Celična linija BEWO

BeWo je celična linija, pridobljena iz človeškega horokarcinoma, ki se pogosto uporablja v biomedicinskih raziskavah. Služi kot dragocen in vitro model za raziskovanje zapletenega procesa razvoja placente in sincifikacije človeškega trofoblasta. Raziskovalci te celice uporabljajo tudi za preučevanje obnašanja trofoblastičnih celic, proizvodnje hormonov in prenosa snovi prek posteljice. Poleg tega se celice BeWo uporabljajo tudi v toksikologiji, pri študijah okužb in prenosa bolezni.

Ta članek zajema temeljno znanje o celicah BeWo, ki vam lahko pomaga pri raziskovanju. Vključuje:

  1. Splošne značilnosti in izvor celic BeWo
  2. Celično linijo BeWo: Informacije o gojenju
  3. Prednosti in slabosti celične linije BeWo
  4. Raziskovalne aplikacije celic BeWo
  5. Raziskovalne publikacije s celicami BeWo
  6. Viri za celično linijo BeWo: Viri, protokoli, videoposnetki in drugo: Viri, protokoli, videoposnetki in drugo

1. Splošne značilnosti in izvor celic BeWo

Predhodno poznavanje izvora celične linije in njenih splošnih značilnosti je ključnega pomena za njeno uporabo v vaših raziskavah. Ta del članka obravnava izvor celične linije BeWo, njene značilnosti in še veliko več. Tu boste izvedeli: Kaj je celična linija za horiokarcinom BeWo? Kaj je sincifikacija BeWo? Od kod izvirajo celice BeWo? Kakšna je morfologija celic BeWo? Kakšna je ploidnost celic BeWo?

  • Placentarna celična linija BeWo izvira iz malignega gestacijskega horokarcinoma moške fetalne placente iz leta 1968 [1]. Tako služi kot neprecenljiv model za raziskave placente.
  • Celice BeWo imajo epitelijsko morfologijo.
  • Celice BeWo so razmeroma majhne, od 20 do 30 µM [2].
  • Celice BeWo imajo stabilen kariotip. Njihova matična linija je hipotetraploidna. Modalno število kromosomov celic BeWo je 86. Lahko se giblje od 71 do 178.
  • Celice BeWo proizvajajo več hormonov, tj. človeški horionski somatomamotropin, človeški horionski gonadotropin (hCG) in steroidne hormone.
  • Celice BeWo izražajo molekularne označevalce, vključno s CK 7, E-kadherinom in VE-kadherinom.

Podlinija B30

B30 je podlinija celic BeWo. Uporablja se za raziskovanje sprejemanja in prenosa hranil. To je posledica njihove živahne rasti na poroznih membranah.

BeWo in JEG-3

Celične linije BeWo JEG-3 so pridobljene iz horokarcinomov in se uporabljajo pri raziskavah placente. Celice BeWo proizvajajo hormone v nižjih koncentracijah kot celice JEG-3, kot sta človeški horionski gonadotropin (hCG) in estradiol.

Vizualizacija oploditve človeškega jajčeca s časovnim zamikom, ki prikazuje faze nastajanja blastociste, kot jih opazujemo pod mikroskopom.

2. Celična linija BeWo: Informacije o gojenju

Vzdrževanje celične kulture je lahko zapleteno, če ne poznate ključnih podrobnosti. Na primer: Kolikšen je čas podvojitve linije BeWo? Kaj je celično gojišče BeWo? Kako gojite celično linijo BeWo in Kako zamrznete celice BeWo?

Ključne točke za gojenje celic BeWo

Čas podvojitve:

Čas podvojitve populacije celic BeWo je približno 30 ur.

Prilepljene ali v suspenziji:

BeWo je adherentna celična linija.

Gostota naselitve celic:

Priporočena gostota naselitve celic BeWo je 1 x104 celic/cm2. Za naselitev celic odstranimo staro gojišče in celice speremo z 1 x PBS. Nato se doda Accutase (raztopina za prehod) in celice se inkubirajo 8 do 10 minut pri sobni temperaturi. Nato odcepljenim celicam dodamo gojišče in jih centrifugiramo. Zbrane celice se nato resuspendirajo in prelijejo v novo erlenmajerico.

Rastno gojišče:

Za gojenje celic BeWo se uporablja gojišče Ham's F12K, ki vsebuje 10 % FBS, 2,0 mM L-glutamina, 2,0 mM natrijevega piruvata in 2,5 g/L NaHCO3. Gojišče za celice BeWo je treba zamenjati 2- do 3-krat na teden.

Pogoji za rast:

Celice BeWo se vzdržujejo v vlažnem inkubatorju, ki je nastavljen na 37 stopinj Celzija in vsebuje 5 % CO2.

Shranjevanje:

Zamrznjene celice BeWo shranjujemo pri temperaturi pod -150 °C v električnem zamrzovalniku za zelo nizke temperature ali v parni fazi tekočega dušika.

Postopek zamrzovanja in medij:

Celice BeWo je priporočljivo zamrzniti v gojišču za zamrzovanje CM-1 ali CM-ACF. Celice se zamrznejo s počasnim postopkom zamrzovanja. Ta metoda omogoča le enostopenjski padec temperature na minuto, s čimer se prepreči šok za celice in zaščiti njihova sposobnost preživetja.

Postopek odmrzovanja:

Zamrznjene celice odtajamo tako, da jih za 40 do 60 sekund potopimo v vnaprej nastavljeno vodno kopel s temperaturo 37 °C, dokler ne ostane majhen ledeni skupek. Nato dodamo sveže gojišče in celice centrifugiramo, da odstranimo sestavine gojišča za zamrzovanje. Zbrana celična peleta se ponovno suspendira in razporedi v erlenmajerico za rast.

Raven biološke varnosti:

Za ravnanje s celičnimi kulturami BeWo in njihovo vzdrževanje je potreben laboratorij 1. stopnje biološke varnosti.

Posnetek epitelijske, poligonalne morfologije in otočkom podobne rasti celične linije človeškega horokarcinoma BEWO z 10-kratno in 20-kratno povečavo pod mikroskopom.

3. Prednosti in slabosti celične linije BeWo

Celice BeWo imajo edinstvene lastnosti ter posebne prednosti in slabosti. V tem poglavju bomo raziskali nekatere od njih.

Prednosti

Glavne prednosti celične linije za horiokarcinom BeWo so:

  • In vitro model placentarnih celic

    Celice BeWo so in vitro model za preučevanje obnašanja trofoblastnih celic in sincifikacije placente, ki posnema procese, ki jih je težko opazovati in vivo.

  • Proizvodnja hormonov

    Celice BeWo izločajo hormone, kot sta hCG in placentarni laktogen, zato so dragocene za študije hormonske regulacije in raziskave na področju reproduktivne biologije.

Slabosti

Slabosti celic trofoblasta BeWo so:

  • Rakova celična linija

    Celice BeWo so bile pridobljene iz horiokarcinoma, ki je tumor placente. Ta izvor morda ne predstavlja v celoti normalnega delovanja placentarnih celic.

4. Raziskovalna uporaba celic BeWo

Celična linija BeWo se pogosto uporablja pri raziskavah placente. Tu je navedenih nekaj specifičnih aplikacij te celične linije:

  • Placenta in raziskave, povezane z nosečnostjo: Celice BeWo so ključne pri raziskavah, povezanih s placento in nosečnostjo. Raziskovalci te celice uporabljajo za preučevanje prenosa snovi, vključno z zdravili, hranili in toksini, čez placentarno pregrado. Poleg tega raziskujejo tudi proizvodnjo in regulacijo hormonov, vključno s človeškim horionskim gonadotropinom (hCG), placentarnim laktogenom in steroidnimi hormoni. To je pomembno za razumevanje hormonskih sprememb med nosečnostjo. Raziskave, izvedene leta 2018, so preučevale vpliv bromiranih zaviralcev gorenja (BFR) na aktivnost sulfotransferaze v liniji človeških trofoblastičnih celic (BeWo). Ta encim sodeluje pri uravnavanju znotrajcelične ravni ščitničnega hormona [3].
  • Raziskovanje okužb in bolezni: Celice BeWo se uporabljajo tudi za preučevanje interakcije med patogeni in placentarnimi celicami. Te raziskave so dragocene za razumevanje bolezni, ki se lahko prenašajo z matere na plod, in za razvoj strategij za zaščito zdravja ploda. Poleg tega ta celična linija pomaga raziskovalcem pri raziskovanju zapletov, ki se pojavijo med nosečnostjo, kot je preeklampsija. V študiji, ki jo je leta 2023 izvedla Michalina Bralewska, so na primer uporabili celični model trofoblasta BeWo in ugotovili, da imata kromogranin A (CgA) in iz njega pridobljeni peptid katestatin (CST) lahko vlogo v zapletenem procesu patogeneze preeklampsije (PE) [4]. V drugi študiji so raziskovali protirakavi potencial trihosantina z uporabo celične linije horokarcinoma BeWo. V raziskavi so si dodatno prizadevali tudi za odkrivanje biomarkerjev z izvedbo primerjalne proteomske analize pred poskusom in po njem [5].

5. Raziskovalne publikacije s celicami BeWo

Tukaj je nekaj pomembnih raziskovalnih publikacij, ki vključujejo celice trofoblasta BeWo.

Signalizacija AMPK uravnava mitofagijo in proizvodnjo mitohondrijskega ATP v celični liniji človeškega trofoblasta BeWo

V tej študiji v Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) je bilo predlagano, da signalizacija AMPK aktivira mitofagijo v trofoblastnih celicah BeWo prek poti FUNDC1 in PRKN, ki pospešujeta mitofagijo. Posledično mitofagija pomaga ohranjati proizvodnjo ATP in potencial mitohondrijske membrane.

Etilparaben povzroči apoptotično celično smrt v celicah človeške placente BeWo po poti kaspaza-3

Ta članek je bil objavljen v reviji Animal Cells and Systems (2020). V študiji je bilo predlagano, da etilparaben posreduje pri apoptozi celic BeWo prek uravnavanja poti kaspaze 3.

Karakterizacija potenciala razgradnje ksenobiotikov in steroidov v človeškem placentarnem tkivu in celičnih linijah (BeWo, JEG-3, JAR in HTR-8/SVneo) s kvantitativno proteomiko

V tej študiji v reviji Metabolism and Disposition (2023) so bile za raziskovanje odlaganja ksenobiotikov in steroidov v celicah uporabljene celične linije placente, vključno z BeWo, JAR, JEG-3 in HTR-8/SVneo.

Apelin in apelinski receptor v človeški placenti: JEG-3 in BeWo: izražanje, signalna pot ter uravnavanje proliferacije in celičnega cikla trofoblasta

V tem raziskovalnem članku v reviji International Journal of Molecular Medicine (2020) je bilo predlagano, da apelin, ligand receptorja APJ, spodbuja proliferacijo celic BeWo prek signalizacije APJ in ERK1/2, stat3 in AMPK. Tako bi lahko bil bistven adipokin, ki uravnava razvoj posteljice.

Zdravila proti napadom na živčevje in hranila za plod: učinki na prenašalce holina v človeški placentarni celični liniji

Ta študija v Epilepsiji (2021) je preučevala učinke fetalnih hranil in zdravil proti napadom na holinove transporterje v liniji trofoblastičnih celic človeškega izvora, BeWo.

6. Viri za celično linijo BeWo: Viri: protokoli, videoposnetki in drugo

Tukaj je na voljo nekaj spletnih virov o celični liniji BeWo:

  • In vitro transfekcija: Ta videoposnetek vam bo pomagal spoznati protokol in vitro transfekcije plazmidne DNK za adherentne celice.

Naslednja povezava vsebuje informacije o celičnih kulturah za celice BeWo:

  • Celice BeWo: Ta spletna stran vsebuje bistvene informacije o celičnih kulturah za celično linijo BeWo. To vključuje informacije o celičnih medijih in pogojih gojenja. Vsebuje tudi protokole za subkultiviranje in ravnanje s kriokonzerviranimi in proliferativnimi kulturami.

Reference

  1. Weber, M., et al., Citogenomika šestih človeških trofoblastičnih celičnih linij. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
  2. Kolokol'tsova, T., et al., Characteristics of trophoblasts in long-term culture (Značilnosti trofoblastov v dolgotrajni kulturi). Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: p. 259-265.
  3. Leonetti, C.P., C.M. Butt in H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
  4. Bralewska, M., T. Pietrucha in A. Sakowicz, Reduction in CgA-Derived CST Protein Level in HTR-8/SVneo and BeWo Trophoblastic Cell Lines Caused by the Preeclamptic Environment (Zmanjšanje ravni proteinov CgA-derived CST v trofoblastičnih celičnih linijah HTR-8/SVneo in BeWo, ki ga povzroča preeklamptično okolje). International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
  5. Hu, Y., et al. primerjalna proteomska analiza dodajanja zdravila trihosantin celični liniji BeWo. Molekule, 2022. 27(5): p. 1603.

Ugotovili smo, da ste v drugi državi ali uporabljate drug jezik brskalnika, kot je trenutno izbran. Ali želite sprejeti predlagane nastavitve?

Zapri