in morda ne predstavlja v celoti normalnega obnašanja in fiziologije celic, kar omejuje njeno uporabo v nekaterih laboratorijskih poskusih.
Naročite celice MG-63 še danes
Uporaba celic MG-63
Celice MG-63 so odlično raziskovalno orodje. Na raziskovalnem področju ponujajo številne obetavne aplikacije. Tukaj je navedenih nekaj glavnih raziskovalnih aplikacij celic MG-63.
- Študij procesov/bolezni, povezanih s kostmi: Celice MG-63 so osteoblastom podobne (kostotvorne) celice. Zato se te celice pogosto uporabljajo za preučevanje bolezni kosti in celičnih procesov, vključno z razvojem, diferenciacijo in mineralizacijo. Poleg tega se te celice pogosto uporabljajo za presejanje terapevtskih zdravil za spodbujanje celjenja kosti. V raziskavi so uporabili celice MG-63 za preučevanje terapevtskega potenciala zeleno sintetiziranih nanodelcev cinkovega oksida iz Scutellaria baicalensis na proliferacijo, mineralizacijo in diferenciacijo kostnih celic [3].
- Raziskave raka: Celice MG-63 se pogosto uporabljajo pri raziskavah raka. V več študijah so te celice osteosarkoma uporabili za razumevanje signalnih poti raka ter oceno citotoksičnega in terapevtskega potenciala zdravil. V študiji, izvedeni leta 2019, so z uporabo celic MG-63 preučevali protitumorske lastnosti naravne spojine tomentozin. Ugotovitve so pokazale, da ima tomentozin protirakave učinke s sprožitvijo znotrajcelične proizvodnje reaktivnih kisikovih vrst (ROS) [4].
Raziskovalne publikacije s celicami MG-63
V nadaljevanju je navedenih nekaj raziskovalnih publikacij, v katerih je predstavljena celična linija MG-63, podobna osteoblastom.
miR-192 poveča občutljivost zdravila metotreksat za rakave celice osteosarkoma MG-63
Ta članek je bil objavljen v reviji Pathology - Research and Practice leta 2020. V tej raziskavi so bile celice MG-63 uporabljene za preučevanje molekularnih mehanizmov, ki sodelujejo pri odpornosti na zdravila v celicah raka osteosarkoma (MG-63). Rezultati so pokazali, da bi bila miRNA-192 lahko uporabna tarča pri premagovanju odpornosti proti zdravilu metotreksat pri osteosarkomu.
Ta raziskava je objavljena v reviji Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2020). Študija je poročala o protirakavem potencialu zeleno sintetiziranih nanodelcev cinkovega oksida (ZnONP) iz Rehmanniae Radix proti celicam kostnega raka (MG-63).
Ta raziskovalni članek je bil objavljen leta 2021 v reviji Materials Science and Engineering. V tej študiji so bile predlagane lastnosti celjenja kosti biosintetiziranih nanodelcev cinkovega oksida iz rastline Scutellaria baicalensis z uporabo celične linije MG-63.
Kurkumin zavira proliferacijo in invazijo celic MG-63 z inaktivacijo poti p-JAK2/p-STAT3
Ta študija je bila objavljena v reviji Onco Targets and Therapy leta 2021. Raziskava je predlagala protitumorske lastnosti kurkuminove spojine proti celicam osteosarkoma. Spojina je te terapevtske učinke dosegla z inaktivacijo signalne poti p-JAK2/p-STAT3 za raka.
Ta raziskava je bila objavljena leta 2018 v reviji International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science. Raziskava je pokazala, da z energijo biopolja obdelan vitamin D3 pozitivno vpliva na proliferacijo, zorenje in diferenciacijo kostnih celic ter izboljšuje parametre, povezane z zdravjem kosti.
Viri za celično linijo MG-63: Viri: protokoli, videoposnetki in drugo
Na voljo je več virov o celični liniji MG-63, ki pojasnjujejo protokole za gojenje in transfekcijo celic.
- Transfekcija celic MG-63: Ta videoposnetek izčrpno pojasnjuje protokol transfekcije celic MG-63.
- Prehajanje adherentnih celic: Ta videoposnetek opisuje subkultivacijo ali prehod adherentnih celičnih linij. Pomagal vam bo pri učenju osnovnih protokolov za gojenje celic.
Na naslednji povezavi boste našli protokol gojenja celic MG-63.
- Kultivacija celic MG-63: Ta spletna stran vsebuje enostaven in podroben protokol za subkultiviranje ali delitev celične linije MG-63.
Pogosta vprašanja o celicah MG-63
Reference
- Wandiyanto, J.V., et al., The Fate of Osteoblast-Like MG-63 Cells on Pre-Infected Bactericidal Nanostructured Titanium Surfaces. Materials (Basel), 2019. 12(10).
- Billiau, A., et al., Human interferon: mass production in a newly established cell line, MG-63 (Človeški interferon: množična proizvodnja v novo vzpostavljeni celični liniji MG-63 ). Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): p. 11-5.
- Tang, Y., et al., Osteogenic differentiation and mineralization potential of cink oxide nanoparticles from Scutellaria baicalensis on human osteoblast-like MG-63 cells. Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: p. 111656.
- Lee, C.M., et al., Tomentozin kaže protikarcinogeni učinek na celice človeškega osteosarkoma MG-63 prek indukcije znotrajceličnih reaktivnih kisikovih vrst. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): p. 1508.