Celična linija BxPC-3
BxPC-3 je celična linija raka trebušne slinavke človeškega izvora. Široko se uporablja v študijah raka. Raziskovalci te celice uporabljajo predvsem za preučevanje biologije raka trebušne slinavke, ugotavljanje terapevtskih ciljev in razvoj zdravil proti raku.
Ta članek vsebuje ključne informacije o celični liniji BxPC-3, ki vam lahko bistveno olajšajo delo z njo. Obravnavane bodo predvsem naslednje teme:
- Splošne informacije in izvor celične linije BxPC-3
- Gojenje celic BxPC-3
- Celična linija BxPC-3: Prednosti in omejitve
- Uporaba celic BxPC-3 v raziskavah
- Raziskovalne publikacije o celicah BxPC-3
- Viri za celično linijo BxPC-3: Bxxx-3Bx: protokoli, videoposnetki in drugo
1. splošne informacije in izvor celične linije BxPC-3
Znanje o izvoru celične linije je ključnega pomena za njeno uporabnost v raziskavah. Poznavanje njenih značilnosti, vključno z morfologijo, velikostjo celic in ploidnostjo, omogoča enostavnejšo in priročnejšo uporabo. V nadaljevanju boste spoznali izvor in splošne lastnosti celic BxPC-3: Kaj so celice BxPC-3? Kaj je celična linija BxPC-3? Kakšen je izvor celične linije BxPC-3? Kakšna je morfologija celic BxPC-3?
- BxPC-3, celice človeškega karcinoma trebušne slinavke, so bile pridobljene iz 61-letne Evropejke z adenokarcinomom trebušne slinavke leta 1986. Te celice so bile tumorogene tudi po tem, ko je bolnica prestala več terapij z radio- in kemoterapijo. Tako je vzpostavljena celična linija neprecenljiv model za preučevanje razvoja in napredovanja raka.
- Celice BxPC-3 imajo epitelijskim celicam podobno morfologijo.
- Modalno število kromosomov za BxPC-3 je 59. Te celice imajo homozigotno delecijo na kromosomu 18q, ki kodira protein SMAD4/DPC4. Poleg tega celična linija nima mutacije BxPC-3 kras, ki je pogosta med tumorji trebušne slinavke. V teh celicah raka trebušne slinavke najdemo tudi delecijo BxPC-3 braf.
Kakšna je razlika med BxPC3 in PANC-1?
BxPC-3 PADC (pankreatični duktalni adenokarcinom) in celice PANC-1 so primarne celične linije raka trebušne slinavke z epitelijsko morfologijo. Pri tem imajo prve celice bolj epitelijske lastnosti, medtem ko imajo poznejše bolj mezenhimske lastnosti [1].
2. gojenje celic BxPC-3
Celična linija BxPC-3 se pogosto uporablja v laboratorijih za raziskave raka. Za učinkovito gojenje te celične linije raka trebušne slinavke morate poznati naslednje ključne točke. Naučili se boste: Kakšen je čas podvojitve za bxpc3? Kako gojite celično linijo BxPC-3?
Ključne točke za gojenje celic BxPC-3
|
Čas podvojitve populacije: |
Čas podvojitve celic BxPC-3 je od 48 do 60 ur. |
|
Prilepljene ali v suspenziji: |
BxPC-3 je adherentna celična linija. |
|
Razmerje delitve: |
Celice BxPC-3 se gojijo v razmerju 1:2 do 1:4. Celice se sperejo z 1 x PBS in inkubirajo z raztopino za prehod, imenovano akutaza. Po 8-10 minutah celicam dodamo sveže gojišče in celice centrifugiramo. Pelet se ponovno resuspendira v mediju in celice se prelijejo v novo posodo za gojenje. |
|
Gojišče za rast: |
Za gojenje celične linije BxPC-3 se uporablja gojišče RPMI 1640. Dopolnjeno je z 10 % fetalnega govejega seruma, 2,1 mM stabilnega glutamina in 2,0 g/L NaHCO3 za doseganje idealne rasti celic. Medij je treba zamenjati 2 do 3-krat na teden. |
|
Pogoji rasti: |
BxPC-3 celične kulture se vzdržujejo v vlažnem inkubatorju pri 37 °C, ki je povezan s 5-odstotnim dovodom CO2. |
|
Shranjevanje: |
Zamrznjene celice običajno shranjujemo pri temperaturi pod -150 °C ali v parni fazi tekočega dušika, da zaščitimo njihovo vitalnost. |
|
Postopek zamrzovanja in medij: |
Za zamrzovanje celičnih kultur BxPC-3 lahko uporabimo CM-1 ali CM-ACF. Uporablja se počasen postopek zamrzovanja, ki omogoča padec temperature le za 1 °C, da se prepreči šok za celice. |
|
Postopek odtaljevanja: |
Zamrznjene celice BxPC-3 se 40 do 60 sekund odtajajo v vnaprej nastavljeni vodni kopeli pri 37 °C. Ko ostane majhen ledeni kupček, celicam dodamo sveže gojišče in jih centrifugiramo, da odstranimo elemente zamrzovalnega gojišča. Nato se celični pelet ponovno suspendira in celice se razporedijo v erlenmajerico za rast. |
|
Raven biološke varnosti: |
BxPC-3 celične kulture se vzdržujejo v laboratorijih na 1. stopnji biološke varnosti. |
3. celična linija BxPC-3: Prednosti in omejitve
BxPC-3 je znana celična linija adenokarcinoma trebušne slinavke, ki ima več prednosti in omejitev. Tu so navedene ključne prednosti in pomanjkljivosti celične linije.
Prednosti
Glavne prednosti celic BxPC-3 so:
-
In vitro model raka trebušne slinavke
Celice BxPC-3, pridobljene iz bolnikov z adenokarcinomom trebušne slinavke, imajo ustrezne lastnosti, zato so primeren model za preučevanje obnašanja raka trebušne slinavke in vitro.
-
Tumorigena celična linija
Celice BxPC-3 imajo tumorigene lastnosti in lahko tvorijo tumorje, ko jih vbrizgamo golim ali imunsko oslabljenim mišim. Ti tumorji so zelo podobni primarnim tumorjem adenokarcinoma trebušne slinavke, zato je model ksenografta BxPC-3 idealen za preučevanje rasti in napredovanja raka.
Omejitve
Omejitve, povezane s celično linijo BxPC-3, so:
-
Navzkrižna kontaminacija
Pri celični liniji BxPC-3, tako kot pri vseh drugih, obstaja tveganje navzkrižne kontaminacije. Raziskovalci morajo biti pri ravnanju s temi celicami previdni in upoštevati stroge protokole za preprečevanje kontaminacije.
-
Počasna hitrost rasti
Celice BxPC-3 imajo razmeroma počasno stopnjo razmnoževanja, čas podvojitve pa traja od 48 do 60 ur. Ta lastnost lahko zahteva daljša obdobja inkubacije za določene poskuse, kar lahko povzroči zamude pri napredku raziskav.
4. uporaba celic BxPC-3 v raziskavah
Celice BxPC-3 se lahko velikokrat uporabijo v raziskavah raka. Najpogostejše aplikacije so:
- Raziskave raka trebušne slinavke: Celice BxPC-3 posnemajo adenokarcinom trebušne slinavke, zato se uporabljajo za raziskovanje genetskih in molekularnih mehanizmov, ki so podlaga za razvoj in rast tumorjev. Poleg tega raziskovalci s temi celicami odkrivajo nove biomarkerje in terapevtske tarče. Poleg tega celice BxPC-3 pomembno izražajo angiogene dejavnike, tj. interlevkin-8 (IL-8), prostaglandin E2 (PGE2) in žilni endotelni rastni faktor (VEGF), zato so primerne za preučevanje angiogeneze. Pri tem je angiogeneza ključni proces, povezan z rastjo in metastaziranjem raka. V študiji, objavljeni leta 2022, je bilo ugotovljeno, da prekomerna ekspresija laminina-5 gama-2 (LAMC2) v BxPC3 PDAC (duktalni adenokarcinom trebušne slinavke) poveča njegovo tumorigenezo prek uravnavanja BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR signalne poti [2].
- Odkrivanje in razvoj zdravil: Celica BxPC-3 je neprecenljiv model za testiranje zdravil proti raku. Raziskovalci preučujejo citotoksične, protimetastatične in apoptotične učinke potencialnih zdravil na BxPC3 PDAC. V študiji, ki jo je leta 2020 izvedla Alexandria Turner s sodelavci, so preučevali apoptotične lastnosti izvlečkov plodov Elaeocarpus reticulatus v celicah raka trebušne slinavke BxPC-3 [3]. Podobno je bila leta 2020 izvedena raziskava, ki je določila protirakavi potencial metanolnega izvlečka rastline Oxialis obtriangulata v celicah BxPC-3. Poleg tega so raziskovalci preučevali tudi celično mehansko pot, prek katere rastlinski izvleček izvaja terapevtske učinke [4].
5.raziskovalne objave o celicah BxPC-3
V tem razdelku so navedene nekatere najbolj citirane in zanimive publikacije, ki vključujejo celično linijo BxPC-3.
Licokumaron povzroči smrt celic BxPC-3 adenokarcinoma trebušne slinavke z zaviranjem DYRK1A
V tej objavi v reviji Chemico-Biological Interactions (2020) so bili raziskani apoptotični učinki naravnega proizvoda likokumarona na celice raka trebušne slinavke BxPC-3.
Ta raziskovalni članek je bil objavljen v reviji Anticancer Research (2022). V študiji je bilo predlagano, da hidroksiklorokin povzroči smrt celic BxPC3 z zaviranjem gena BCL-XL.
Ta raziskava je bila objavljena leta 2020 v reviji Journal of Cellular Biochemistry. V študiji je navedeno, da naravna spojina, salidrozid, izkazuje protirakavo delovanje v celicah BxPC-3 z uravnavanjem signalne kaskade HIF-1α (hipoksijo inducibilnega faktorja) in LOXL2.
Ta članek v reviji Biomedicine & Pharmacotherapy kaže, da se ibrutinib lahko uporablja kot odličen radiosenzibator pri bolnikih z rakom trebušne slinavke. Študija in vitro na celicah BxPC-3 kaže, da zmanjšuje fosforilacijo EGFR BxPC3 in izražanje pAKT ter genov nižje verige, ki jih uravnava radioterapija.
Chelidonin povzroča apoptozo prek regulacije GADD45a-p53 v celicah človeškega raka trebušne slinavke
V tej študiji v reviji Integrative Cancer Therapies je bilo predlagano, da naravni proizvod, chelidonin, deluje apoptotično v človeških celicah trebušne slinavke BxPC-3 prek regulacije signalizacije BxPC3 p53 in GADD45a.
6. viri za celično linijo BxPC-3: Vrhunske tehnologije: protokoli, videoposnetki in drugo
Celična linija BxPC-3 ima številne privlačne prednosti, zaradi katerih je primerna za raziskovalno uporabo. Številni spletni viri o celični liniji BxPC-3 omenjajo njeno ravnanje, vzdrževanje in protokol transfekcije.
- Transfekcija BxPC3: Ta videoposnetek je vodnik po korakih za učenje protokola transfekcije za celice BxPC-3.
Ta del članka obsega nekaj povezav, ki pojasnjujejo protokole za gojenje celic BxPC3.
- Kultura celic BxPC3: Ta spletna stran vam bo pomagala pri učenju protokolov za subkultiviranje in ravnanje s kriokonzerviranimi in proliferativnimi kulturami BxPC-3.
Reference
- Kim, Y. in drugi, Primerjalno proteomsko profiliranje celičnih linij duktalnega adenokarcinoma trebušne slinavke. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Overexpression of laminin-5 gamma-2 promotes tumorigenesis of pancreatic ductal adenocarcinoma through EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR cascade. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Elaeocarpus reticulatus fruit extracts reduce viability and induce apoptosis in pancreatic cancer cells in vitro. Poročila o molekularni biologiji, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Anti-cancer potential of Oxialis obtriangulata in pancreatic cancer cell through the regulation of ERK/Src/STAT3-mediated pathway. Molekule, 2020. 25(10): p. 2301.