Celice Hep2 in njihova vloga v raziskavah raka grla

Celice Hep 2 so ključni in vitro model, ki se obsežno uporablja na različnih področjih biomedicinske raziskave, kot so revmatologija, raziskave raka in imunologija. Te človeške celice, ki izvirajo iz karcinoma grla, so bile ključne za razjasnitev tkiva izvora in specifičnih značilnosti neoplazem grla. Njihov pomen je dobro priznan v translacijskih raziskavah raka, kjer so znatno prispevale k našemu razumevanju narave in izvora raka grla ter so zelo prisotne v publikacijah o raziskavah raka grla [1].

📋 Celična linija Hep2 — kratki podatki

Rastno gojišče: Za gojenje celic Hep 2 se uporablja EMEM ali Eagleovo minimalno esencialno gojišče. Ta gojišče je dopolnjeno z 10 % FBS, 1,0 g/l glukoze, 2,2 g/l NaHCO3, 2,0 mM L-glutamina, 1 % NEAA in 1 mM natrijevega piruvata za idealno rast celic. Medij je treba zamenjati 2- do 3-krat na teden.
Čas podvojitve: Čas podvojitve za celice Hep 2 je približno 40 ur.
Vrsta rasti: Celice Hep 2 so adhezivne in rastejo v monosloje.
Raven biološke varnosti: BSL-1
Na voljo pri: Cytion — Naroči Hep2

Izvor in splošne značilnosti celic Hep 2

Izvor in splošne značilnosti celične linije določajo njeno uporabnost v raziskavah. Ta razdelek vam bo pomagal spoznati izvor in nekatere pomembne značilnosti celic Hep 2. Izvedeli boste na primer: Kaj je celična linija HEp-2? Kakšen je izvor celic Hep 2? In kakšna je morfologija celic Hep 2?

Hep 2, nesmrtena linija človeških epitelnih celic, je bila prvič opisana leta 1954 s strani H.W. Toolana kot celice laringealnega karcinoma. Vendar pa je bilo v zadnjem času poročano, da je linija celic Hep 2 sestavljena iz celic adenokarcinoma materničnega vratu in izvira iz kontaminacije linije celic Hela [2].
Celice Hep 2 vsebujejo markerne kromosome Hela in so pozitivne na keratin ter zaporedja DNA človeškega papilomavirusa, kar je bilo potrjeno z imunoperoksidaznim barvanjem oziroma s PCR.
Hep 2, derivat celične linije Hela, ima epitelijsko podobno morfologijo.
Celična linija Hep 2 kaže tako strukturne kot številčne kromosomske nepravilnosti s skoraj triploidnim kariotipom [3].

Delitev celic raka materničnega vratu HeLa pod mikroskopom.

Celična linija HEp-2: Podatki o gojenju

Preden začnemo delati s celično linijo, moramo poznati naslednje ključne točke za njeno gojenje. Te informacije so lahko koristne za učinkovito gojenje in vzdrževanje celične linije. Vedeti morate: Kakšen je čas podvojitve celic HEp-2? Ali so celice Hep 2 adhezivne? Kakšna je gostota posevka celic Hep2?

Čas podvojitve populacije:: Čas podvojitve, naveden za celice Hep 2, je približno 40 ur.
Adhezivne ali v suspenziji:: Celice Hep 2 so adhezivne in rastejo v monosloje.
Gostota posevka:: Gostota posevka 1 x 10⁴ celic/cm² je idealna za kulturo celic Hep 2. Za posevek se adhezivne celice Hep 2 sperete z raztopino 1 x PBS, čemur sledi inkubacija z raztopino za disociacijo Accutase. Po 8–10-minutni inkubaciji pri sobni temperaturi se celice ponovno suspendirajo v gojišču in centrifugirajo. Zbrane celice se nato razporedijo v sveže gojišče in prelijejo v nove kolbe za gojenje.
Gostota sejanja:: Za gojenje celic Hep 2 se uporablja EMEM ali minimalni esencialni medij Eagle. Ta gojišče je dopolnjeno z 10 % FBS, 1,0 g/l glukoze, 2,2 g/l NaHCO3, 2,0 mM L-glutamina, 1 % NEAA in 1 mM natrijevega piruvata za idealno rast celic. Gojilno sredstvo je treba zamenjati 2- do 3-krat na teden.
Pogoji rasti:: Tako kot druge linije sesalskih celic se tudi Hep 2 goji v vlažnem inkubatorju, nastavljenem na temperaturo 37 °C in s stalnim dovajanjem 5 % CO2.
Shranjevanje:: Celice Hep 2 se lahko shranjujejo v električnih zamrzovalnikih z izredno nizko temperaturo (pod -150 °C) ali v plinski fazi tekočega dušika za dolgoročno shranjevanje.
Postopek zamrzovanja in gojišče:: Za zamrzovanje celic Hep 2 se priporočata medija CM-1 ali CM-ACF. Celice je treba zamrzovati s postopkom počasnega zamrzovanja, ki omogoča postopno zniževanje temperature za 1 °C in ohranja vitalnost celic.
Postopek odmrzovanja:: Vialo z zamrznjenimi celicami se hitro odmrzne z mešanjem v vodni kopeli pri 37 °C, dokler ne ostane le majhen kepec ledu. Celice se nato dodajo v svež medij in centrifugirajo, da se odstranijo sestavine medija za zamrzovanje. Kasneje se celični pelet ponovno suspendira v mediju in celice se razporedijo v kultivacijske kolbe. Celice morajo počivati skoraj 24 ur, da se prilepijo.
Raven biološke varnosti: Za ravnanje s celicami Hep 2 in vzdrževanje njihovih kultur se priporoča laboratorij z ravnjo biološke varnosti 1.

Hep2 cells

Celice Hep 2 pred in po doseganju konfluence.

Prednosti in omejitve celic Hep 2

Skoraj vse celične linije imajo edinstveno kombinacijo prednosti in omejitev, ki vplivajo na njihovo uporabo v raziskovalnem področju. V tem poglavju bomo opisali nekaj glavnih prednosti in slabosti, povezanih s celično linijo Hep 2.

Prednosti

Glavne prednosti celične linije Hep 2 so:

Človeški izvor: Hep 2 izhaja iz človeških epitelnih celic, kar jo naredi dragocen in vitro model za preučevanje človeških bolezni in virusnih okužb.
Detekcija ANA: Celična linija Hep 2 ima naravni niz beljakovin, ki predstavlja številne antigene, kar jo naredi odličen substrat za detekcijo antinuklearnih protiteles (ANA). Ta lastnost omogoča specifično in visoko občutljivo presejanje ANA v serumu, kar jo naredi ključno diagnostično orodje za prepoznavanje bolezni vezivnega tkiva.

Omejitve

Kromosomske anomalije: Celice Hep 2 kažejo številne številčne in strukturne kromosomske anomalije. Te anomalije lahko vplivajo na vedenje celic in omejujejo njihovo uporabnost v nekaterih laboratorijskih poskusih.
Tumorigenost: Hep 2, človeška epitelijska celična linija, ki izhaja iz tumorja, lahko ima genetske anomalije, ki običajno niso prisotne v epitelijskih celicah. Posledično je uporaba celic Hep 2 lahko omejena v določenih študijah, ki se osredotočajo na normalno celično fiziologijo.

Širjenje uporabe celične linije Hep 2 v biomedicinskih raziskavah

Celična linija Hep 2 izstopa kot vzoren model za številne aplikacije v biomedicinskih raziskavah. Te celice, znane po svoji vsestranskosti, imajo ključno vlogo v in vitro poskusih, od analize receptorjev do raziskovanja kompleksnih bolezni.

Raziskovanje tumorigenih mehanizmov in terapevtskih ciljev s celicami Hep 2

Celice Hep 2 so tumorogene in so ključne za poglobljeno raziskovanje zapletenosti biologije raka. Omogočajo vpogled v signalne poti raka, mehanistične študije ter so temelj pri presejanju in ocenjevanju zdravil proti raku. Na primer, v poglobljeni študiji so uporabili celice Hep 2 za opredelitev vpliva miRNA-33a na proliferacijo rakavih celic. Ugotovitve so osvetlile antiproliferativne učinke miRNA-33a prek njegove interakcije s PIM1, znanim onkogenom, kar nakazuje nov terapevtski cilj [4]. V drugem primeru so Hep 2 uporabili pri ocenjevanju terapevtskega potenciala nanodelcev cinkovega oksida Marsdenia tenacissima, pri čemer so poudarili njihovo antiproliferativno in apoptotično učinkovitost [5].

Napredek v raziskavah virologije z ugotovitvami o celicah Hep 2

Občutljivost celic Hep 2 na različne človeške viruse jih naredi neprecenljiv vir v viroloških raziskavah. Učinkovito so bile uporabljene pri izražanju virusnih genov SARS-CoV-2 za razkrivanje kompleksnega medsebojnega delovanja med virusom in celičnimi mehanizmi gostitelja [6]. Ta uporaba je še posebej pomembna v današnjem času, ko je razumevanje in boj proti virusnim okužbam, kot je COVID-19, globalna prioriteta.

Razkrivanje celičnih funkcij: genetska manipulacija v celicah Hep 2

Prilagodljivost celične linije Hep 2 na genetsko manipulacijo poudarja njeno uporabnost v mehanističnih študijah. Raziskovalci izkoriščajo to lastnost za modulacijo genske ekspresije in pojasnitev vloge posameznih genov v celičnih funkcijah. V eni od pomembnih študij so v celicah Hep 2 prekomerno eksprimirali beljakovino RBM6, ki se veže na RNA, kar je olajšalo preučevanje njenega potenciala kot tumor supresorja in zagotovilo dragocene vpoglede v molekularne osnove raka [7].

Izboljšanje diagnostike bolezni z uporabo celične linije Hep 2

Poleg teh raziskovalnih področij so celice Hep 2 priznane zaradi svojih diagnostičnih zmogljivosti, zlasti pri odkrivanju ANA, ki so ključnega pomena pri diagnozi avtoimunskih bolezni, kot je sistemski eritematozni lupus. Natančnost, s katero celice Hep 2 lahko predstavijo ANA, podpira diagnozo in razvoj ciljnih zdravljenj, izboljšuje naše razumevanje avtoimunskih patologij in izboljšuje oskrbo bolnikov.

S temi raznolikimi uporabami so celice Hep 2 znatno prispevale k napredku v translacijskih raziskavah raka, študiju virusnih okužb in raziskovanju celičnih mehanizmov. Njihov prispevek k pridobivanju klinično relevantnih podatkov je neprecenljiv, kar potrjuje njihovo nepogrešljivo vlogo tako v laboratoriju kot v klinični praksi. S nadaljnjim razvojem raziskav bo celična linija Hep 2 zagotovo ostala v ospredju, saj pomaga pri odkrivanju novih oblik zdravljenja in širi naše znanje o zdravju in boleznih človeka.

Zagotovite si celično linijo HEp-2 še danes

430,00 €*

Vsebina: 1.5 milliliter

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 300397

Celice Hep 2: Raziskovalne publikacije

V nadaljevanju so navedene nekatere zanimive in najpogosteje citirane raziskovalne publikacije o celicah Hep 2.

Sinteza nanodelcev cinkovega oksida iz Marsdenia tenacissima zavira celično proliferacijo in inducira apoptozo v celicah raka grla (Hep-2)
Ta članek, objavljen v reviji Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2019), je raziskoval protirakav potencial biosintetiziranih nanodelcev cinkovega oksida iz rastline Marsdenia tenacissima v celični liniji Hep 2.
Bioformulirani nanodelci PLGA, obogateni s hesperidinom, preprečujejo mitohondrijsko posredovano notranjo apoptično pot v rakavih celicah
Ta članek je bil objavljen v reviji Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials leta 2021. Ta študija je preučevala protirakave lastnosti bioformuliranih nanodelcev iz polilaktid-koglikolne kisline (PLGA), obogatenih s hesperidinom, v celicah Hep 2.
Protivirusna aktivnost etanolnega ekstrakta Lophatherum gracile proti okužbi
z respiratornim sincicijskim virusom Ta publikacija v reviji Journal of Ethnopharmacology iz leta 2019 je uporabila celice Hep 2 za preučevanje okužbe z respiratornim sincicijskim virusom in presejanje protivirusnih zdravil proti njemu. Študija je poročala o obetavnem protivirusnem potencialu etanolnega izvlečka zdravilne rastline, tj. Lophatherum gracile, proti okužbi z respiratornim sincicijskim virusom.
Ocena vodnih izvlečkov štirih aromatičnih rastlin glede na njihovo aktivnost proti adheziji Candida albicans na človeške epitelne celice
HEp-2 Ta raziskava je objavljena v reviji Gene Reports (2020). Ta študija je raziskala zaviralni potencial vodnih izvlečkov štirih aromatičnih rastlin proti adheziji Candida albicans na človeške epitelne celice Hep 2.
Wnt1-inducirani signalni protein 1 regulira glikolizo in kemoresistenco ploskokletnega karcinoma grla prek poti
YAP1/TEAD1/GLUT1 Ta študija je bila objavljena v reviji Journal of Cellular Physiology leta 2019. Študija poroča, da Wnt1-inducirani signalni protein 1 (WISP1) interagira s potjo YAP1/TEAD1/GLUT1 in regulira metabolizem glukoze ter kemoresistenco v celični liniji Hep 2.

Viri za celično linijo Hep2: protokoli, videi in več

Hep 2 je dobro znana celična linija. Na voljo je več virov, ki obravnavajo celično linijo Hep 2.

Subkultiviranje celične linije Hep 2: Ta video je podrobna navodila za subkultiviranje celic Hep 2.
Presejanje celic Hep 2 za ANA: Ta video posnetek pojasnjuje presejanje za antinuklearna protitelesa (ANA) z uporabo celične linije Hep 2.
Kultiviranje Hep 2: Ta povezava vsebuje osnovne informacije o celični kulturi celic Hep 2. Vključuje delitev celic, zamrzovanje celic in odmrzovanje.

Pogosto zastavljena vprašanja o celicah HEp-2 v biomedicinskih raziskavah

Viri

Fusi, M. in S. Dotti, Prilagoditev celične linije HEp-2 na popolnoma brezživalske gojitvene sisteme in analiza rasti celic v realnem času. Biotechniques, 2021. 70(6): str. 319–326.
Gorphe, P., Celovit pregled celične linije Hep-2 v translacijskih raziskavah raka grla. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): str. 644–649.
Wang, M., et al., Rakom povezani fibroblasti v človeškem HEp-2 vzpostavljenem ksenotransplantiranem tumorju grla ne izhajajo iz rakavih celic prek epitelno-mezenhimalne preobrazbe, so fenotipsko aktivirani, vendar kariotipsko normalni. PLoS One, 2015. 10(2): str. e0117405.
Karatas, O.F., Antiproliferativni potencial miR-33a v celicah raka grla Hep-2 prek ciljanja PIM1. Head Neck, 2018. 40(11): str. 2455–2461.
Wang, Y., et al., Sinteza nanodelcev cinkovega oksida iz Marsdenia tenacissima zavira celično proliferacijo in inducira apoptozo v celicah raka grla (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: str. 111624.
Zhang, J., et al., Sistemska in molekularna študija subcelularne lokalizacije proteinov SARS-CoV-2. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): str. 269.
Wang, Q., et al., Beljakovina RBM6, ki se veže na RNA, kot gen za zaviranje tumorjev zavira rast in napredovanje laringokarcinoma. Gene, 2019. 697: str. 26–34.