Bunková línia KG-1
BunkyKG-1 predstavujú ľudskú leukemickú bunkovú líniu, ktorá sa široko používa v biomedicínskom výskume. Ponúkajú rôzne aplikácie v imunológii, rakovine a toxikologickom výskume. Výskumníci využívajú tieto bunky na štúdium mechanizmov ochorení a testovanie potenciálnych terapií. Tento článok poskytne komplexné informácie o bunkovej línii KG-1, ktoré vám môžu pomôcť pri vašej práci. Predovšetkým sa v ňom bude diskutovať o:
- Všeobecná charakteristika a pôvod bunkovej línie KG-1
- Informácie o kultivácii bunkovej línie KG-1
- Bunková línia KG-1: Výhody a obmedzenia
- Aplikácie buniek KG-1 vo výskume
- Publikácie o bunkách KG-1
- Zdroje pre bunkovú líniu KG-1: Protokoly, videá a ďalšie informácie
1. Všeobecná charakteristika a pôvod bunkovej línie KG-1
Pôvod bunkovej línie a jej všeobecné charakteristiky pomáhajú výskumnému pracovníkovi pri rozhodovaní o jej použití v jeho práci. Tieto informácie môžete preskúmať skôr, ako s ňou začnete pracovať. Táto časť článku je venovaná pôvodu a charakteristike makrofágov KG-1. Dozviete sa tu: Čo sú bunky KG-1? Čo je to bunková línia KG-1a? Aký je pôvod bunkovej línie KG-1? Aká je morfológia KG-1?
- KG-1 je bunková línia podobná lymfoblastom získaná z aspirátu kostnej drene muža kaukazskej rasy (59 rokov) s akútnou myelogénnou leukémiou. Vytvorili ju Koeffler a Golde v roku 1978. Tieto bunky sú prevažne v štádiu dozrievania promyelocytov alebo myeloblastov [1].
- KG-1 bunky majú morfológiu podobnú lymfoblastom.
- Karyotyp bunkovej línie KG-1 vykazuje pseudodiploidný modálny počet chromozómov.
KG-1 a KG-1a
KG-1a je sublínia rodičovských buniek KG-1. Vznikla po 35 pasážach bunkovej línie KG1. V porovnaní s bunkovou líniou KG-1 je menej diferencovaná. Okrem toho je táto sublínia cytochemicky, morfologicky a funkčne menej zrelá v porovnaní s materskou bunkovou líniou (KG-1).
2. Informácie o kultivácii bunkovej línie KG-1
Táto časť článku obsahuje všetky nevyhnutné informácie o kultivácii bunkovej línie KG-1, ktoré vám môžu uľahčiť prácu. Dozviete sa tu: Aký je čas zdvojnásobenia bunkovej línie KG 1? Aké sú podmienky kultivácie makrofágov KG-1? Ako sa kultivujú bunky KG-1?
Kľúčové body kultivácie buniek KG-1
|
Čas zdvojenia: |
Čas zdvojenia KG-1 je približne 45 hodín. Môže sa však líšiť v závislosti od podmienok kultivácie. |
|
Adherentné alebo v suspenzii: |
Bunky KG-1 rastú v suspenzii. |
|
Hustota buniek: |
Optimálna hustota buniek pre bunkovú líniu KG1 je 1 až 3 x105 buniek/ml. Na subkultiváciu sa suspenzia buniek prenesie do sterilnej skúmavky a odstredí sa. Zozbierané bunky sa potom doplnia čerstvým médiom a opatrne resuspendujú. Potom sa bunky dávkujú do nových fliaš a kultivujú sa pri optimálnej hustote buniek. Bunky sa môžu rozdeliť, keď dosiahnu maximálnu hustotu 1 - 2 x106 buniek/ml. |
|
Rastové médium: |
Na kultiváciu buniek KG-1 sa používa IMDM (Iscoveho modifikované Dulbeccovo médium) obsahujúce 10 % FBS, 4,5 g/l glukózy, 4 mM L-glutamínu, 1,0 mM pyruvátu sodného a 3,0 g/l NaHCO3. Médium by sa malo vymeniť po troch dňoch. |
|
Rastové podmienky: |
Bunková línia KG1 AML sa kultivuje vo zvlhčenom inkubátore pri teplote 37 °C a s prívodom 5 % CO2. |
|
Skladovanie: |
Zmrazené bunky sa uchovávajú v parnej fáze tekutého dusíka alebo pri teplote nižšej ako -150 °C v elektrickej mrazničke s veľmi nízkou teplotou, aby sa ochránila životaschopnosť buniek. |
|
Proces zmrazovania a médium: |
CM-1 alebo CM-ACF sú vhodné na zmrazovanie buniek KG-1. Bunky sa zmrazujú pomalým zmrazovacím procesom, aby boli chránené pred akýmkoľvek šokom. Táto metóda umožňuje postupný pokles teploty o 1 °C za minútu. |
|
Proces rozmrazovania: |
Bunky sa rozmrazujú vo vopred zohriatom vodnom kúpeli pri teplote 37 °C, kým nezostane malý ľadový chumáč. Rozmrazené bunky sa pridajú k čerstvému médiu a odstredia sa, aby sa odstránili zložky zmrazovacieho média. Pelet buniek sa opatrne resuspenduje a preleje do nových baniek obsahujúcich rastové médium. |
|
Úroveň biologickej bezpečnosti: |
Laboratórium s úrovňou biologickej bezpečnosti 1 je nevyhnutné na udržiavanie bunkových kultúr KG-1. |
3. KG-1 bunkovej línie: Výhody a obmedzenia
Podobne ako iné bunkové línie, aj bunková línia myeloidnej leukémie KG-1 má mnoho výhod a obmedzení. V tejto časti sa dozvieme o niektorých významných, ktoré môžu byť rozhodujúce pri rozhodovaní o jej použití vo vašom výskume.
Výhody
Hlavné výhody buniek KG-1 sú:
-
Jednoduchosť kultivácie
Bunky KG-1 sa ľahko kultivujú vo výskumných laboratóriách a majú nekomplikované požiadavky na kultiváciu buniek. Ich jednoduchá údržba a podmienky rastu umožňujú prístupnosť širokému spektru výskumníkov so základnými zariadeniami na kultiváciu buniek.
-
Model akútnej myeloidnej leukémie (AML)
Bunková línia KG-1 AML, odvodená od mužského pacienta s akútnou myeloidnou leukémiou (AML), slúži ako cenný nástroj na skúmanie biológie AML a vykonávanie výskumu potenciálnych terapeutík, ktorý ponúka pohľad na základné mechanizmy tohto ochorenia a stratégie liečby.
obmedzenia
Obmedzenia spojené s bunkovou líniou KG1 sú tieto:
-
Model in vitro
Bunky KG-1 sú cenným modelom in vitro pre výskum AML; je však dôležité poznamenať, že nemusia úplne kopírovať komplexnosť ochorenia in vivo, slúžia ako zjednodušený bunkový model, ktorý nemusí zahŕňať všetky aspekty biológie AML.
4. Použitie buniek KG-1 vo výskume
KG-1 ponúka niekoľko sľubných aplikácií v biomedicínskom výskume. Niektoré z dôležitých výskumných využití makrofágov KG1 zahŕňajú:
- Výskum rakoviny: KG-1 bunky boli získané od pacienta s akútnou myeloidnou leukémiou, a preto sa považujú za cenný výskumný nástroj na skúmanie biológie AML. Výskumníci využívajú tieto bunky na štúdium bunkových a molekulárnych mechanizmov, ktoré riadia vývoj AML, rast a rezistenciu na lieky. To zahŕňa aj identifikáciu a objavovanie nových biomarkerov, genetických mutácií a signálnych dráh spojených s AML. Napríklad v štúdii uskutočnenej v roku 2019 sa skúmalo, že dlhá nekódujúca RNA linc00239 uľahčuje rezistenciu na doxorubicín a malígne správanie v bunkách akútnej myeloidnej leukémie KG-1. Ďalšia štúdia odhalila, že lncRNA aktivuje signalizáciu PI3K/Akt/mTOR, aby sa tieto účinky prejavili v bunkách AML [2].
- Toxikológia: Bunková línia KG1 sa široko používa v toxikologickom výskume. Výskumníci testujú toxicitu a účinnosť potenciálnych terapeutických látok vrátane chemoterapeutík a cielených terapií na bunkách KG1 myeloidnej leukémie s cieľom identifikovať sľubných kandidátov na lieky pre budúce predklinické a klinické hodnotenia. Výskum uskutočnený v roku 2018 analyzoval toxicitu nanonozómov obsahujúcich doxorubicín na bunkovej línii KG1 AML. Štúdia navrhla, že nano-nizóm je vhodným nosičom na podávanie liečiva, pretože zvyšuje účinnosť liečby [3]. V ďalšom výskume vedci skúmali terapeutické účinky žihľavového čaju pripraveného z listov rastliny Urtica dioica. Štúdia odhalila, že tento vodný extrakt z listov rastliny má protinádorové účinky na bunky akútnej myeloidnej leukémie KG-1 a U937 [4].
5. Publikácie o bunkách KG-1
V tejto časti článku je uvedených niekoľko zaujímavých výskumných publikácií o bunkách KG-1.
Kvercetín senzibilizuje bunky ľudskej myeloidnej leukémie KG-1 proti apoptóze vyvolanej TRAIL
Tento článok bol uverejnený v časopise Journal of Cellular Physiology (2019). V štúdii sa navrhuje, že zlúčenina kvercetínu senzibilizuje bunkovú líniu KG1 AML proti ligandu indukujúcemu apoptózu súvisiacu s TNF (TRAIL) a môže zvýšiť účinok cytotoxicity vyvolanej TRAIL v bunkách.
KLF8 zvyšuje rast buniek akútnej myeloidnej leukémie a glykolýzu prostredníctvom dráhy AKT/mTOR
V tomto článku v časopise Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022) sa navrhuje, že downregulácia krüppel-like transkripčného faktora 8 potláča proliferáciu a glykolýzu AML buniek a podporuje apoptózu prostredníctvom regulácie signálnej dráhy AKT/mTOR.
Účinky sorafenibu a oxidu arzenitého na bunkové línie U937 a KG-1: Apoptóza alebo autofágia?
Táto štúdia v časopise Cell Journal (Yakhteh) (2020) skúmala potenciálne účinky oxidu arzenitého a sorafenibu na bunky U937 a KG-1.
Táto štúdia uverejnená v časopise Medical Oncology (2020) hodnotila OXPHOS a glykolýzu ako terapeutické ciele v bunkovej línii AML KG-1.
V tejto publikácii o navrhovaní, vývoji a terapii liekov z roku 2020 sa navrhuje, aby zlúčeniny kurkumínu a talidomidu synergicky pôsobili apoptoticky na bunky KG-1 prostredníctvom zníženia expresie STAT3 a Bcl-xL.
6. Zdroje pre bunkovú líniu KG-1: Protokoly, videá a ďalšie informácie
Nižšie je uvedených niekoľko dostupných online zdrojov o bunkách KG-1.
- Subkultivácia suspenzných buniek: Toto video opisuje protokol subkultivácie suspenzných bunkových kultúr, ako je KG-1.
Nasledujúci odkaz obsahuje protokol bunkovej kultúry KG-1:
- KG-1: Táto webová stránka obsahuje základné informácie o bunkovej línii KG-1. Obsahuje informácie o médiách bunkovej línie a protokoly na subkultiváciu a manipuláciu s kryokonzervovanými a proliferačnými kultúrami.
Odkazy
- Pelliccia, F., V. Ubertini a N. Bosco, Význam molekulárnej cytogenetickej analýzy pred použitím bunkových línií vo výskume: Prípad bunkovej línie leukémie KG-1a. Oncol Lett, 2012. 4(2): p. 237-240.
- Yang, Y., et al. dlhánekódujúcaRNA linc00239 podporuje malígne správanie a chemorezistenciu voči doxorubicínu čiastočne prostredníctvom aktivácie dráhy PI3K/Akt/mTOR v bunkách akútnej myeloidnej leukémie. Oncology Reports, 2019. 41(4): p. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F., et al. príprava a štúdium nano-niosómov obsahujúcich doxorubicín a hodnotenie ich toxicity na bunkovej línii akútnej myeloblastovej leukémie KG-1. Payavard Salamat, 2018. 12(4): p. 309-323.
- Hodroj, M.H., et al. žihľavový čaj inhibuje rast buniek akútnej myeloidnej leukémie in vitro podporou apoptózy. Nutrients, 2020. 12(9): p. 2629.