Celice COS-1: Celični delovni konj v študijah izražanja genov

Celična linija COS-1 je fibroblastom podobna celica, ki izvira iz opičjega ledvičnega tkiva in jo raziskovalci pogosto uporabljajo za raziskovanje opičjega virusa SV40. Te celice se zlahka transficirajo in se pogosto uporabljajo za ustvarjanje rekombinantnih beljakovin za različne biokemične, molekularne in celične biološke poskuse.

V tem članku boste našli izčrpne podrobnosti o celični liniji COS-1, ki zajemajo vse bistvene informacije, ki jih potrebujete. Zlasti boste pridobili znanje o naslednjem:

1. Celični liniji COS-1: Izvor in splošne informacije.
2. Prednosti in slabosti celic COS-1
3. Raziskovalne aplikacije celic COS-1
4. Celice COS-1: COS-COS: objave
5. Viri za celično linijo COS-1, vključno s protokoli, videoposnetki in drugim
6. Gojenje celic COS-1

1.celična linija COS-1: Izvor in splošne informacije.

Pred začetkom kakršnega koli dela s celično linijo je treba temeljno razumeti samo celično linijo. To vključuje informacije, kot so izvor celic, način njihove izolacije in njihove značilnosti. V tem razdelku bomo spoznali osnove celic COS-1.

Kaj je celična linija COS-1?

Celična linija COS-1 vključuje fibroblastom podobne celice, ki jih je leta 1981 ustvaril J. W. F. Cowell s sodelavci. Te celice so nastale s transformacijo linije epitelijskih celic zelene opice, znane kot CV-1, z mutantno obliko virusa Simian SV40. Pozneje je bila vzpostavljena celična linija COS-1 temeljito okarakterizirana, da bi obnovili območje genoma SV40, ki je bilo prej izbrisano iz izvora replikacije. Te celice izražajo velike antigene T in druge beljakovine, potrebne za pravilno replikacijo krožnih genomov, kot so plazmidi.

Celice COS-1 imajo morfologijo, podobno fibroblastom, in se prilepijo na površine ter se razporedijo kot enosloj. Trenutno ni znanih genetskih različic celične linije COS-1. Vendar je sorodna celična linija COS-7 prav tako nastala iz celic CV-1 in ima podobne značilnosti.

2.prednosti in slabosti celic COS-1

Celična linija COS-1 ima edinstvene prednosti in omejitve, ki jih bomo obravnavali v nadaljevanju.

Prednosti

• Možnost transfekcije: Celično linijo COS-1 je mogoče zlahka transficirati z različnimi metodami, vključno s fizikalnimi in kemičnimi pristopi.
• Proizvodnja lentivirusov: Celična linija COS-1 je primeren gostitelj za proizvodnjo visokokakovostnih rekombinantnih delcev lentivirusov brez dodatnih postopkov čiščenja. Te celice se trdno oprijemajo plastičnih površin, kar preprečuje kontaminacijo supernatantov za transfekcijo, ki vsebujejo virusne delce [1].
• Izražanje genov: Celična linija COS-1 se pogosto uporablja za študije analize prehodnega in stabilnega izražanja, saj proizvaja številne rekombinantne beljakovine s transfekcijo s krožnimi plazmidi, ki vsebujejo izvor replikacije SV40 [2].

Omejitve

• Nečloveška celična linija: Ker celice COS-1 izvirajo iz primatov, ki niso ljudje, so rekombinantni proteini, proizvedeni s to celično linijo, primerni le za laboratorijske poskuse in jih ni mogoče priporočiti za uporabo pri ljudeh.

3.raziskovalna uporaba celic COS-1

Eden najpomembnejših vidikov pri obravnavi celične linije je njena raziskovalna uporaba. V tem razdelku bodo obravnavane najpomembnejše raziskovalne aplikacije celic COS-1.

• Proizvodnja rekombinantnih beljakovin: Celična linija COS-1 se pogosto uporablja za proizvodnjo rekombinantnih beljakovin s prehodno ali stabilno transfekcijo krožnih vektorjev, ki vsebujejo izvor replikacije SV40. V nedavni študiji so biologi uporabili celično linijo COS-1 za proizvodnjo konjskega horionskega gonadotropina, rekombinantnega reproduktivnega hormona za reproduktivne namene [3]. Podobno so v drugi študiji uporabili celice COS-1 za proizvodnjo rekombinantnega piščančjega monoklonskega protitelesa proti določeni vrsti virusa gripe [4].
• Proizvodnja virusom podobnih delcev: Celice COS-1 služijo kot pakirni gostitelji za proizvodnjo visokokakovostnih lentivirusov in jih je mogoče uporabiti za proizvodnjo virusnih cepiv. V študiji je bila celična linija COS-1 uporabljena za proizvodnjo neinfektivnih, vendar zelo imunogenih delcev, podobnih virusu denge, ki so učinkoviti kandidati za cepivo [5].

4.cOS-1: Objave

Nekatere pomembne publikacije o celicah COS-1 so:

• COS-1 Cells: Production and Purification of Dengue Virus-like Particles from COS-1 Cells: Ta publikacija v reviji Bio-Protocol pojasnjuje uporabo celic COS-1 za proizvodnjo visoko imunogenih delcev, podobnih virusu denge.
• Analiza izražanja rekombinantnega konjskega horionskega gonadotropina v treh gostiteljskih sistemih - E. coli BL21C, celičnem lizatu žuželk Sf in celicah sesalcev COS-1: V tej študiji so raziskovalci primerjali proizvodnjo in posttranslacijsko modifikacijo rekombinantnega reproduktivnega hormona, npr. konjskega horionskega gonadotropina, v različnih ekspresijskih sistemih, vključno s celicami sesalcev COS-1.
• Raziskovanje delcev, podobnih klopnemu flavivirusu, kot dostavnega sistema za gensko terapijo: V tej študiji so bile za proizvodnjo delcev, podobnih virusu klopnega encefalitisa (TBEV), uporabljene celice COS-1. Ti delci so predlagani kot prevozno sredstvo za dostavo potrebnih replikonov (tj. terapevtskih genov).
• Izdelava rekombinantnega monoklonskega protitelesa proti nevraminidazi virusa ptičje gripe H9N2: V tem članku, objavljenem v reviji AMB Express, so bile celice COS-1 uporabljene za proizvodnjo rekombinantnih monoklonskih protiteles proti nevraminidazi virusa ptičje gripe tipa H9N2.
• Solubilizacija človeških Kv kanalov, izraženih v celicah sesalcev, brez detergentov: V tej študiji je bila za ekspresijo človeških kanalov Kv uporabljena celična linija sesalcev COS-1, na kateri so bili izvedeni nekateri poskusi solubilizacije.