Pochopenie "čísla prechodu"
Pojem "číslo pasáže" je pre bunkové kultúry kľúčový a označuje počet subkultúr alebo presunov bunkovej línie do čerstvého rastového média po jej prvom oživení z kryokonzervácie alebo po prijatí z referenčnej bunkovej banky. Táto metrika je kľúčová pri sledovaní vývoja a histórie bunkovej kultúry.
Prehľad procesov
- V bežnej praxi bunkových kultúr sa bunky po dosiahnutí určitej hustoty presúvajú do nového média, aby sa udržal ich rast a zabránilo sa ich nadmernej fluencii. Každý takýto prenos sa zaznamenáva ako pasáž.
- Tradične, keď sme dostali bunkovú líniu, napríklad pri pasáži 60 od depozitára, pokračovali sme od tohto čísla pasáže a zvyšovali ho pri každej subkultúre. Táto prax, pri zachovaní historickej súvislosti, často viedla k vysokým číslam pasáží od začiatku. Vzhľadom na rozsiahle a často desaťročia trvajúce používanie niektorých bunkových línií, ako je napríklad línia HeLa založená v roku 1951, nie je možné určiť celkový počet pasáží od vzniku bunkovej línie.
- V záujme zvýšenia prehľadnosti a kvality našich postupov pri kultivácii buniek sme začiatkom roka 2023 tento prístup prehodnotili. Teraz, keď iniciujeme kultúru z novej injekčnej liekovky, bez ohľadu na číslo pasáže od vkladateľa, pre každú vyrobenú dávku vynulujeme a začneme počítať nanovo od prvej pasáže
Odôvodnenie
Pasážovanie je dôležitý postup na zabezpečenie zdravia a užitočnosti bunkových kultúr pre výskum. Keď sa bunky premnožia, dochádza k ich kontaktnej inhibícii, čím sa zníži miera ich proliferácie, čo môže nepriaznivo ovplyvniť výsledky experimentov. Na zmiernenie týchto problémov spoločnosť Cytion vykonáva prísnu kontrolu hustoty buniek, pri ktorej dochádza k subkultivácii, čím udržiava nízky počet pasáží počas výroby svojich bunkových línií. Toto opatrenie pomáha predchádzať nepriaznivým účinkom nadmerného pasážovania, ako sú morfologické anomálie, zmeny rýchlosti rastu a genetický drift, ktoré môžu spôsobiť, že bunky sa budú výrazne líšiť od svojho pôvodného stavu. Predĺžené obdobia subkultivácie môžu tiež zvýšiť riziko mikrobiálnej kontaminácie.
Náš prísľub
Zabezpečujeme, aby sa bunky dodávané výskumníkom čo najviac približovali pôvodnému genetickému zloženiu a fenotypovým vlastnostiam, čím sa zvyšuje spoľahlivosť experimentálnych údajov. Okrem toho spoločnosť Cytion starostlivo dokumentuje každú pasáž, čím prispieva k vysledovateľnosti a reprodukovateľnosti výskumu, čo je záväzok, ktorý odráža vysoké štandardy praxe v oblasti bunkových kultúr. Výskumníkom sa odporúča, aby viedli presné záznamy o číslach pasáží na kultivačných nádobách aj vo svojich laboratórnych zápisníkoch ako referenciu o zdraví a histórii svojich bunkových kultúr.