Celična linija LNCaP: Ključ do preboja na področju raka prostate

Celična linija LnCaP je temelj raziskav raka, zlasti raka prostate. Njena široka uporaba na tem področju je posledica njene uporabnosti pri razumevanju bioloških osnov raka prostate in ocenjevanju učinkovitosti morebitnih terapevtskih posegov. Namen tega članka je zagotoviti temeljno razumevanje celične linije LNCaP (karcinom prostate v limfnih vozliščih) in raziskovalce opremiti z bistvenimi informacijami, potrebnimi za začetek dela s to celično linijo.

Značilnosti in izvor celic LNCaP

Celična linija LNCaP, ki je priznana zaradi svojega pomena pri raziskavah raka prostate, ima edinstvene značilnosti in izvor, ki jih morajo raziskovalci razumeti:

Izvor: Celice LNCaP so bile prvič izolirane leta 1977 iz metastatske bezgavke 50-letnega kavkaškega moškega z rakom prostate, natančneje iz levega nadključja.
Občutljivost na androgene: To je značilnost, ki je omogočila razvoj dveh pomembnih podlinij iz prvotnih celic LNCaP: LNCaP-G4, ki je znana po visoki občutljivosti na androgene, in LNCaP-E9, ki se odlikuje po nizki občutljivosti na androgene. Ti podliniji zagotavljata vsestransko orodje za raziskovanje posebnosti raka prostate.
Morfologija: Celice LNCaP so po obliki podobne epitelijskim celicam in lahko rastejo kot skupki ali kot samostojne celice, kar omogoča vsestranski model za preučevanje interakcij med celicami in morfologijo rakavih celic.
Velikost: To je podrobnost, ki pomaga pri mikroskopskem pregledu in opisovanju teh celic.
Kromosomska sestava: Celična linija je aneuploidna, s spremenljivim številom kromosomov med 76 in 91, kar odraža genetsko nestabilnost, ki jo pogosto opazimo pri rakavih celicah.
Tumorigeni potencial: Pri vnosu v samce athimskih golih miši so celice LNCaP v 58 % pogostejše pri tvorbi podkožnih tumorjev, kar poudarja njihovo uporabnost v in vivo modelih raka prostate.

Podrobno razumevanje izvora, značilnosti in uporabnosti celic LNCaP v raziskavah zagotavlja trdno podlago za znanstvenike, ki se lotevajo študij raka prostate, ter olajša premišljeno načrtovanje poskusov in razlago rezultatov.

Celice prostate v SEM.

Gojenje celic LNCaP: Osnovne smernice

Za začetek raziskav z LNCaP, znano celično linijo raka prostate, je treba temeljito razumeti osnove njenega gojenja. V naslednjih točkah so zajeti ključni vidiki, ki jih je treba upoštevati za učinkovito gojenje celic LNCaP:

Čas podvojitve populacije: Celice LNCaP imajo povprečni čas podvojitve od 48 do 60 ur, kar kaže na čas, ki je potreben, da se populacija celic podvoji v optimalnih pogojih.
Značilnost rasti: Te celice so adherentne in rastejo v monoslojih, hkrati pa tvorijo značilne celične skupke, kar je pomembna lastnost za spremljanje zdravja celic in konfluence.
Gostota naselitve: Celice LNCaP je priporočljivo posejati z gostoto 1-2 x 10^4 celic/cm^2. Protokol vključuje izpiranje celic s PBS, njihovo ločevanje z uporabo Accutase in nato centrifugiranje. Celice se nato resuspendirajo in gojijo v novem gojišču v novih erlenmajericah.
Optimalno rastno gojišče: Najprimernejše gojišče za gojenje LNCaP je EMEM, obogaten z 2,5 mM L-glutamina in 10 % fetalnega govejega seruma (FBS). Za vzdrževanje optimalnih pogojev rasti je priporočljivo osvežiti medij vsak tretji dan.
Okolje za gojenje: Celice LNCaP uspevajo v vlažnem inkubatorju, nastavljenem na 37 °C s 5-odstotno vsebnostjo CO2, kar so pogoji, ki natančno posnemajo okolje in vivo.
Shranjevanje celic: Za dolgoročno shranjevanje je treba celice LNCaP hraniti v parni fazi tekočega dušika, kar zagotavlja njihovo vitalnost za prihodnje poskuse.
Tehnike zamrzovanja in odmrzovanja: Z uporabo gojišča za zamrzovanje CM-1 ali CM-ACF je treba celice LNCaP zamrzniti postopoma, da se čim bolj zmanjša toplotni šok. Po odmrznitvi, ki jo je najbolje opraviti v vodni kopeli pri 37 °C, dokler ne ostane le majhen ledeni skupek, je treba celice takoj ponovno suspendirati v rastnem gojišču, centrifugirati, da se odstrani gojišče za zamrzovanje, in jih nato prenesti v bučke za gojenje.
Upoštevanje biološke varnosti: Pri gojenju celic LNCaP je treba upoštevati protokole 1. stopnje biološke varnosti, ki zagotavljajo varno in učinkovito ravnanje.

Te smernice so podlaga za vzpostavitev in vzdrževanje kultur celic LNCaP, kar omogoča zanesljive in ponovljive rezultate v raziskovalnih prizadevanjih na področju raka prostate.

Celice LNCaP pri nizki in visoki konfluenci.

Prednosti in slabosti uporabe celične linije LNCaP

Celična linija LNCaP, ki je temelj raziskav raka prostate, ima edinstven niz značilnosti, ki ji dajejo prednosti in izzive pri uporabi. V tem poglavju so opisane glavne prednosti in morebitne slabosti, povezane s celicami LNCaP.

Prednosti

Enostavno gojenje: Celice LNCaP so zelo prijazne do uporabnika v smislu gojenja in vzdrževanja v laboratorijskem okolju. Zaradi te dostopnosti so postale najprimernejša izbira za različne aplikacije, vključno s presejanjem zdravil in farmakološkim testiranjem.
Občutljivost na androgene: Za celice LNCaP je značilna odvisnost od androgenov, za katero je značilno izražanje androgenih receptorjev (AR). Zaradi te lastnosti so neprecenljiv in vitro model za raziskovanje dinamike raka prostate, odvisnega od androgenov, kar omogoča vpogled v napredovanje bolezni in potencialne terapevtske cilje.

Slabosti

Hitrost rasti: Ena od omejitev celic LNCaP je njihova relativno nizka stopnja razmnoževanja. Ta lastnost lahko predstavlja izziv pri eksperimentalnih načrtih, ki zahtevajo hitro rast celic ali visoko zmogljivost v omejenem časovnem okviru.
Agregacija celic: Celice LNCaP so nagnjene k oblikovanju agregatov ali skupkov, kar lahko vnese spremenljivost in oteži razlago podatkov pri nekaterih celičnih testih, zlasti tistih, ki temeljijo na enakomerni porazdelitvi celic ali analizi posameznih celic.

Razumevanje teh lastnosti celične linije LNCaP je ključnega pomena za raziskovalce, da izkoristijo njene prednosti in hkrati zmanjšajo vpliv njenih omejitev ter tako optimizirajo potencial celične linije pri napredku raziskav raka prostate.

Raziskovalne aplikacije na androgene občutljivih celic LNCaP

Celice LNCaP, pridobljene iz človeškega raka prostate, služijo kot ključno orodje na različnih raziskovalnih področjih. Njihova uporabnost izhaja iz njihove androgene odvisnosti in zmožnosti modeliranja posebnih vidikov biologije raka prostate. Ključne aplikacije vključujejo:

Raziskave raka prostate

Študije androgenih receptorjev

Celice LNCaP so tako kot številne tumorske celice prostate občutljive na androgene, ki so ključni dejavniki rasti raka prostate. Ta občutljivost se terapevtsko izkorišča s strategijami deprivacije androgenov, kot je ablacija androgenov ali uporaba antiandrogenov, kot je flutamid. Učinkovitost teh terapij se pogosto spremlja z zaviranjem specifičnih antigenov in zaviranjem celične proliferacije. Vendar je pojav odpornega raka prostate velik izziv, pogosto po ukinitvi antiandrogena, kar lahko privede do metastatske bolezni.

Mutacije imajo ključno vlogo pri mehanizmih prilagajanja in odpornosti celic LNCaP. Točkovne mutacije, zlasti v genu za androgene receptorje, so bile ugotovljene in preučene s tehnikami, kot sta verižna reakcija s polimerazo (PCR) in transkriptomske analize. Te mutacije lahko vplivajo na odziv celic na terapije z odvzemom androgenov in antiandrogene terapije, kar prispeva k zapletenosti zdravljenja napredovalega raka prostate.

Odkrivanje zdravil

Terapevtsko presejanje

Raziskave z uporabo celic LNCaP so se razširile prek tradicionalnih hormonskih terapij na raziskovanje novih načinov zdravljenja. Predmet zanimanja so bili znotrajcelična dostava zdravil, katere cilj je usmeriti specifične poti v teh celicah, citotoksičnost spojin, kot je ripl, in učinki sredstev, kot sta amigdalin in klorgilin. Cilj teh študij je odkriti nove metode za zaustavitev metastatskega procesa, nadzor nad napredovanjem celičnega cikla in povzročitev zaustavitve celičnega cikla v celicah raka prostate, kar daje upanje za učinkovitejše zdravljenje napredovalih in odpornih oblik te bolezni.

Klinični učinki

Zaradi metastatskega potenciala celic LNCaP, zlasti njihove sposobnosti posnemanja metastatskega procesa na mestih, kot je nadlaktna bezgavka, so neprecenljive za preučevanje širjenja raka prostate. Razumevanje genomske in transkriptomske krajine teh celic, vključno z vlogo človeške genomske DNK pri njihovem obnašanju, je ključno za razvoj strategij za preprečevanje ali zdravljenje metastatskega raka prostate.

430,00 €*

Vsebina: 1.5 milliliter

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 300265

Izboljšajte svoje raziskave z našocelično linijo LnCaP in njenim derivatomLnCaP klonom FGC

Viri in vpogledi v raziskave o celicah LNCaP

Za raziskovalce je ključnega pomena dostop do visokokakovostnih celičnih linij LNCaP ter njihovih podrobnih genetskih in fenotipskih podatkov. Številne bioknjižnice in znanstvene ustanove ponujajo te ključne vire, ki raziskovalcem omogočajo izvajanje natančnih in pomembnih študij na področju raka prostate in sorodnih področij.

Pomembne raziskovalne publikacije, ki vključujejo celice LNCaP

Celična linija LNCaP je bila osrednja v številnih pomembnih študijah na področju raziskav raka prostate. V nadaljevanju so predstavljene nekatere pomembne publikacije, v katerih so bile celice LNCaP uporabljene kot ključni raziskovalni model:

CRISPR/Cas9 ciljanje na androgeni receptor zavira rast človeških celic raka prostate LNCaP: Ta študija, objavljena v reviji Molecular Medicine Reports leta 2018, poudarja potencial CRISPR/Cas9 kot terapevtskega orodja za zaviranje rasti celic LNCaP z usmerjanjem na androgeni receptor.
Fitokemična analiza stebel Daphne pontica L. z njihovimi proapoptotičnimi lastnostmi proti celicam raka prostate DU-145 in LNCaP: V tej publikaciji DARU Journal of Pharmaceutical Sciences so predstavljene protirakave sposobnosti Daphne pontica L. proti celicam LNCaP in DU-145.
Sinergijski protitumorski učinki liraglutida, agonista glukagonu podobnega peptida-1 receptorja, skupaj z docetakselom na celično linijo raka prostate LNCaP: Ta raziskava, ki je bila leta 2020 objavljena v reviji European Journal of Pharmacology, raziskuje močno protitumorsko sinergijo med liraglutidom in docetakselom na celicah LNCaP.
Ugotavljanje potencialnih protirakavih učinkov Coriandrum sativum v celičnih linijah raka prostate PC-3 in LNCaP: V tej publikaciji iz leta 2018 v reviji Journal of Cellular Biochemistry je navedeno, da ima izvleček Coriandrum sativum obetavne protirakave učinke na celice LNCaP z modulacijo ključnih genov celičnega cikla.
Izbris STEAP1 zavira rast celic in povzroča apoptozo v celicah raka prostate LNCaP, kar preprečuje učinek androgenov: Ta članek v reviji Molecular Oncology Journal iz leta 2018 obravnava, kako lahko utišanje prekomerno izraženega gena STEAP1 v celicah LNCaP onemogoči rast celic raka prostate in sproži apoptozo.

Celice LNCaP: V tem članku so predstavljeni protokoli, vaje in drugo

LNCaP, pogosto uporabljena celična linija raka prostate, je podprta z obilico virov, vključno s podrobnimi protokoli gojenja in transfekcije:

Transfekcija celične linije LNCaP: Ta dokument ponuja izčrpen vodnik po protokolih za pasažiranje in transfekcijo celic LNCaP

Pogosta vprašanja o celicah LNCaP

Reference

Castanares, M.A., et al., Karakterizacija nove celične linije metastatskega raka prostate izvora LNCaP. The Prostate, 2016. 76(2): p. 215-225.
Iguchi, K., et al., Isolation and characterization of LNCaP sublines differing in hormone sensitivity (Izolacija in karakterizacija podlinij LNCaP, ki se razlikujejo po hormonski občutljivosti). Journal of andrology, 2007. 28(5): p. 670-678.
Wei, C., et al., CRISPR/Cas9 ciljanje na androgeni receptor zavira rast celic človeškega raka prostate LNCaP. Molecular medicine reports, 2018. 17(2): p. 2901-2906.
Gomes, I.M., et al., Knockdown of STEAP1 inhibits cell growth and induces apoptosis in LNCaP prostate cancer cells counteracting the effect of androgens. Medicinska onkologija, 2018. 35: p. 1-10.
Tousi, M.S., et al., Evaluation of apoptotic effects of mPEG-b-PLGA coated iron oxide nanoparticles as a eupatorin carrier on DU-145 and LNCaP human prostate cancer cell lines (Ocena apoptotičnih učinkov nanodelcev železovega oksida, prevlečenih z mPEG-b-PLGA, kot nosilca eupatorina, na celičnih linijah človeškega raka prostate DU-145 in LNCaP). Journal of Pharmaceutical Analysis, 2021. 11(1): p. 108-121.