Bunky B16 – Základný sprievodca melanómovými bunkami B16 v onkologickom výskume

B16 je bunková línia rakoviny kože (melanómu) myšieho pôvodu. Táto bunková línia je účinným in vitro modelom na štúdium rakoviny kože u ľudí. Často sa používa na skúmanie tvorby solídnych nádorov a metastázovania rakovinových buniek.

📋 Bunková línia B16 — rýchle fakty

Rastové médium: Bunky B16 sa kultivujú v médiu EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) obsahujúcom 10 % fetálneho bovinného séra (FBS). Rastové médium by sa malo obnovovať 2–3-krát týždenne.
Doba zdvojnásobenia: Priemerná doba zdvojnásobenia populácie buniek B16 sa odhaduje na 24 hodín.
Typ rastu: Bunky B16 sú adhezívne a rastú v monovrstvách.
Úroveň biologickej bezpečnosti: BSL-1
K dispozícii od: Cytion — Objednajte si B16

Tento článok vám pomôže pochopiť základy bunkovej línie melanómu B16. Konkrétne sa bude venovať nasledujúcim témam:

📋 Obsah

Všeobecné charakteristiky a pôvod buneckej línie B16
Informácie o kultivácii buniek línie B16
Bunka B16: Výhody a nevýhody
Aplikácie buniek B16
5. Vedecké publikácie o bunkách B16
Zdroje pre bunkovú líniu B16: protokoly, videá a ďalšie
Často kladené otázky

Všeobecné charakteristiky a pôvod buneckej línie B16

Táto časť článku sa venuje charakteristickým vlastnostiam buniek B16. Dozviete sa odpovede na nasledujúce často kladené otázky. Napríklad: Čo je to bunka B16? Odkiaľ pochádzajú bunky B16? Aká je veľkosť buniek B16?

Bunka B16 bola založená v roku 1954. Tieto bunky pochádzajú z myší C57BL/6J, u ktorých sa spontánne objavil nádor na koži v laboratóriách Jackson Laboratories v štáte Maine.
Ide o epitelové bunky produkujúce melanín, ktoré majú schopnosť metastázovať do sleziny, pečene a pľúc.
Bunky melanómu B16 rastú ako monovrstvy a vykazujú epitelovú a vretenovitú morfológiu buniek.
Veľkosť buniek línie B16 je približne 15,4 μm.
Existujú odlišné subklony buniek B16, vrátane B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 a B16F10. Tieto subklony sa líšia od rodičovských buniek B16 a zachovávajú si niektoré špecifické vlastnosti. Napríklad sa líšia morfológiou, veľkosťou buniek a ďalšími vlastnosťami. B16F10 má vysokú schopnosť metastázovať do pľúc a B164A5 je najagresívnejšia bunková línia rakoviny kože v porovnaní s B16F10, B16-GMCSF a B16FLT3 [1].

3D animácia detailného záberu na rozvíjajúcu sa rakovinu kože, napríklad malígny melanóm, ktorý spôsobuje zápal okolitého tkaniva.

Informácie o kultivácii buniek línie B16

Pred začatím kultivácie buniek je potrebné zistiť kľúčové informácie o dobe zdvojnásobenia, type buniek, kultivačných médiách, podmienkach kultivácie atď. Táto sekcia obsahuje všetky potrebné informácie pre kultiváciu buniek B16.

Kľúčové body pre kultiváciu buniek B16

Doba zdvojnásobenia populácie:: Priemerná doba zdvojnásobenia populácie buniek B16 sa odhaduje na 24 hodín.
Adherentné alebo v suspenzii:: Bunky B16 sú adhezívne a rastú v monovrstvách.
Hustota výsevu:: Odporúča sa naočkovať bunky B16 v hustote 1 až 2 x 10⁴ buniek/cm². Prilnuté bunky B16 sa prepláchnu 1 x PBS a oddelia sa od povrchu pomocou roztoku Accutase. Bunky sa odstreďujú a bunka sa resuspenduje v rastovom médiu. Neskôr sa tieto bunky nanesú do novej fľaše na rast.
Rastové médium:: Bunky B16 sa kultivujú v médiu EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) obsahujúcom 10 % fetálneho bovinného séra (FBS). Rastové médium by sa malo obnovovať 2–3-krát týždenne.
Podmienky rastu:: Na kultiváciu buniek B16 sa používa zvlhčený inkubátor s prívodom 5 % CO₂ a teplotou 37 °C.
Skladovanie:: Tieto bunky sa skladujú pri teplote nižšej ako -150 °C alebo v parnej fáze tekutého dusíka, aby sa zachovala životaschopnosť buniek.
Proces zmrazovania a médium:: Na zmrazenie buniek B16 sa používa zmrazovacie médium CM-1 alebo CM-ACF pomocou procesu pomalého zmrazovania.
Proces rozmrazovania:: Zmrazené bunky B16 sa rozmrazujú pri teplote 37 °C vo vodnom kúpeli obsahujúcom antimikrobiálne činidlo. Rozmrazené bunky je možné priamo kultivovať ich nanesením do fliaš obsahujúcich rastové médium. Okrem toho je možné tieto bunky odstrediť, aby sa odstránili zložky mraziaceho média, a následne ich kultivovať v novom médiu.
Úroveň biologickej bezpečnosti:: S bunkovou líniou B16 sa má manipulovať alebo udržiavať v laboratóriu s úrovňou biologickej bezpečnosti 1.

B16 cells

Polokonfluentná vrstva buniek melanómu B16 pri 10-násobnom a 20-násobnom zväčšení.

Buněčná línia B16: Výhody a nevýhody

Rovnako ako iné bunkové línie, aj B16 má svoje výhody aj nevýhody. V tejto časti sú uvedené niektoré významné klady a zápory tejto bunkovej línie melanómu.

Výhody

B16 je prvým účinným myším nástrojom, ktorý sa vďaka svojim výhodám široko používa vo výskume metastáz. Niektoré výhody tejto bunky rakoviny kože sú:

Ľahké kultivovanie: Bunková línia B16 sa ľahko kultivuje vo výskumných laboratóriách. Široko sa používa na štúdium biológie rakovinových buniek, signálnych dráh a ďalších oblastí.
Rýchly rast: Bunka melanómu B16 vykazuje vysokú rýchlosť proliferácie, vďaka čomu je vhodná na štúdium procesov delenia a rastu buniek.
Tumorigenicita: B16 je tumorigenická bunková línia s vlastnosťami podobnými nádoru, ako sú invázia, migrácia a proliferácia. Je cenná pre štúdium tvorby nádorov, ich progresie a metastázovania.

Nevýhody

Nevýhody spojené s bunkovou líniou B16 sú:

Nedostatočná relevantnosť pre človeka: Vzhľadom na to, že B16 je bunková línia myšieho melanómu, nemusí presne reprezentovať biológiu rakoviny kože u ľudí, čo obmedzuje prenositeľnosť výsledkov výskumu.
Heterogenita: Bunky B16 sú heterogénne a vykazujú rôznorodé genetické a fenotypové vlastnosti v rámci tej istej kultúry. To môže ovplyvniť spoľahlivosť a reprodukovateľnosť výsledkov.

Aplikácie buniek B16

Bunka B16 sa vo veľkej miere používa vo výskumných štúdiách. Niekoľko sľubných aplikácií tejto bunky sú:

Biológia nádorov: Táto myšia bunková línia rakoviny kože je tumorigenická a široko sa používa na pochopenie biológie nádorov. Bolo vykonaných niekoľko štúdií zameraných na preskúmanie bunkových mechanizmov rastu, proliferácie a metastázovania nádorových buniek s využitím buniek B16. Výskumná štúdia vykonaná v roku 2020 využila bunky B16 na preskúmanie úlohy dlhej nekódujúcej RNA, LncRNA MEG3, pri formovaní, raste a metastázovaní melanómu. Tento výskum zistil, že nekódujúca RNA moduluje os miRNA-21/E-Cadherin, čím stimuluje tieto bunkové procesy [2]. Podobne bol vykonaný výskum zameraný na skúmanie potenciálnej úlohy Notch1 signalizácie pri nádorom indukovanej imunosupresii s využitím buniek B16 [3].
Objav liekov: Bunky B16 sa používajú na overenie a testovanie potenciálnych terapeutických účinkov kandidátov na lieky. Jedna štúdia hodnotila protinádorový účinok kyseliny neogambogovej, prírodnej zlúčeniny, s použitím buneckej línie B16. Výsledky štúdie odhalili, že táto zlúčenina moduluje signálnu dráhu PI3K/Akt/mTOR, čím spôsobuje smrť rakovinových buniek [4]. Iná štúdia skúmala protinádorový účinok ginsenosidu Rg3, saponínu, s využitím buniek B16. Výskum naznačil, že táto prírodná zlúčenina vyvoláva protinádorovú aktivitu prostredníctvom downregulácie signálnych dráh ERK a Akt [5].

430,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní plus náklady na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 305154

5. Vedecké publikácie zaoberajúce sa bunkami B16

Tu je niekoľko významných vedeckých publikácií venovaných bunkovej línii melanómu B16.

LncRNA MEG3 podporuje rast, metastázovanie a tvorbu melanómu prostredníctvom modulácie osi miR-21/E-kadherín

Táto publikácia v časopise Cancer Cell International (2020) navrhuje, že dlhá nekódujúca RNA MEG3 zvyšuje tvorbu, rast a metastázovanie buniek melanómu B16 moduláciou osi miRNA-21/E-kadherín.

Nový derivát psoralénu – MPFC – podporuje melanogenézu prostredníctvom aktivácie signálnych dráh p38 MAPK a PKA v bunkách B16

Tento článok bol uverejnený v časopise International Journal of Molecular Medicine v roku 2018. Táto štúdia skúmala melanogénny účinok a mechanizmy derivátu psoralénu – 4-metyl-6-fenyl-2H-furo[3,2-g]chromen-2-ónu (MPFC) v bunkách B16. Štúdia navrhla, že tento derivát podporuje melanogenézu stimuláciou bunkovej signalizácie PKA a p38 MAPK.

Signalizácia Notch1 v melanómových bunkách podporovala nádorom indukovanú imunosupresiu prostredníctvom upregulácie TGF-β1

Tento výskum bol publikovaný v roku 2018 v časopise Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Zistenia štúdie naznačujú, že aktivácia signálnej dráhy Notch1 v bunkách B16 môže brániť protinádorovej imunite zvýšením expresie génu TGF-β1.

Kyselina neogambogová indukuje apoptózu buniek melanómu B16 prostredníctvom signálnej dráhy PI3K/Akt/mTOR

Túto štúdiu vykonal Chunlan Wu a jeho kolegovia v roku 2020 a bola uverejnená v časopise Acta Biochimica Polonica. Tento výskum uvádza, že kyselina neogambogová, prírodná zlúčenina, môže spôsobiť smrť buniek melanómu B16 moduláciou signálnej kaskády PI3K/Akt/mTOR.

Komplex irídia (III) ako silné protinádorové činidlo indukuje apoptózu a autofágiu v bunkách B16 prostredníctvom inhibície dráhy AKT/mTOR

Táto vedecká štúdia bola uverejnená v časopise European Journal of Medicinal Chemistry v roku 2018. V tejto štúdii vedci skúmali protinádorovú aktivitu zlúčeniny, komplexu irídia (III), s použitím buniek melanómu B16.

Ailanthón indukuje zastavenie bunkového cyklu a apoptózu v melanómových bunkách B16 a A375

Táto štúdia navrhla, že rastlinná bioaktívna látka, ailantón, má protinádorový potenciál, pretože môže indukovať apoptózu a zastavenie bunkového cyklu v melanómových bunkách B16 a A375. Tento článok bol uverejnený v časopise Biomolecules v roku 2019.

Zdroje pre bunkovú líniu B16: protokoly, videá a ďalšie

Existuje len obmedzené množstvo zdrojov o bunkovej línii B16, ktoré vysvetľujú protokoly jej kultivácie a transfekcie.

Kultivácia buniek melanómu: Toto video poskytuje cenné tipy na kultiváciu bunkových línií melanómu.
Subkultivácia buneckej línie: Toto video vysvetľuje všeobecný protokol subkultivácie buneckej línie.
Transfekcia buneckej línie B16F10: Toto video vysvetľuje protokol transfekcie pre subliniu buniek melanómu B16. Môže vám pomôcť optimalizovať protokol transfekcie pre bunky B16.

Nižšie sú uvedené niektoré protokoly kultivácie buniek pre bunky B16.

Kultivácia buniek B16: Táto webová stránka obsahuje všetky potrebné informácie o kultivácii buniek B16, vrátane rastových médií, subkultivácie, rozmrazovania a zmrazovania buniek.

Referencie

Danciu, C., et al., Správanie štyroch rôznych sublínií myších melanómových buniek B 16: koža C57 BL/6J. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2): s. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3 podporuje rast, metastázovanie a tvorbu melanómu prostredníctvom modulácie osi miR-21/E-kadherín. Cancer cell international, 2020. 20: s. 1-14.
Yang, Z., et al., Notch1 signalizácia v melanómových bunkách podporovala nádorom indukovanú imunosupresiu prostredníctvom upregulácie TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): s. 1-13.
Wu, C., et al., Kyselina neogambogová indukuje apoptózu buniek melanómu B16 prostredníctvom signálnej dráhy PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): s. 197–202.
Meng, L., et al., Protinádorová aktivita ginsenosidu Rg3 pri melanóme prostredníctvom downregulácie dráh ERK a Akt. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): s. 2069-2079.