Celice A431 - poglobljena analiza celic epidermoidnega karcinoma v dermatoloških raziskavah
A431 je celična linija človeškega epidermoidnega raka. Široko se uporablja na področju biomedicinskih raziskav, predvsem v biologiji raka, imunonkologiji in toksikoloških študijah. Poleg tega celice A431 prekomerno izražajo EGFR (receptor za epidermalni rastni dejavnik), zato se uporabljajo kot dragocen in vitro model za preučevanje celičnega cikla in z rakom povezanih signalnih poti.
V tem članku so pojasnjene osnove linije A431. Izvedeli boste naslednje:
- Celice A431: Splošne značilnosti in izvor
- Celično linijo A431: Informacije o gojenju
- Prednosti in slabosti celične linije A431
- Raziskovalna uporaba celic A431
- Raziskovalne publikacije s celicami A431
- Viri za celično linijo A431: Protokoli, videoposnetki in drugo
1. A431 celice: Splošne značilnosti in izvor
Ta del članka vam bo pomagal spoznati splošne informacije o celični liniji A431, ki jih morate poznati, preden začnete delati z njo. Na primer, kakšen je izvor celične linije A431? Kakšne so značilnosti celične linije A431? Kakšna je morfologija celic A431? Od kod izvirajo celice A431?
- A431, celična linija človeškega kožnega raka, je bila pridobljena iz epidermisa 85-letne bolnice z epidermoidnim karcinomom [1]. Ustanovili so jo D. J. Giard in drugi, ki so razvili številne druge celične linije iz solidnih tumorjev.
- Celice A-431 imajo epitelijsko morfologijo. Združujejo se in tvorijo celične skupke.
- Celična linija kožnega raka a431 je hipertriploidna. Modalno število kromosomov za to celično linijo je 74, kar se pojavlja pri približno 36 % celic. V približno 1 % celične populacije se pojavljajo tudi višje ploidije.
2.a431: Informacije o gojenju
Če poznate zahteve in postopke za gojenje celične linije, lahko z njo ravnate brez težav. Ta del članka vam bo pomagal spoznati ključne točke za gojenje celične linije A431. Na primer: Kakšen je čas podvojitve celic A431? Ali je linija rakavih celic A431 adherentna? Kakšno gojišče se uporablja za A431?
Ključne točke za gojenje celic A431
|
Čas podvojitve: |
Čas podvojitve populacije celic A431 je od 80 do 100 ur. |
|
Adherentne ali v suspenziji: |
A431 je adherentna celična linija. |
|
Gostota naselitve: |
za celično linijo A431 je idealna celična gostota 1 x104 celic/cm2. Pri tej gostoti celice potrebujejo skoraj 4 dni, da postanejo konfluentne. Adherentne celice speremo s PBS (1x) in jih inkubiramo z raztopino za prehod Accutase. Nato so bile celice ponovno suspendirane v gojišču in centrifugirane. Pobrane celice so bile ponovno resuspendirane in razpršene v nove erlenmajerice za rast. |
|
Gojišče za rast: |
Za gojenje celične linije A431 se uporablja gojišče DMEM, dopolnjeno z 10 % fetalnega govejega seruma, 4,5 g/l glukoze, 1,0 mM natrijevega piruvata, 1,5 g/l NaHCO3 in 4 mM L-glutamina. Medij je treba zamenjati vsakih 2 do 3 dni na teden. |
|
Pogoji rasti: |
A431 rakavih celic gojimo v vlažnem inkubatorju s 5-odstotnim virom CO2 pri temperaturi 37 °C. |
|
Shranjevanje: |
Celično linijo lahko shranjujemo v električnem zamrzovalniku ali v parni fazi tekočega dušika pri temperaturi pod -150 °C, saj to pripomore k zaščiti vitalnosti celic. |
|
Postopek zamrzovanja in medij: |
CM-1 ali CM-ACF sta dva zelo priporočljiva medija za zamrzovanje, ki se uporabljata za celice A431. Celice se zamrznejo z uporabo metode počasnega zamrzovanja, ki omogoča, da se temperatura zniža le za 1 stopinjo na minuto. |
|
Postopek odtaljevanja: |
Zamrznjene celice A431 se 40 do 60 sekund odtajajo v vodni kopeli pri 37 °C, ki vsebuje protimikrobno sredstvo. Ko ostane le majhen ledeni skupek, celicam dodamo gojišče in jih centrifugiramo. Zbrane celice se resuspendirajo in prelijejo v bučke za rast. |
|
Raven biološke varnosti: |
Za ravnanje s kulturami A431 in njihovo vzdrževanje se priporoča prva stopnja biološke varnosti. |
3.prednosti in slabosti celične linije A431
Celična linija A431 ima prepoznavne značilnosti ter več prednosti in slabosti. V nadaljevanju smo jih povzeli nekaj.
Prednosti
Glavne prednosti rakave celične linije A431 so:
|
Prekomerno izražanje EGFR |
Celice A431 prekomerno izražajo receptor za epidermalni rastni dejavnik (EGFR). Služijo kot pozitivna kontrola za preučevanje signalizacije EGFR in njenih posledic pri raku. Uporabljajo se tudi za ocenjevanje novih načinov zdravljenja raka. |
|
Tumorigenost |
Celice A431 so tumorogene in lahko tvorijo tumorje. Uporabljajo se lahko za razvoj ksenografskih modelov raka, ki so dragoceno orodje za preučevanje dinamike rasti tumorjev in ocenjevanje novih načinov zdravljenja raka. |
Slabosti
Slabosti celic A431 so:
|
Genetske nepravilnosti |
A431 je rakava celična linija, ki vsebuje genetske mutacije in spremembe, zaradi katerih se lahko razlikuje od prvotnih značilnosti tumorja. |
|
Mikrobiološka kontaminacija |
A431 je nagnjena k mikrobni kontaminaciji, predvsem bakterijski. Vendar lahko z vzdrževanjem standardnih aseptičnih pogojev gojenja preprečimo takšno kontaminacijo v celičnih kulturah A431. |