Bunky B16 - základný sprievodca bunkami melanómu B16 v onkologickom výskume

B16 je línia buniek rakoviny kože (melanómu) myšieho pôvodu. Táto bunková línia je účinným in vitro modelom na štúdium ľudských rakovín kože. Často sa používa na skúmanie tvorby solídnych nádorov a metastáz rakovinových buniek.

Tento článok vám pomôže pochopiť základy melanómovej bunkovej línie B16. Konkrétne sa bude zaoberať nasledujúcimi bodmi:

1.všeobecná charakteristika a pôvod bunkovej línie B16

Táto časť článku sa bude zaoberať charakteristickými znakmi melanómovej bunkovej línie B16. Dozviete sa odpovede na nasledujúce často kladené otázky. Napríklad: Čo je to bunková línia B16 pre rakovinu? Odkiaľ pochádzajú bunky B16? Aká je veľkosť buniek B16?

Bunková línia B16 bola vytvorená v roku 1954. Tieto bunky boli získané z myší C57BL/6J, ktorým sa v Jacksonových laboratóriách v Maine spontánne vytvoril nádor na koži.
Ide o epitelové bunky produkujúce melanín, ktoré majú schopnosť metastázovať v slezine, pečeni a pľúcach.
Bunky melanómu B16 rastú ako monovrstvy a vykazujú epitelovú a vretenovitú morfológiu buniek.
Veľkosť bunkovej línie B16 je približne 15,4 μm.
Existujú odlišné subklony buniek B16 vrátane B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 a B16F10. Tieto sublínie sa líšia od materských buniek B16 a zachovávajú si niektoré špecifické vlastnosti. Napríklad sa líšia morfológiou, veľkosťou buniek a ďalšími vlastnosťami. B16F10 má vysokú schopnosť metastázovať do pľúc a B164A5 je najagresívnejšou bunkovou líniou rakoviny kože v porovnaní s B16F10, B16-GMCSF a B16FLT3 [1].

3D animácia detailného záberu rastúcej rakoviny kože, napríklad malígneho melanómu, ktorá zapáli okolité tkanivo.

2.informácie o kultivácii bunkovej línie B16

Pred udržiavaním alebo kultiváciou bunkovej línie si môžete vyhľadať kľúčové informácie o čase zdvojnásobenia, type buniek, rastových médiách, podmienkach kultivácie atď. Táto časť obsahuje všetky potrebné informácie o kultivácii buniek B16.

Kľúčové body pre kultiváciu buniek B16

Čas zdvojnásobenia populácie:	Priemerný čas zdvojenia populácie buniek B16 sa odhaduje na 24 hodín.
Adherentné alebo v suspenzii:	Bunky B16 sú priľnavé a rastú v monovrstvách.
Hustota výsevu:	Bunky B16 sa odporúča vysievať pri hustote 1 až 2 x¹⁰⁴ ^buniek/cm2. Prichytené bunky B16 sa opláchnu 1 x PBS a disociujú sa z povrchu pomocou roztoku Accutase. Bunky sa odstredia a bunkový pelet sa resuspenduje v rastovom médiu. Neskôr sa tieto bunky dávkujú do novej banky na rast.
Rastové médium:	Bunky B16 sa kultivujú v médiu EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) obsahujúcom 10 % fetálneho hovädzieho séra (FBS). Rastové médium by sa malo obnovovať 2 - 3-krát týždenne.
Rastové podmienky:	Na pestovanie bunkovej línie B16 sa používa zvlhčený inkubátor s prívodom 5 %_CO2 a teplotou 37 °C.
Skladovanie:	Tieto bunky sa skladujú pri teplote nižšej ako -150 °C alebo v parnej fáze tekutého dusíka, aby sa chránila životaschopnosť buniek.
Proces zmrazovania a médium:	Na zmrazenie buniek B16 sa používa zmrazovacie médium CM-1 alebo CM-ACF s použitím pomalého zmrazovacieho procesu.
Proces rozmrazovania:	Zmrazené bunky B16 sa rozmrazujú pri 37 °C vo vodnom kúpeli obsahujúcom antimikrobiálne činidlo. Rozmrazené bunky sa môžu priamo kultivovať dávkovaním do baniek obsahujúcich rastové médium. Okrem toho sa tieto bunky môžu odstrediť, aby sa odstránili zložky zmrazovacieho média, a potom kultivovať v novom médiu.
Úroveň biologickej bezpečnosti:	Bunková línia B16 by sa mala spracovávať alebo udržiavať v laboratóriu s úrovňou biologickej bezpečnosti 1.

Polokonfluentná vrstva buniek melanómu B16 pri zväčšení 10x a 20x.

3. bunkovej línie B16: Výhody a nevýhody

Podobne ako iné bunkové línie, aj B16 má jedinečnú zmes výhod a nevýhod. Niektoré významné výhody a nevýhody tejto melanómovej bunkovej línie sú uvedené v tejto časti.

Výhody

B16 je prvým účinným myším nástrojom široko používaným vo výskume metastáz vďaka výhodám, ktoré ponúka. Niektoré výhody tejto bunkovej línie rakoviny kože sú:

Jednoduché pestovanie	Bunková línia B16 sa ľahko kultivuje vo výskumných laboratóriách. Široko sa využíva na štúdium biológie rakovinových buniek, signálnych dráh a ďalších.
Rýchly rast	Bunková línia melanómu B16 vykazuje vysokú mieru proliferácie, vďaka čomu je vhodná na štúdium bunkového delenia a rastových procesov.
Nádorová aktivita	B16 je tumorigénna bunková línia s nádorovými vlastnosťami, ako je invázia, migrácia a proliferácia. Je cenná na štúdium tvorby, progresie a metastázovania nádorov.

Nevýhody

Nevýhody spojené s bunkovou líniou B16 sú:

Nedostatočná relevantnosť pre človeka	Vzhľadom na to, že B16 je bunkovou líniou myšieho melanómu, nemusí presne reprezentovať biológiu ľudského karcinómu kože, čo obmedzuje prenositeľnosť výsledkov výskumu.
Heterogenita	Bunky B16 sú heterogénne a vykazujú rôzne genetické a fenotypové vlastnosti v rámci tej istej kultúry. To môže ovplyvniť spoľahlivosť a reprodukovateľnosť výsledkov.

4. použitie buniek B16

Bunková línia B16 sa vo veľkej miere používa vo výskumných štúdiách. Niekoľko sľubných aplikácií tejto bunkovej línie je:

Biológia nádorov: Táto bunková línia rakoviny kože myší je tumorogénna a široko sa používa na pochopenie nádorovej biológie. Vykonalo sa niekoľko štúdií na preskúmanie bunkových mechanizmov, ktoré stoja za rastom, proliferáciou a metastázovaním nádorových buniek s použitím buniek B16. Vo výskumnej štúdii uskutočnenej v roku 2020 sa využili bunky B16 na skúmanie úlohy dlhej nekódujúcej RNA, LncRNA MEG3, pri vzniku, raste a metastázovaní melanómu. Tento výskum zistil, že nekódujúca RNA moduluje os miRNA-21/E-Cadherin, čím stimuluje tieto bunkové udalosti [2]. Podobne sa uskutočnil výskum zameraný na skúmanie potenciálnej úlohy signalizácie Notch1 v imunosupresii vyvolanej nádorom s použitím buniek B16 [3].
Objavovanie liečiv: Bunky B16 sa používajú na overovanie a testovanie potenciálnych terapeutických účinkov kandidátskych liekov. V štúdii sa hodnotil protinádorový účinok kyseliny neogambogovej, prírodnej zlúčeniny, s použitím bunkovej línie B16. Výsledky štúdie odhalili, že táto zlúčenina moduluje signálnu dráhu PI3K/Akt/mTOR a spôsobuje smrť rakovinových buniek [4]. V ďalšej štúdii sa skúmal antimelanómový účinok ginsenosidu Rg3, saponínu, s použitím bunkovej línie B16. Výskum navrhol, že táto prírodná zlúčenina spôsobuje protinádorovú aktivitu znížením regulácie dráh ERK a Akt [5].

430,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní plus náklady na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 305154

5.výskumné publikácie s bunkami B16

Tu sú niektoré významné výskumné publikácie, v ktorých sa objavuje melanómová bunková línia B16.

LncRNA MEG3 podporuje rast, metastázovanie a tvorbu melanómu prostredníctvom modulácie osi miR-21/E-kadherín

V tejto publikácii v časopise Cancer Cell International (2020) sa navrhuje, že dlhá nekódujúca RNA MEG3 zvyšuje tvorbu, rast a metastázovanie melanómových buniek B16 moduláciou osi miRNA-21/E-Cadherin.

Nový derivát psoralénu - MPFC zvyšuje melanogenézu prostredníctvom aktivácie signálnych dráh p38 MAPK a PKA v bunkách B16

Tento článok bol uverejnený v časopise International Journal of Molecular Medicine v roku 2018. V tejto štúdii sa skúmal melanogénny účinok a mechanizmy psoralénového derivátu - 4-metyl-6-fenyl-2H-furo[3,2g] chromen-2-ónu (MPFC) v bunkách B16. V štúdii sa navrhlo, že tento derivát podporuje melanogenézu stimuláciou bunkovej signalizácie PKA a p38 MAPK.

Signalizácia Notch1 v melanómových bunkách podporuje imunosupresiu vyvolanú nádorom prostredníctvom upregulácie TGF-β1

Tento výskum bol uverejnený v roku 2018 v časopise Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Výsledky štúdie naznačujú, že aktivácia signalizácie Notch1 v bunkách B16 môže brániť protinádorovej imunite zvýšením expresie génu TGF-β1.

Kyselina neogambogová indukuje apoptózu melanómových buniek B16 prostredníctvom signálnej dráhy PI3K/Akt/mTOR

Túto štúdiu uskutočnil Chunlan Wu so svojimi kolegami v roku 2020 a uverejnil ju v časopise Acta Biochimica Polonica. V tomto výskume sa uvádza, že kyselina neogambogová, prírodná zlúčenina, môže spôsobiť smrť melanómových buniek B16 moduláciou signalizačnej kaskády PI3K/Akt/mTOR.

Komplex irídia (III) ako silná protinádorová látka indukuje apoptózu a autofágiu v bunkách B16 prostredníctvom inhibície dráhy AKT/mTOR

Tento výskumný článok bol uverejnený v časopise European Journal of Medicinal Chemistry v roku 2018. V tejto štúdii vedci skúmali protirakovinovú aktivitu zlúčeniny, komplexu irídia (III), s použitím buniek melanómu B16.

Ailantón indukuje zastavenie bunkového cyklu a apoptózu v bunkách melanómu B16 a A375

V tejto štúdii sa navrhlo, že rastlinná bioaktívna látka, ailantón, má protinádorový potenciál, pretože môže indukovať apoptózu a zastavenie bunkového cyklu v bunkách melanómu B16 a A375. Tento článok bol uverejnený v časopise Biomolecules v roku 2019.

6. zdroje pre bunkovú líniu B16: Riešenia: protokoly, videá a ďalšie materiály

K dispozícii sú obmedzené zdroje o bunkovej línii B16, ktoré vysvetľujú jej kultivačné a transfekčné protokoly.

Kultivácia melanómových buniek: Toto video poskytuje cenné tipy na kultiváciu melanómových bunkových línií.
Subkultivácia bunkovej línie: Toto video vysvetľuje všeobecný protokol subkultivácie bunkovej línie.
Transfekcia bunkovej línie B16F10: Toto video vysvetľuje protokol transfekcie sublínie melanómových buniek B16. Môže vám pomôcť optimalizovať transfekčný protokol pre bunky B16.

Nasledujú niektoré protokoly bunkových kultúr pre bunky B16.

Kultivácia buniek B16: Táto webová stránka obsahuje všetky potrebné informácie o kultivácii buniek B16 vrátane rastových médií, subkultivácie, rozmrazovania a zmrazovania buniek.

Odkazy

Danciu, C., et al., Behaviour of four different B 16 murine melanoma cell sublines (Správanie štyroch rôznych podlínií buniek myšieho melanómu B 16): C57 BL/6J. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3 podporuje rast, tvorbu metastáz a melanómu prostredníctvom modulácie osi miR-21/E-cadherin. Cancer cell international, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., et al., Notch1 signalizácia v melanómových bunkách podporuje imunosupresiu vyvolanú nádorom prostredníctvom upregulácie TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): p. 1-13.
Wu, C., et al., Neogambogic acid induces apoptosis of melanoma B16 cells via the PI3K/Akt/mTOR signaling pathway. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
Meng, L., et al. protinádorová aktivita ginsenosidu Rg3 v melanóme prostredníctvom downregulácie dráh ERK a Akt. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): p. 2069-2079.