Celična linija INS-1

INS-1 je dobro opisana celična linija insulinoma podgane, ki se pogosto uporablja pri raziskavah sladkorne bolezni. Celice INS-1 po stimulaciji z glukozo izločajo inzulin, zato se uporabljajo za preučevanje presnove glukoze, fiziologije celic beta in regulacije izločanja inzulina. Poleg tega se te celice uporabljajo tudi pri pregledovanju, testiranju in razvoju potencialnih terapevtskih sredstev proti sladkorni bolezni.

V tem članku boste našli vse potrebne informacije o celicah beta INS-1, ki jih morate poznati, preden jih uporabite v svojih raziskavah. Izvedeli boste predvsem naslednje:

Splošne značilnosti in izvor celic INS-1
Celična linija INS-1: Informacije o gojenju
Prednosti in slabosti celične linije INS-1
Raziskovalna uporaba celic INS-1 inzulinoma podgane
Raziskovalne publikacije s podatki o celicah beta INS-1
Viri za celično linijo INS-1: Viri, protokoli, videoposnetki in drugo: Viri za INS INS INS INS INS INS INS INS

1. Splošne značilnosti in izvor celic INS-1

Poznavanje splošnih značilnosti in izvora celične linije vam lahko zelo pomaga pri njeni učinkoviti in uspešni uporabi v vaših raziskavah. V tem razdelku članka boste izvedeli več o izvoru in splošnih značilnostih linije INS-1. Spoznali boste: Kaj je celična linija INS-1 za inzulinom podgan? Kakšne so splošne značilnosti INS-1? Kaj je celična linija INS-1 832/3? Kaj je INS-1E?

Celice INS-1 so bile prvotno izolirane iz 666 dni stare podgane s presadljivim inzulinomom, ki so ga povzročili rentgenski žarki.
Celice INS-1 so dvohormonalne. Hkrati izražajo beljakovine inzulina in proglukagona. Te celice veljajo za nezrele, saj imajo nizko raven izražanja transkripcijskega faktorja Nkx6.1 in so prikrajšane za označevalce celic alfa [1].
Obstajata dva podklona celic INS-1, tj. INS-1E in INS-1 832/3.
INS-1E se od matične celične linije INS-1 razlikuje po odzivu sekretarjev na glukozo in vsebnost inzulina.
INS-1 832/3 ali INS-1 832/13 je prav tako podklon celične linije INS-1. Je neprecenljiv model za preučevanje delovanja celic beta otočkov trebušne slinavke in uravnavanja izločanja inzulina. Od matičnih celic INS-1 se razlikuje tudi v okviru izločanja insulina, stimuliranega z glukozo (GSIS).

3D-modeliranje z inzulinom posredovanega privzema glukoze.

2. Celična linija INS-1: Informacije o gojenju

Za učinkovito ravnanje in vzdrževanje celične linije morate poznati naslednje informacije o gojenju. V tem poglavju članka bodo zajete vse ključne točke za gojenje celic INS-1. Naučili se boste: Kako gojite celice INS-1 beta? Kaj je protokol gojenja celic INS-1? Kakšen je čas podvojitve celic INS-1? Kakšno je gojišče za celice INS-1 z inzulinomom podgane?

Ključne točke za gojenje celic INS-1

Čas podvojitve:	Čas podvojitve populacije celic INS-1 je približno 44 ur.
Prilepljene ali v suspenziji:	Celice INS-1 rastejo tako v suspenziji kot v adherentni obliki.
Razmerje subkultiviranja:	Celice INS-1 se subkulturirajo v razmerju 1:3. Na kratko, suspendirane celice se zberejo. Adherentne celice se sperejo s PBS in inkubirajo z raztopino Accutase. Po ločitvi celic se jim doda sveže gojišče. Nato se suspendirane in adherentne celice centrifugirajo in zberejo. Celice se previdno resuspendirajo in razporedijo v nove erlenmajerice za rast.
Gojišče za rast:	RPM1 1640 se uporablja za gojenje celične linije INS-1rat insulinoma. Gojišče je dopolnjeno z 10 % toplotno inaktiviranega fetalnega govejega seruma, 2,1 mM stabilnega glutamina, 10 mM HEPES, 2,0 g/L NaHCO3 in 1 mM natrijevega piruvata.
Pogoji za rast:	Celice INS-1 hranimo v vlažnem inkubatorju, ki je nastavljen na temperaturo 37 °C in ima stalen 5-odstotni dovod CO2.
Shranjevanje:	Celice INS-1 beta se lahko dolgoročno hranijo v parni fazi tekočega dušika ali pri temperaturi pod -150 °C v električnem zamrzovalniku.
Postopek zamrzovanja in medij:	Za zamrzovanje celic INS-1 se uporabljajo mediji CM-1 ali CM-ACF s počasnim postopkom zamrzovanja. Za zaščito vitalnosti celic se temperatura na minuto zniža le za 1 °C.
Postopek odtaljevanja:	Zamrznjene celice INS-1 se odtajajo v vodni kopeli, nastavljeni na temperaturo 37 stopinj Celzija, 40 do 60 sekund. Po odmrznitvi celicam dodamo sveže gojišče in jih neposredno prelijemo v novo erlenmajerico za rast. Po 24 urah se medij zamenja, da se odstranijo sestavine zamrzovalnega medija.
Raven biološke varnosti:	Za gojenje celic INS-1 inzulinoma podgane je potreben laboratorij 1. stopnje biološke varnosti.

Celice INS-1, ki rastejo v otočkih, pri 10-kratni in 20-kratni povečavi.

3. prednosti in slabosti celične linije INS-1

Tako kot druge celične linije ima tudi INS-1 nekatere posebne značilnosti, povezane z določenimi prednostmi in slabostmi. V nadaljevanju smo navedli nekaj pomembnih.

Prednosti

Glavne prednosti celične linije INS-1 so:

Dobro karakterizirana
INS-1 je dobro uveljavljena in dobro opisana celična linija. Uporabljena je bila v številnih raziskovalnih študijah. Dolgo časa ohranja svoje fenotipske značilnosti in sposobnost izločanja inzulina ter tako zagotavlja zanesljive in dosledne rezultate poskusov.
Model celic beta
Celice INS-1 se uporabljajo za preučevanje delovanja celic beta otočkov trebušne slinavke, ki izločajo inzulin in se odzivajo na nihanje ravni glukoze.

slabosti

Slabosti celic INS-1 so:

Niso človeškega izvora
Celice beta INS-1 niso človeškega izvora. Pridobljene so bile iz insulinoma podgane. To lahko povzroči vrstno specifične razlike in omeji neposreden prenos eksperimentalnih rezultatov na človeško fiziologijo.

4. Raziskovalna uporaba celic INS-1 inzulinoma podgane

Celice beta INS-1 se v veliki meri uporabljajo pri raziskavah sladkorne bolezni. V nadaljevanju je navedenih nekaj obetavnih aplikacij te celične linije.

Študije izločanja insulina: Celice INS-1 imajo sposobnost izločanja inzulina, zato se pogosto uporabljajo za preučevanje osnovnih celičnih mehanizmov izločanja inzulina. Raziskovalci raziskujejo bistvene dejavnike, ki sodelujejo pri sproščanju insulina, vključno s presnovo glukoze, signalnimi potmi, hormoni in farmakološkimi sredstvi. Študija je pokazala, da pot, odvisna od ionskega kanala K + ATP, uravnava izločanje insulina v celicah beta INS-1 [2]. Poleg tega so študije pokazale, da sta pri izločanju inzulina v inzulinomskih celicah INS-1 podgane vključeni tudi poti GLP-1R in AKT/PDX1 [3].
Študije delovanja celic beta: Celice INS-1 imajo lastnosti, podobne celicam beta otočkov trebušne slinavke, kot sta odzivnost na presnovo glukoze in izločanje inzulina. Zato se uporabljajo za preučevanje fizioloških procesov in funkcij celic beta. V študiji iz leta 2022 so uporabili celice INS-1 in razvili model disfunkcije celic beta s pomočjo _H2O2 Preučevali so vitalnost celic, izločanje inzulina in markerje, povezane z oksidativnim stresom, v teh celicah kot odziv na zdravljenje z naravnimi spojinami [4].
Odkrivanje in razvoj zdravil: Inzulinomske celice INS-1 podgan se pogosto uporabljajo za presejanje in testiranje antidiabetičnih spojin ali zdravil. Uporabimo jih lahko za preučevanje morebitnih učinkov terapevtskih sredstev na izločanje inzulina in druge pomembne parametre. Študija je pokazala, da loganin, sestavina kitajske zeliščne formule, ščiti funkcijo izločanja inzulina v celicah INS-1 in ima potencialne antidiabetične učinke. Sestavina je te ugodne učinke posredovala z zaviranjem jedrske translokacije gena FOXO1 prek poti PI3K/AKT [5].

550,00 €*

Vsebina: 1.5 milliliter

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 300471

5. Raziskovalne objave s celicami beta INS-1

Tukaj je nekaj pomembnih raziskovalnih publikacij, v katerih je predstavljena celična linija INS-1 inzulinoma podgane.

Alfa-mangostin izboljša izločanje inzulina in ščiti celice INS-1 pred poškodbami, ki jih povzroči streptozotocin

Ta študija je bila objavljena v reviji Internation Journal of Molecular Sciences leta 2018. V študiji je bilo predlagano, da rumena kristalinična naravna spojina, alfa-mangostin, spodbuja izločanje insulina v celicah beta INS-1 in jih ščiti pred poškodbami, ki jih povzroči toksin za celice beta streptozotocin.

Epikatehinova krepitev z glukozo stimuliranega izločanja insulina v celicah INS-1 ni odvisna od njegovega antioksidativnega delovanja

Ta raziskava je bila objavljena v reviji acta pharmacologica sinica leta 2018. Ugotovitve študije so pokazale, da spojina epikatehin spodbuja z glukozo stimulirano izločanje insulina v celicah beta INS-1, oslabljenih z nasičenimi maščobnimi kislinami, prek aktivacije poti CaMKII.

Na novo odkriti feniltanoidni glikozid iz stevie rebaudiana Bertoni vpliva na izločanje inzulina v celicah beta otočkov INS-1 pri podganah

V članku v reviji Molecules (2019) je bilo predlagano, da nova naravna spojina Phenylethanoid Glycoside vpliva na izločanje inzulina v INS-1 celicah podganjega inzulinoma in ima tako antidiabetični potencial.

Loureirin B spodbuja izločanje inzulina prek poti GLP-1R in AKT/PDX1

Ta raziskava je bila objavljena v reviji European Journal of Pharmacology (2022). V študiji je bilo predlagano, da Loureirin B, naravni proizvod, poveča izločanje insulina v celicah beta otočkov trebušne slinavke INS-1 prek modulacije poti AKT/PDX1 in GLP-1R.

In vitro protirakave aktivnosti Withania coagulans proti rakavim celicam HeLa, MCF-7, RD, RG2 in INS-1 ter fitokemična analiza

V članku Integrative Medicine Research (2018) je bil ocenjen protirakavi potencial izvlečka Withania coagulans z uporabo rakavih celic INS-1.

6. Viri za celično linijo INS-1: Viri: protokoli, videoposnetki in drugo

Tukaj je nekaj spletnih virov, v katerih so predstavljene celice INS-1:

Subkultiviranje suspenzijskih celic: Ta videoposnetek je izčrpen vodnik za subkulturacijo celic, ki rastejo v suspenzijskih kulturah.
Subkultiviranje adherentnih celic: Ta videoposnetek vam bo pomagal pri učenju splošnega protokola za subkultiviranje adherentnih celic.

Naslednja povezava vsebuje protokol gojenja celic INS-1:

INS-1: Ta spletna stran vsebuje vse informacije o celični kulturi INS-1. Vključuje informacije o celični kulturi INS-1 in medijih za zamrzovanje, protokole za subkultiviranje ter ravnanje s kriokonzerviranimi in proliferacijskimi kulturami INS-1.

Reference

Acosta-Montalvo, A., et al., Proglucagon-Derived Peptides Expression and Secretion in Rat Insulinoma INS-1 Cells. Front Cell Dev Biol, 2020. 8: p. 590763.
Park, J.E. in J.S. Han, A Portulaca oleracea L. extract promotes insulin secretion via a K+ ATP channel dependent pathway in INS-1 pancreatic β-cells. Nutrition Research and Practice, 2018. 12(3): p. 183.
Fang, H. in drugi, Loureirin B spodbuja izločanje inzulina prek poti GLP-1R in AKT/PDX1. European Journal of Pharmacology, 2022. 936: p. 175377.
Duan, J., et al., Swietenine and swietenolide from Swietenia macrophylla king improve insulin secretion and attenuate apoptosis in H2O2 induced INS-1 cells. Environmental Toxicology, 2022. 37(11): p. 2780-2792.
Mo, F.-F., et al., Anti-diabetični učinek loganina z zaviranjem translokacije jedra FOXO1 prek signalne poti PI3K/Akt v celici INS-1. Iranian Journal of Basic Medical Sciences, 2019. 22(3): p. 262.