Bunky DU-145 - komplexný sprievodca výskumníka

DU-145 je bunková línia ľudského karcinómu prostaty, ktorá sa široko uplatňuje v biomedicínskom výskume. Tieto bunky slúžia ako neoceniteľný model na štúdium biológie rakoviny prostaty, testovanie liekov a vývoj. Okrem toho výskumníci využívajú bunky DU-145 aj na skúmanie molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom vývoja, rastu a progresie rakoviny prostaty.

Tento článok vám poskytne cenné informácie o bunkách rakoviny prostaty DU-145. Konkrétne sa bude zaoberať:

Všeobecné informácie a pôvod bunkovej línie DU-145
Kultivácia buniek DU-145
Bunkovú líniu DU-145: Výhody a obmedzenia
Výskumné aplikácie buniek DU-145
Výskumné publikácie s bunkami DU-145
Zdroje pre bunkovú líniu DU-145: Protokoly, videá a ďalšie zdroje

1. Všeobecné informácie a pôvod bunkovej línie DU-145

Pred začatím práce s bunkovou líniou je nevyhnutné pochopiť jej základné vlastnosti a pôvod. Táto časť poskytne komplexné informácie o vlastnostiach a pôvode bunkovej línie DU-145. Dozviete sa: Čo sú rakovinové bunky DU145? Aká je morfológia buniek DU145? Aký je rozdiel medzi PC-3 a DU145?

DU-145, ľudská bunková línia rakoviny prostaty, bola odvodená z mozgu muža kaukazskej rasy (69 rokov) s metastázujúcim karcinómom prostaty. Tieto bunky boli prvýkrát uložené K. R. Stoneom a jeho kolegami v roku 1978.
Podobne ako bunky rakoviny prostaty PC-3, aj DU-145 exprimuje androgénne receptory. Keď sa však tieto bunky podrobia liečbe androgénnym ligandom, nevykazujú žiadnu aktivitu génov reagujúcich na androgénne receptory, preto sa považujú za bunky nezávislé od androgénov.
Bunky DU-145 majú epitelovú morfológiu.
Bunky DU-145 sú hypotriploidné a majú modálny počet chromozómov 64. Vykazujú niekoľko markerových chromozómov, napríklad del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) a del (9) (p11).

PC-3 vs DU145

Obe bunkové línie karcinómu prostaty sú nezávislé od androgénnych receptorov. Líšia sa z hľadiska svojho tumorigénneho a metastatického potenciálu. Pri injekčnom podaní do imunokompromitovanej myši tvorí bunková línia PC-3 vysoko metastatický adenokarcinóm IV. stupňa. Naproti tomu u bunkovej línie DU-145 vzniká karcinóm prostaty s miernym metastatickým potenciálom [1].

Narušenie mikrofilamentov v ľudských bunkách rakoviny prostaty PC-3.

2. kultivácia buniek DU-145

Bunková línia DU-145 sa široko používa v laboratóriách na výskum rakoviny prostaty. Mali by ste si osvojiť nasledujúce kľúčové body, ktoré uľahčia jej jednoduchú a efektívnu kultiváciu. Táto časť bude obsahovať informácie o médiu DU145, zdvojovacom čase, podmienkach kultivácie buniek a protokoloch.

Kľúčové body pre kultiváciu buniek DU-145

Čas zdvojnásobenia populácie:	Čas zdvojenia DU-145 sa pohybuje v rozmedzí 30 až 40 hodín.
Adherentné alebo v suspenzii:	DU-145 je adherentná bunková línia.
Hustota výsevu:	Bunky DU-145 sa vysievajú pri odporúčanej hustote 2 x¹⁰⁴^buniek/cm2. Pri tejto hustote bunky vytvoria splývajúcu monovrstvu takmer za 4 dni. Pri výseve sa bunky premyjú 1 x fyziologickým roztokom fosfátového pufra a inkubujú sa s pasážovacím roztokom, Accutase. Po 8 až 10 minútach inkubácie pri izbovej teplote sa bunky doplnia čerstvým kultivačným médiom a odstredia sa. Odobratý bunkový pelet sa opatrne resuspenduje a bunky sa prelejú do nových kultivačných fliaš na rast.
Rastové médium:	EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) s doplnkami média, t. j. 10 % fetálneho hovädzieho séra (FBS), 2 mM L-Glutamín, 2,2 g/l NaHCO3 a EBSS. Médium sa obnovuje 2 až 3-krát týždenne.
Rastové podmienky:	DU-145 sa uchováva vo zvlhčenom inkubátore pri 37 °C so zdrojom 5 % CO2.
Skladovanie:	Bunky DU-145 sa skladujú v parnej fáze tekutého dusíka alebo pri teplote nižšej ako -150 °C v elektrickej mrazničke, aby sa zachovala dlhodobá životaschopnosť buniek.
Proces zmrazovania a médium:	Pre bunky karcinómu prostaty DU-145 sa odporúča použiť zmrazovacie médium CM-1 alebo CM-ACF. Na zmrazenie buniek sa volí metóda pomalého zmrazovania, ktorá umožňuje postupný pokles teploty o 1 °C. Tým sa zabráni akémukoľvek šoku buniek a pomôže sa zachovať ich životaschopnosť.
Proces rozmrazovania:	Zmrazené fľaštičky s bunkami DU-145 sa rýchlo rozmrazujú vo vodnom kúpeli pri teplote 37 °C počas 40 až 60 sekúnd. Potom sa bunky doplnia kultivačným médiom a odstredia sa, aby sa odstránili zložky zmrazovacieho média. Zozbierané bunky sa resuspendujú v rastovom médiu a nalejú sa do banky na rast. Obnova zmrazením trvá takmer 24 hodín.
Úroveň biologickej bezpečnosti:	Na kultiváciu bunkovej línie DU145 nezávislej od androgénnych receptorov sa vyžaduje nastavenie úrovne biologickej bezpečnosti 1.

Bunky rakoviny prostaty DU-145 pri 10-násobnom a 20-násobnom zväčšení.

3. bunkovú líniu DU-145: Výhody a obmedzenia

Podobne ako iné bunkové línie, aj bunková línia rakoviny prostaty DU-145 má určité výhody a nevýhody. Tieto vlastnosti vám môžu pomôcť pri rozhodovaní o jej použití vo vašom výskume. Hlavné výhody a nevýhody buniek DU-145 sú uvedené nižšie.

Výhody

Výhody buniek DU-145 sú:

Nádorová aktivita	DU-145 je agresívna tumorigénna bunková línia rakoviny prostaty so stredným metastatickým potenciálom. Používa sa na vývoj xenotransplantačného modelu DU145 v imunokompromitovaných myšiach na štúdium biológie, vývoja a rastu rakoviny prostaty in vitro a in vivo.
Nezávislosť na androgénovom receptore	Bunky rakoviny prostaty DU-145 sú nezávislé od androgénnych receptorov. Ich rast nie je závislý od androgénov a pri liečbe androgénmi nevykazujú žiadnu odpoveď na bunkovej a molekulárnej úrovni. Ideálne na výskum mechanizmov rakoviny prostaty nezávislých od hormónov.

Obmedzenia

Obmedzenia bunkovej línie DU-145 sú tieto:

In Vitro model

DU-145 je in vitro bunkový model metastatického karcinómu prostaty, takže nemusí plne reprezentovať komplexnosť primárnych nádorov prostaty. Okrem toho nemusí implikovať všetky typy a podtypy karcinómu prostaty kvôli špecifickým vlastnostiam, ako je nezávislosť od androgénnych receptorov.

4. výskumné aplikácie buniek DU-145

Bunková línia rakoviny prostaty DU-145 má široké spektrum výskumných aplikácií. Tu je uvedených niekoľko sľubných aplikácií.

Biológia rakoviny prostaty: DU-145 je vhodným modelom na štúdium biológie rakoviny prostaty. Výskumníci využívajú tieto bunky na skúmanie molekulárnych mechanizmov riadiacich vývoj rakoviny, jej progresiu a metastázovanie. Okrem toho sa skúmajú aj genetické zmeny bežne spojené s rakovinou prostaty. Výskum uskutočnený v roku 2021 skúmal bunky DU-145 s cieľom identifikovať potenciálne biomarkery pre účinné diagnostické a terapeutické dôsledky. Štúdia navrhla aktín gama 1 (ACTG1) ako potenciálny biomarker rakoviny prostaty, pretože podporuje proliferáciu rakovinových buniek a reguluje metastázovanie prostredníctvom aktivácie dráhy MAPK/ERK [2].
Skríning a vývoj liekov: Bunky rakoviny prostaty DU-145 sa široko používajú na testovanie cytotoxicity a účinnosti potenciálnych protinádorových liekov. To pomáha výskumníkom identifikovať nové lieky, pochopiť rezistenciu voči liekom a základné molekulárne mechanizmy. Štúdia uskutočnená v roku 2022 skúmala cytotoxický účinok živicovej zmesi, propolisu alebo včelieho lepu, v bunkovej línii rakoviny prostaty PC-3 a DU-145. Štúdia preukázala inhibičné účinky tejto prírodnej látky na rast v oboch bunkových líniách a navrhla jej protinádorový potenciál [3]. V roku 2019 sa uskutočnila ďalšia štúdia, ktorá skúmala antiproliferačné účinky prírodnej zlúčeniny betaínu v bunkách rakoviny prostaty DU-145. Výskum ukázal, že betaín vyvíja antiproliferačné aktivity prostredníctvom zvýšenia bunkovej smrti sprostredkovanej oxidačným stresom a zápalom v bunkách DU-145 [4].

430,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní plus náklady na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 300168

5.výskumné publikácie s bunkami DU-145

Nasledujú niektoré výskumné publikácie o bunkovej línii DU-145.

Koncentračne závislé účinky síranu zinočnatého na bunkovú líniu ľudského karcinómu prostaty DU-145: oxidačné, apoptotické, zápalové a morfologické analýzy

Táto štúdia v časopise Biological Trace Element Research, 2020, navrhla, že síran zinočnatý (_ZnSo4) má antiproliferačné účinky na bunky DU-145 prostredníctvom indukcie apoptózy, morfologických zmien, oxidačného poškodenia a zápalu.

Selektívna cytotoxická a antimetastatická aktivita v bunkách rakoviny prostaty DU-145 vyvolaná extraktom z kôry Annona muricata L. a fytochemikáliou, annonacínom

Tento výskumný článok bol uverejnený v časopise BMC Complementary Medicine and Therapies v roku 2020. V tejto štúdii sa skúmal cytotoxický a antimetastatický potenciál rastliny, extraktu z kôry Annona muricata L., a jej bioaktívnej látky annonacínu v bunkovej línii DU-145.

LncRNA LOXL1-AS1/miR-let-7a-5p/EGFR-relatedpathway reguluje rezistenciu buniek karcinómu prostaty DU-145 na doxorubicín

V tejto publikácii v časopise IUBMB Life (2019) sa navrhuje, že interakcia dlhej nekódujúcej RNA LOXL1-AS1 s miR-let-7a-5p a dráhou súvisiacou s EGFR reguluje rezistenciu na doxorubicín v bunkách rakoviny prostaty DU-145.

Znížená regulácia DDR1 indukuje apoptózu a inhibuje EMT prostredníctvom fosforylácie Pyk2/MKK7 v bunkových líniách rakoviny prostaty DU-145 a Lncap-FGC

V tomto článku v časopise Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) sa uvádza, že downregulácia génu Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) spôsobuje smrť buniek DU-145 a inhibuje prechod z epitelu na mezenchým (EMT) prostredníctvom aktivácie dráhy Pyk2/MKK7.

Kasticín inhibuje migráciu a inváziu buniek ľudského karcinómu prostaty DU 145 prostredníctvom signálnych dráh Ras/Akt/NF-κB

Táto štúdia v časopise Journal of Food Biochemistry (2019) navrhla, že kasticín, polymetoxyflavón, inhibuje migráciu a inváziu buniek DU-145 reguláciou signalizácie Ras/Akt/NF-κB.

6. zdroje pre bunkovú líniu DU-145: Riešenia: protokoly, videá a ďalšie zdroje

K dispozícii je mnoho online zdrojov o bunkovej línii rakoviny prostaty DU-145. V tejto časti bude uvedených niekoľko zdrojov, ktoré vysvetľujú manipuláciu, údržbu a protokol transfekcie týchto buniek:

DU-145 transfekcia: Tento videonávod je postupným sprievodcom pri osvojovaní si protokolu transfekcie buniek DU-145.

Je tu uvedený protokol kultivácie buniek DU-145.

Subkultivácia DU-145: Tento odkaz vám pomôže naučiť sa protokol na subkultiváciu alebo subkultiváciu buniek DU-145.
Bunky DU-145: Táto webová stránka obsahuje množstvo užitočných informácií o bunkovej línii DU-145 vrátane média DU145, protokolu pre subkultiváciu a manipulácie s proliferačnými a kryokonzervovanými kultúrami.

Odkazy

Lima, A.R., a i., Rozlišovanie medzi exometabolómom normálnych a rakovinových buniek ľudskej prostaty pomocou GC-MS. Vedecké správy, 2018. 8(1): p. 5539.
Xiao, L., et al., Silencing ACTG1 expression induces prostate cancer epithelial mesenchymal transition through MAPK/ERK signaling pathway. DNA and Cell Biology, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
Gogacz, M., et al., Anticancer effects of propolis extracts obtained with the cold separation method on PC-3 and DU-145 prostate cancer cell lines (Protinádorové účinky propolisových extraktov získaných metódou studenej separácie na bunkové línie rakoviny prostaty PC-3 a DU-145 ). Molekuly, 2022. 27(23): p. 8245.
Kar, F., et al., Betaín potláča proliferáciu buniek zvýšením apoptózy sprostredkovanej oxidačným stresom a zápalom v bunkovej línii ľudského karcinómu prostaty DU-145. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: p. 871-881.