Pojdi na domačo stran
Nakupovalna košarica 0,00 €*
Prikaži vse kategorije SK-MEL celice v napovedovanju odziva na imunoterapijo Nazaj

Celice SK-MEL pri napovedovanju odziva na imunoterapijo

Revolucija v imunoterapiji je spremenila zdravljenje melanoma, saj so zaviralci kontrolnih točk dosegli trajne odgovore pri pomembni podskupini bolnikov. V družbi Cytion se zavedamo, da napovedovanje, kateri bolniki se bodo odzvali na imunoterapijo, ostaja ključni izziv, ki zahteva zanesljive predklinične modele, ki povzemajo interakcije med tumorjem in imunskim sistemom. Melanomske celične linije SK-MEL so bistvene platforme za preučevanje molekularnih dejavnikov, ki določajo odzivnost na imunoterapijo, in ugotavljanje biomarkerjev, ki lahko usmerjajo izbiro bolnikov za ta preobrazbena zdravljenja.

Ključne ugotovitve

  • Linije SK-MEL kažejo spremenljivo izražanje PD-L1, ki vpliva na odziv na zaviralce kontrolnih točk
  • Mutacijsko breme tumorja in predstavitev neoantigenov korelirata z imunogenostjo
  • Sistemi za ko-kulture z imunskimi celicami omogočajo funkcionalno oceno protitumorske imunosti
  • Celovitost signalne poti interferona gama napoveduje občutljivost za imunoterapijo
  • Mehanizme odpornosti, vključno z okvarami predstavitve antigenov, je mogoče modelirati in vitro
Celice SK-MEL v raziskavah imunoterapije Panel SK-MEL SK-MEL-1: BRAF WT SK-MEL-2: NRAS mut SK-MEL-5: BRAF V600E SK-MEL-28: BRAF V600E SK-MEL-29.1: Odporen Spremenljivka PD-L1/HLA Os imunskih kontrolnih točk SK-MEL PD-L1+ T-celice PD-1+ Zaviralni signal → Blokiran z anti-PD-1 Biomarkerji odziva - Stopnja izražanja PD-L1 - Mutacijsko breme tumorja - obremenitev z neoantigeni - Izražanje HLA razreda I - Status poti IFN-γ - β2-mikroglobulin nedotaknjen Mehanizmi odpornosti na imunoterapijo Izguba/zmanjšanje števila HLA mutacije β2M Mutacije JAK1/2 Neobčutljivost IFN-γ Sistemi za testiranje s ko-kulturami - SK-MEL + PBMC ko-kulture - Ubijanje tumorsko reaktivnih celic T - Sproščanje IFN-γ/granizma B - Citotoksičnost v realnem času (xCELLigence) Kombinacijske strategije - Anti-PD-1 + Anti-CTLA-4 - Nadzorna točka + zaviralec BRAF/MEK - ICI + onkolitični virus - ICI + radioterapija © Cytion - omogočanje raziskav imunoterapije melanoma

Panel celičnih linij melanoma SK-MEL

Serija SK-MEL vključuje več melanomskih celičnih linij, pridobljenih iz različnih bolnikov in metastatskih mest, kar zagotavlja raznolik panel za preučevanje heterogenosti odziva na imunoterapijo. Te linije se razlikujejo po mutacijah, izražanju imunskih označevalcev in občutljivosti na ciljane in imunske terapije.

Naše celice SK-MEL-28 (300337) vsebujejo mutacijo BRAF V600E, ki jo najdemo pri približno 50 % melanomov. Ta linija izraža zmerno raven PD-L1 in se je pogosto uporabljala za preučevanje interakcije med ciljnim zdravljenjem BRAF in imunoterapijo.

Celice SK-MEL-5 (300157) so podobno nosilec BRAF V600E, vendar imajo drugačne imunološke lastnosti, kar omogoča primerjalne študije o vplivu genetskega ozadja na imunsko prepoznavanje. Celice SK-MEL-1 (300424 ) in SK-MEL-2 (300423) predstavljajo melanome divjega tipa BRAF z različnim statusom NRAS.

Za širše raziskave melanoma so naše celice A375 (300110) dodaten model z mutantom BRAF in dobro opisanimi imunološkimi lastnostmi.

Izražanje PD-L1 in odziv na blokado kontrolnih točk

Izražanje programiranega liganda smrti 1 (PD-L1) na tumorskih celicah služi kot ključni biomarker za odziv na zaviralce kontrolnih točk, čeprav je njegova napovedna vrednost nepopolna. Linije SK-MEL kažejo spremenljivo konstitutivno izražanje PD-L1, ki se lahko dodatno inducira z interferonom gama, kar posnema mehanizem adaptivne imunske odpornosti, opažen v bolnikovih tumorjih.

Kvantifikacija površinskega PD-L1 s pretočno citometrijo omogoča opredelitev ravni izražanja v linijah SK-MEL. Konstitutivno izražanje se giblje od nizkega do zmernega, zdravljenje z IFN-γ (10-50 ng/ml za 24-48 ur) pa dramatično poveča PD-L1 v odzivnih linijah.

Induciranje PD-L1 z IFN-γ kaže na intaktno interferonsko signalizacijo, ki je povezana z občutljivostjo na zaviralce kontrolnih točk. Linije z okvarjeno signalizacijo JAK-STAT kažejo oslabljeno indukcijo PD-L1 in pogosto kažejo odpornost na imunoterapijo, kar predstavlja klinično pomemben mehanizem odpornosti.

Sistemi za ko-kulture tumorja in imunskega sistema

Za funkcionalno oceno protitumorske imunosti so potrebni sistemi ko-kulture, ki omogočajo interakcijo med celicami SK-MEL in imunskimi efektorji. Mononuklearne celice periferne krvi (PBMC) ali prečiščene populacije celic T se lahko gojijo skupaj s celicami melanoma za oceno imunsko posredovanega ubijanja.

S testi citotoksičnosti se količinsko opredeli ubijanje celic T tarč SK-MEL z različnimi odčitki, vključno s sproščanjem kroma, sproščanjem laktatne dehidrogenaze (LDH) ali spremljanjem impedance v realnem času. Protitelesa kontrolnih točk, dodana tem ko-kulturam, lahko povečajo citotoksičnost celic T, kar omogoča funkcionalno potrditev blokade osi PD-1/PD-L1.

S testi sproščanja citokinov se meri izločanje IFN-γ, TNF-α, granzima B in perforina v celicah T po gojenju s celicami SK-MEL. Povečana proizvodnja citokinov kaže na produktivno aktivacijo celic T, ki lahko napoveduje odziv na imunoterapijo in vivo.

Tridimenzionalne sferoidne ko-kulture bolje modelirajo tumorsko mikrookolje in vključujejo prostorske omejitve, ki vplivajo na infiltracijo in ubijanje celic T. Sferoidi SK-MEL, gojeni skupaj s celicami T, omogočajo vizualizacijo prodiranja imunskih celic in ubijanja tarčnih celic v strukturah, podobnih tumorju.

Predstavitev antigenov in prepoznavanje neoantigenov

Učinkovita protitumorska imunost zahteva prepoznavanje tumorskih celic s predstavitvijo tumorskih antigenov celicam T prek glavnega histokompatibilnostnega kompleksa (MHC). Linije SK-MEL se razlikujejo po izražanju HLA razreda I, kar neposredno vpliva na imunsko prepoznavanje in odziv na zaviralce kontrolnih točk.

Analiza tipizacije in izražanja HLA opisuje sposobnost predstavitve antigenov vsake linije SK-MEL. Izguba razreda HLA I zaradi genetskih sprememb (mutacije β2-mikroglobulina, delecije genov HLA) ali epigenetskega utišanja predstavlja pogost mehanizem odpornosti na imunoterapijo, ki ga je mogoče modelirati z uporabo specifičnih linij SK-MEL.

Algoritmi za napovedovanje neoantigenov analizirajo mutacijsko pokrajino linij SK-MEL, da bi prepoznali potencialne tumorsko specifične antigene. Linije z večjim mutacijskim bremenom na splošno vsebujejo več neoantigenov, kar je povezano z večjo imunogenostjo in odzivom na zaviralce kontrolnih točk.

Modeliranje mehanizmov odpornosti

Razumevanje odpornosti na imunoterapijo je bistveno za razvoj strategij za premagovanje neuspešnega zdravljenja. Celice SK-MEL se lahko uporabijo za modeliranje primarnih in pridobljenih mehanizmov odpornosti.

Mutacije JAK1/2 motijo signalizacijo IFN-γ, ki je bistvena za indukcijo PD-L1 in ubijanje, posredovano s celicami T. Linije SK-MEL s spremenjenimi mutacijami JAK modelirajo ta mehanizem odpornosti in omogočajo pregledovanje strategij za ponovno vzpostavitev občutljivosti.

izguba β2-mikroglobulina odpravi površinsko izražanje HLA razreda I, zaradi česar so tumorske celice nevidne za citotoksične celice T. Ta mehanizem se pojavi pri približno 30 % melanomov, odpornih na imunoterapijo, in ga je mogoče modelirati z izločanjem CRISPR v linijah SK-MEL.

Priporočeni izdelki za raziskave imunoterapije melanoma:

To spletno mesto uporablja piškotke, da vam zagotovi najboljšo izkušnjo na našem spletnem mestu... Več informacij.
- Imprint

Ugotovili smo, da ste v drugi državi ali uporabljate drug jezik brskalnika, kot je trenutno izbran. Ali želite sprejeti predlagane nastavitve?

Zapri