Celice A431 - poglobljena analiza celic epidermoidnega karcinoma v dermatoloških raziskavah

A431 je celična linija človeškega epidermoidnega raka. Široko se uporablja na področju biomedicinskih raziskav, predvsem v biologiji raka, imunonkologiji in toksikoloških študijah. Poleg tega celice A431 prekomerno izražajo EGFR (receptor za epidermalni rastni dejavnik), zato se uporabljajo kot dragocen in vitro model za preučevanje celičnega cikla in z rakom povezanih signalnih poti.

V tem članku so pojasnjene osnove linije A431. Izvedeli boste naslednje:

  1. Celice A431: Splošne značilnosti in izvor
  2. Celično linijo A431: Informacije o gojenju
  3. Prednosti in slabosti celične linije A431
  4. Raziskovalna uporaba celic A431
  5. Raziskovalne publikacije s celicami A431
  6. Viri za celično linijo A431: Protokoli, videoposnetki in drugo

1. A431 celice: Splošne značilnosti in izvor

Ta del članka vam bo pomagal spoznati splošne informacije o celični liniji A431, ki jih morate poznati, preden začnete delati z njo. Na primer, kakšen je izvor celične linije A431? Kakšne so značilnosti celične linije A431? Kakšna je morfologija celic A431? Od kod izvirajo celice A431?

  • A431, celična linija človeškega kožnega raka, je bila pridobljena iz epidermisa 85-letne bolnice z epidermoidnim karcinomom [1]. Ustanovili so jo D. J. Giard in drugi, ki so razvili številne druge celične linije iz solidnih tumorjev.
  • Celice A-431 imajo epitelijsko morfologijo. Združujejo se in tvorijo celične skupke.
  • Celična linija kožnega raka a431 je hipertriploidna. Modalno število kromosomov za to celično linijo je 74, kar se pojavlja pri približno 36 % celic. V približno 1 % celične populacije se pojavljajo tudi višje ploidije.

Tumor, ki raste pod kožo in se infiltrira v spodaj ležeča tkiva.

2.a431: Informacije o gojenju

Če poznate zahteve in postopke za gojenje celične linije, lahko z njo ravnate brez težav. Ta del članka vam bo pomagal spoznati ključne točke za gojenje celične linije A431. Na primer: Kakšen je čas podvojitve celic A431? Ali je linija rakavih celic A431 adherentna? Kakšno gojišče se uporablja za A431?

Ključne točke za gojenje celic A431

Čas podvojitve:

Čas podvojitve populacije celic A431 je od 80 do 100 ur.

Adherentne ali v suspenziji:

A431 je adherentna celična linija.

Gostota naselitve:

za celično linijo A431 je idealna celična gostota 1 x104 celic/cm2. Pri tej gostoti celice potrebujejo skoraj 4 dni, da postanejo konfluentne. Adherentne celice speremo s PBS (1x) in jih inkubiramo z raztopino za prehod Accutase. Nato so bile celice ponovno suspendirane v gojišču in centrifugirane. Pobrane celice so bile ponovno resuspendirane in razpršene v nove erlenmajerice za rast.

Gojišče za rast:

Za gojenje celične linije A431 se uporablja gojišče DMEM, dopolnjeno z 10 % fetalnega govejega seruma, 4,5 g/l glukoze, 1,0 mM natrijevega piruvata, 1,5 g/l NaHCO3 in 4 mM L-glutamina. Medij je treba zamenjati vsakih 2 do 3 dni na teden.

Pogoji rasti:

A431 rakavih celic gojimo v vlažnem inkubatorju s 5-odstotnim virom CO2 pri temperaturi 37 °C.

Shranjevanje:

Celično linijo lahko shranjujemo v električnem zamrzovalniku ali v parni fazi tekočega dušika pri temperaturi pod -150 °C, saj to pripomore k zaščiti vitalnosti celic.

Postopek zamrzovanja in medij:

CM-1 ali CM-ACF sta dva zelo priporočljiva medija za zamrzovanje, ki se uporabljata za celice A431. Celice se zamrznejo z uporabo metode počasnega zamrzovanja, ki omogoča, da se temperatura zniža le za 1 stopinjo na minuto.

Postopek odtaljevanja:

Zamrznjene celice A431 se 40 do 60 sekund odtajajo v vodni kopeli pri 37 °C, ki vsebuje protimikrobno sredstvo. Ko ostane le majhen ledeni skupek, celicam dodamo gojišče in jih centrifugiramo. Zbrane celice se resuspendirajo in prelijejo v bučke za rast.

Raven biološke varnosti:

Za ravnanje s kulturami A431 in njihovo vzdrževanje se priporoča prva stopnja biološke varnosti.

A-431 sferoidi pri različnih gostotah celic.

3.prednosti in slabosti celične linije A431

Celična linija A431 ima prepoznavne značilnosti ter več prednosti in slabosti. V nadaljevanju smo jih povzeli nekaj.

Prednosti

Glavne prednosti rakave celične linije A431 so:

Prekomerno izražanje EGFR

Celice A431 prekomerno izražajo receptor za epidermalni rastni dejavnik (EGFR). Služijo kot pozitivna kontrola za preučevanje signalizacije EGFR in njenih posledic pri raku. Uporabljajo se tudi za ocenjevanje novih načinov zdravljenja raka.

Tumorigenost

Celice A431 so tumorogene in lahko tvorijo tumorje. Uporabljajo se lahko za razvoj ksenografskih modelov raka, ki so dragoceno orodje za preučevanje dinamike rasti tumorjev in ocenjevanje novih načinov zdravljenja raka.

Slabosti

Slabosti celic A431 so:

Genetske nepravilnosti

A431 je rakava celična linija, ki vsebuje genetske mutacije in spremembe, zaradi katerih se lahko razlikuje od prvotnih značilnosti tumorja.

Mikrobiološka kontaminacija

A431 je nagnjena k mikrobni kontaminaciji, predvsem bakterijski. Vendar lahko z vzdrževanjem standardnih aseptičnih pogojev gojenja preprečimo takšno kontaminacijo v celičnih kulturah A431.


4. Raziskovalna uporaba celic A431

Celična linija A431 se pogosto uporablja pri raziskavah raka. Tukaj je navedenih nekaj obetavnih aplikacij te celične linije kožnega raka. Biologija raka: A431 je odlično raziskovalno orodje za raziskovanje celičnih in molekularnih mehanizmov, ki spodbujajo rast, razvoj, metastaziranje in invazijo raka.
Raziskovalci so to celično linijo intenzivno uporabljali za intenzivno preučevanje celičnih signalnih poti, vključenih v različne procese v rakavih celicah. V študiji iz leta 2018 so na primer raziskali, da je signalna pot PI3K/AKT/mTOR vključena v proliferacijo rakavih celic, zaviranje te poti pa povzroči apoptozo v kožnih tumorskih celicah A431 [2]. Poleg tega je druga študija poročala tudi o prispevku poti PI3K/AKT/mTOR pri metastaziranju celic kožnega raka in prehodu iz epitelija v mezenhim (EMT), kar kaže na njeno ključno vlogo pri razvoju in napredovanju raka [3]. Testiranje in vrednotenje zdravil: Celice A431 se uporabljajo za ocenjevanje učinkovitosti in uspešnosti potencialnih kandidatov za zdravila proti raku. Raziskovalci so določili učinke zdravil na proliferacijo, metastaziranje, invazijo in apoptozo rakavih celic z več laboratorijskimi poskusi - raziskavo je izvedla Nurhidayah Ab. Rahim in sodelavci so uporabili celice A431 in ocenili terapevtski potencial biogeno sintetiziranih nanodelcev srebra rastline Alstonia angustiloba in 2022. Ugotovitve so razkrile, da imajo angustiloba-AgNPs antiproliferativne učinke na celice kožnega ploščatega karcinoma [4]. Ksenografski modeli tumorjev: Celična linija A431 je tumorigena in lahko ob inokulaciji v mišji model tvori tumorje. Zato je koristno orodje za razvoj mišjih ksenografskih modelov za raziskovanje biologije raka in vivo. V več študijah je bila za razvoj ksenografskih modelov tumorjev uporabljena rakava celična linija A431. Yu Jin Lim in njegova ekipa so z uporabo celic A431 razvili mišji model ksenografta kožnega tumorja za oceno protitumorskih in radiosenzibilizacijskih učinkov eksogenega epidermalnega rastnega faktorja (EGF) in vivo [5]. 5. Raziskovalne publikacije s celicami A431 Tukaj je nekaj pomembnih raziskovalnih publikacij, v katerih je predstavljena celična linija kožnega raka A431. Efficacy of biopolymeric PVA-AuNPs and PCL-Curcumin loaded electrospun nanofibers and their anticancer activity against A431 skin cancer cell line Ta članek je bil leta 2020 objavljen v Materials Today Communications. V študiji je bil ocenjen protirakavi potencial s kurkuminom naloženih elektrospun nanovlaken iz poli-ε-kaprolaktona in polivinil alkohola-AuNPs proti rakavim celicam A431. miRNA-221 spodbuja napredovanje kožnega ploščatoceličnega karcinoma s ciljenjem na PTEN V tej študiji, objavljeni v Cellular & Molecular Biology Letters (2019), je bilo predlagano, da ima mikroRNA-221 onkogeno vlogo pri kožnem ploščatoceličnem karcinomu s ciljenjem na gen PTEN. Vinkristin iz glive Eutypella spp-CrP14, izoliran iz Catharanthus roseus, povzroča apoptozo v celični liniji človeškega ploščatega karcinoma A431 Ta raziskava v publikaciji BMC Complementary Medicine and Therapies (2016) kaže, da vinkristin, sekundarni metabolit, izoliran iz glive Eutypella spp - CrP14, povzroča apoptozo v celicah A431. Prekomerna ekspresija CDC42SE1 v celicah A431 zmanjša proliferacijo celic z zaviranjem poti Akt Ta študija je bila objavljena leta 2019 v reviji Cells. Ta raziskava predlaga gen CDC42SE1 kot pomemben biomarker napredovanja kožnega raka, saj njegova znižana regulacija olajša tumorigenezo. Metformin zavira proliferacijo celic A431 z modulacijo signalne poti PI3K/Akt Ta raziskava je bila objavljena v reviji Experimental and therapeutic medicine leta 2015. Predlagala je, da metformin zavira proliferacijo celične linije kožnega raka a431 z uravnavanjem signalne poti PI3K/Akt. 6. Viri za celično linijo A431: Tu je nekaj spletnih virov s celično linijo A431 kožnega raka: Protokoli, videoposnetki in drugo: Transfekcija celic A-431: Ta povezava vsebuje vodnik po korakih za transfekcijo rakavih celic A431. Naslednja povezava vsebuje informacije o celičnih kulturah za celice A431. Celična linija raka A431: Ta povezava vsebuje potrebne informacije o celični kulturi za celično linijo A431. Vključuje gojišča, gostoto celic, ravnanje s kriokonzerviranimi in proliferativnimi kulturami itd: Ta spletna stran vsebuje kratek protokol za gojenje celične linije A431.

Reference:

Quadri, M., et al., Investigating Cutaneous Squamous Cell Carcinoma in vitro and in vivo: Novel 3D Tools and Animal Models (Preučevanje kožnega ploščatoceličnega karcinoma in vitro in in vivo: nova 3D orodja in živalski modeli). Front Med (Lozana), 2022. 9: p. 875517.
Zeng, N., et al., Anticancer activity of caffeic acid n-butyl ester against A431 skin carcinoma cell line occurs via induction of apoptosis and inhibition of the mTOR/PI3K/AKT signaling pathway Retraction in/10.3892/mmr. 2021.12011.
Poročila o molekularni medicini, 2018. 17(4): p. 5652-5657.
Rahaman, A., et al., Eukaliptol cilja na pot PI3K/Akt/mTOR za zaviranje metastaziranja kožnega raka.
Carcinogenesis, 2022. 43(6): str. 571-583. Rahim, N.A., et al., Investigation of antiproliferative mechanisms of Alstonia angustiloba-silver nanoparticles in skin squamous cell carcinoma (A431 cell line).
Journal of Molecular Structure, 2022. 1250: str. 131814. Lim, Y.J., et al., Tumor growth suppression and enhanced radioresponse by an exogenous epidermal growth factor in mouse xenograft models with A431 cells.
Raziskave in zdravljenje raka: Uradna revija Korejskega združenja za boj proti raku, 2015. 47(4): p. 921-930.


Ugotovili smo, da ste v drugi državi ali uporabljate drug jezik brskalnika, kot je trenutno izbran. Ali želite sprejeti predlagane nastavitve?

Zapri