Bunky U87MG - Výskum glioblastómu pomocou buniek U87MG a ich vplyv na štúdium rakoviny mozgu
U-87 MG, primárna ľudská glioblastómová bunková línia, sa široko používa v biologickom výskume. Tieto bunky sa využívajú najmä v oblasti neurovedy a imunoonkológie.
Všeobecná charakteristika a pôvod bunkovej línie U-87 MG
Táto časť sa zaoberá pôvodom a všeobecnými charakteristikami bunkovej línie U87. Dozviete sa, čo sú bunky U-87 MG? Odkiaľ pochádzajú bunky U87? Aká je úplná forma U-87 MG? Aké veľké sú bunky U87? Aká je morfológia bunkovej línie U87?
- Bunková línia U87 je bunkovou líniou glioblastómu, astrocytómu. Bola založená v roku 1966 na univerzite v Uppsale. Bunky boli získané od 44-ročného muža kaukazskej rasy, ktorý trpel glioblastómovým ochorením. Táto bunková línia sa formálne nazýva U 87 MG, čo je skratka pre Uppsala 87 Malignant Glioma (malígny glióm).
- Bunky U 87 MG majú morfológiu podobnú epitelovým bunkám.
- Veľkosť buniek U 87 MG sa pohybuje v rozmedzí 12 až 14 µm v priemere.
- Táto ľudská glioblastómová bunková línia je hypodiploidná a má modálne číslo chromozómov 44 v približne 48 % bunkovej populácie. V 5,9 % bunkovej populácie sa však vyskytujú aj vyššie ploidie.
Informácie o kultivácii buniek U-87 MG
Pred prácou s bunkami U 87 MG by ste sa mali oboznámiť s nasledujúcimi kľúčovými bodmi kultivácie týchto glioblastómových buniek. Najmä by ste mali vedieť: Aký je čas zdvojenia populácie buniek U 87 MG? Aké médium sa používa na kultiváciu buniek U 87? Aká je hustota výsevu bunkovej línie U 87 MG?
Kľúčové body pre kultiváciu buniek U 87 MG
|
Čas zdvojnásobenia populácie: |
U 87 MG bunky majú čas zdvojenia populácie v rozmedzí 18-38 hodín. |
|
Adherentné alebo v suspenzii: |
U 87 MG je adherentná bunková línia. Bunky majú podlhovastý tvar a rastú ako monovrstvy. |
|
Hustota výsevu: |
Bunková línia glioblastómu U 87 MG sa odporúča vysievať pri hustote buniek 1 x104 buniek/cm2. Adherované bunky U 87 sa premyjú pomocou 1 x PBS a inkubujú sa s roztokom Accutase. Potom sa disociované bunky odstredia a obnovia. Bunky sa opatrne resuspendujú a pridajú do nových fliaš obsahujúcich rastové médium. |
|
Rastové médium: |
U 87 MG sa kultivuje v EMEM (Eagle's minimal essential medium) rozšírenom o 1,0 g/l L-glukózy, 2,0 mM L-glutamínu, 2,2 g/l NaHCO3, 1 % NEAA, 1 mM pyruvátu sodného a 10 % roztoku FBS. Médium by sa malo obnovovať každé 2 až 3 dni. |
|
Rastové podmienky: |
Na optimálny rast buniek U-87 MG je potrebný zvlhčovaný inkubátor s prívodom 5 % CO2 a teplotou 37 °C. |
|
Skladovanie: |
Bunky U87 sa uchovávajú buď v parnej fáze tekutého dusíka, alebo pri teplote nižšej ako -150 °C, aby sa zachovala maximálna životaschopnosť glioblastómových buniek. |
|
Proces zmrazovania a médium: |
CM-1 alebo CM-ACF sú vhodné na zmrazenie buniek U 87 MG. Odporúča sa pomalý proces zmrazovania, pretože zabraňuje akémukoľvek šoku buniek a chráni ich životaschopnosť. |
|
Postup rozmrazovania: |
Zmrazené fľaštičky s bunkami U 87 MG sa rozmrazujú vo vodnom kúpeli pri 37 °C. Bunky sa pridajú s rastovým médiom, resuspendujú a dávkujú sa na kultiváciu do nových fliaš. Na rozdiel od tohto postupu sa bunky U87 môžu odstrediť, aby sa odstránilo zmrazovacie médium, a potom kultivovať. |
|
Úroveň biologickej bezpečnosti: |
Pri manipulácii s kultúrami buniek U 87 MG sa vyžaduje úroveň biologickej bezpečnosti 1. |
Výhody a nevýhody buniek U-87 MG
Keď myslíme na bunkovú líniu, prvá vec, ktorá nás napadne, je: Aké sú výhody použitia buniek U-87 MG? Aké sú nevýhody buniek U87?
Výhody
Bunkové línie U 87 MG sa široko používajú vo výskume. Niekoľko výhod spojených s touto bunkovou líniou je:
Výhody
- Jednoduché pestovanie: U 87 MG bunky sa ľahko udržiavajú v kultúre. Nevyžadujú náročné alebo komplikované požiadavky na kultiváciu buniek
- Homogenita: U 87 MG je homogénna bunková línia. Väčšina buniek v populácii má rovnakú genetickú výbavu, a teda podobné vlastnosti. Tieto bunky sa využívajú na štúdium bunkových procesov, skríning liekov a testovanie
- Dobre charakterizované: Táto bunková línia glioblastómu je dobre charakterizovaná rastovými charakteristikami, morfológiou a expresiou génov, čo z nej robí cenný výskumný nástroj
Nevýhody
- Obmedzená použiteľnosť: U 87 MG je glioblastómová bunková línia, takže jej použitie je obmedzené predovšetkým na štúdium glioblastómov a základných molekulárnych mechanizmov. Nemusí byť vhodná na skúmanie iných typov rakoviny.
Výskumné aplikácie s bunkami U 87 MG
Bunková línia glioblastómu U87MG sa vo veľkej miere využíva v štúdiách rakoviny, najmä vo výskume glioblastómu. Niektoré z výskumných aplikácií buniek U 87 MG sú:
- Výskum rakovinovej biológie: Bunková línia U87 sa používa na štúdium rastu a vývoja rakoviny, základných molekulárnych mechanizmov, signálnych dráh a nádorového mikroprostredia. V štúdii uverejnenej v roku 2020 sa použil model glioblastómu in vitro, bunková línia U 87 MG, na skúmanie génu BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) ako terapeutického cieľa. Výsledky ukázali, že gén BMAL1 inhibuje proliferáciu, migráciu a inváziu glioblastómových buniek potlačením expresie génov cyklínu B1, metaloproteinázy-9 a fosfo-AKT [1]. Ďalší výskum uskutočnený v roku 2019 využíval bunkovú líniu U87 a skúmal, že znížená expresia transkripčného faktora LITAF (tumor necrosis factor-alpha factor) indukovaná lipopolysacharidom môže zvýšiť rádiosenzitivitu gliómových buniek prostredníctvom upregulácie dráhy FOXO-1. LITAF je známy aj ako gén 7 indukovaný p53 (PIG7) [2].
- Objavovanie a vývoj liekov: U-87 MG bunky sa môžu použiť na účely skríningu a testovania liekov, čo umožňuje výskumníkom identifikovať nové potenciálne protinádorové lieky a posúdiť ich účinnosť a toxicitu. Ako výskum sa použila bunková línia glioblastómu U 87 MG na hodnotenie protinádorového a antioxidačného potenciálu antioxidačnej a protinádorovej aktivity extraktu Inula helenium (L.) [3]. Podobne sa v inej publikácii spomína použitie bunkovej línie U 87 na testovanie cytotoxického a apoptotického účinku rastlinných extraktov [4]. Okrem toho sa vo výskume publikovanom v roku 2018 skúmal cytotoxický účinok seskviterpénových alkaloidov extrahovaných z rastlín Nuphar na citlivé a na liečivá rezistentné bunkové línie U 87 MG [5].
Objednajte si svoju bunkovú líniu U87 MG Glioma ešte dnes
Bunková línia U-87 MG: Výskumné publikácie
Tu je niekoľko významných výskumných publikácií, v ktorých sa uvádza bunková línia U 87 MG.
V tomto článku uverejnenom v časopise Neuroreport 2018 sa navrhuje, že hypoxia môže zvýšiť migráciu a inváziu ľudských glioblastómových buniek reguláciou signálnej dráhy PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Táto štúdia bola uverejnená v časopise Frontiers in Pharmacology v roku 2020. Vo výsledkoch výskumu sa uvádza, že flavonoid Eriodictyol má protinádorové účinky na bunkovú líniu U87 a potláča proliferáciu a metastázovanie buniek. Zlúčenina sprostredkúva svoje protinádorové vlastnosti moduláciou dráhy PI3K/Akt/NF-κB.
Tento výskum v časopise Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) naznačuje, že čínska bylinná formula s názvom Xihuang pill môže indukovať apoptózu v bunkách U87 prostredníctvom zacielenia na kaskádu Akt/mTOR/FOXO1 aktivovanú ROS.
LITAF zvyšuje rádiosenzitivitu ľudských gliómových buniek prostredníctvom dráhy FoxO1
Tento výskumný článok bol uverejnený v časopise Cellular and Molecular Neurobiology v roku 2019. Štúdia navrhla, že transkripčný faktor LITAF znižuje a zvyšuje rádiosenzitivitu gliómových buniek reguláciou signálnej dráhy FOXO-1.
Tento článok bol uverejnený v časopise Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Vedci použili bunky U 87 MG na skúmanie cytotoxického účinku nanočastíc PLGA naložených kurkumínom.
Zdroje pre bunky U 87 MG: Riešenia: protokoly, videá a ďalšie materiály
Bunková línia glioblastómu U87MG sa používa v mnohých laboratóriách na výskum rakoviny. Niekoľko zdrojov s touto bunkovou líniou:
- Transfekcia bunkovej línie U87: Tento dokument vám popíše protokol transfekcie buniek U 87 MG.
- Transfekcia bunkovej línie U 87 MG: Toto video je návod, ktorý krok za krokom vysvetľuje protokol transfekcie buniek U87.
Zdroj pre protokol bunkovej kultúry buniek U87 je uvedený nižšie:
- U87 MG bunky: Tento odkaz obsahuje základné informácie o bunkovej línii U 87 MG. Obsahuje stručné protokoly delenia, zmrazovania a rozmrazovania buniek.
Poznatky o výskume MG gliómu U87: Často kladené otázky
Odkazy
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 potláča proliferáciu, migráciu a inváziu buniek U87MG znížením regulácie cyklínu B1, fosfo-AKT a metaloproteinázy-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al, LITAF Enhances Radiosensitivity of Human Glioma Cells via the FoxO1 Pathway (LITAF zvyšuje rádiosenzitivitu ľudských gliómových buniek prostredníctvom dráhy FoxO1). Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al. antioxidačná a protinádorová aktivita extraktu Inula helenium (L.) v ľudskej bunkovej línii glioblastómu U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh, and A. Ghasempour, Cytotoxicity and apoptosis induction in breast cancer, skin cancer and glioblastoma cells by plant extracts (Cytotoxicita a indukcia apoptózy v bunkách rakoviny prsníka, kože a glioblastómu pomocou rastlinných extraktov ). Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al. cytotoxicita seskviterpénových alkaloidov z nupharských rastlín voči citlivým a liekovo rezistentným bunkovým líniám. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.