Odhalenie buniek THP-1: Priekopnícky výskum leukémie
Bunková línia THP-1, známa ako Tohoku Hospital Pediatrics-1, je spontánne imortalizovaná kultúra ľudských monocytových leukemických buniek. Slúži ako univerzálny model pri štúdiu biológie monocytov, aktivít makrofágov a ich úloh v rakovine a imunoterapii. Ľudská leukemická bunková línia THP1 odráža fyziologické a funkčné vlastnosti monocytov periférnej krvi, čo z nej robí neoceniteľný zdroj na skúmanie diferenciačných antigénov monocytov a širších aspektov fyziológie monocytov. Tento článok poskytuje základný prehľad bunkovej línie THP1.
Všeobecné informácie a pôvod bunkovej línie THP-1
Pre tých, ktorí začínajú pracovať s bunkovou líniou THP-1, je nevyhnutné pochopiť jej základné charakteristiky. Rozoberieme jej definíciu, pôvod, morfológiu, veľkosť a genomické vlastnosti.
Bunková línia THP-1: THP-1 je ľudská monocytová leukemická bunková línia odvodená z periférnej krvi ročného pacienta, ktorému bola v roku 1980 diagnostikovaná akútna monocytová leukémia (podtyp M5).
Morfológia: Bunky THP-1 majú okrúhlu, veľkú a samostatnú morfológiu.
Veľkosť buniek: Tieto bunky sú relatívne veľké, s priemerom viac ako 21 µm.
Genóm a floidia: THP-1 je takmer diploidná bunková línia, pričom analýza karyotypu odhalila diploidný počet chromozómov (n = 46).
Kultivácia ľudskej leukemickej bunkovej línie THP-1
Primeraná znalosť vlastností bunkovej línie zjednodušuje proces jej kultivácie. V tejto časti sú uvedené dôležité podrobnosti o kultivácii a udržiavaní bunkovej línie THP-1 vrátane zdvojnásobenia času, kultivačných médií, adhéznych vlastností, hustoty výsevu, podmienok rastu, skladovania a procesov zmrazovania a rozmrazovania.
Čas zdvojenia: Čas zdvojenia buniek THP-1 je približne 35 hodín, hoci sa môže pohybovať od 19 do 50 hodín v závislosti od podmienok kultivácie.
Adherencia: Bunky THP-1 rastú v suspenzii, ale za určitých podmienok sa môžu diferencovať na adherentné bunky podobné makrofágom.
Hustota výsevu: Ideálna hustota výsevu sa pohybuje od 1,0x10^5 do 1,5x10^6 životaschopných buniek/ml. To sa dosiahne zriedením buniek z pestovanej kultúry na požadovanú hustotu.
Rastové médium: Odporúčané médium je RPMI 1640 doplnené 10 % FBS, 1 mM pyruvátom sodným a 2,5 mM L-glutamínom.
Rastové podmienky: Bunky by sa mali kultivovať vo zvlhčenom inkubátore s prívodom 5 % CO2 pri 37 °C.
Skladovanie: Na dlhodobé uchovávanie by sa bunky mali skladovať pri teplote nižšej ako -150 °C, aby sa zachovala ich životaschopnosť.
Proces zmrazovania: Na pomalé zmrazovanie použite médium CM-1 alebo CM-ACF s poklesom teploty o 1 °C za minútu.
Postup rozmrazovania: Rýchlo miešajte 40 - 60 sekúnd vo vodnom kúpeli s teplotou 37 °C, ktorý obsahuje antimikrobiálne činidlo, potom preneste do banky s rastovým médiom.
Úroveň biologickej bezpečnosti: S bunkami THP-1 by sa malo manipulovať v laboratóriách s úrovňou biologickej bezpečnosti 1.
Tento zjednodušený a vedecky presný opis poskytuje základné informácie o bunkovej línii THP-1 a pomáha výskumníkom pri práci s týmto cenným výskumným nástrojom.
Skúmanie biológie makrofágov pomocou bunkovej línie THP-1: Nahliadnutie do diferenciácie, funkcie a dynamiky imunitného systému
Bunky THP-1 ako model pre diferenciáciu a analýzu funkcií makrofágov
V súvislosti s bunkami THP-1 nadobúda diferenciácia a funkcie makrofágov jedinečný význam. Bunky THP-1 sú ľudskou leukemickou monocytovou líniou, ktorá sa bežne používa ako model na štúdium biológie monocytov a makrofágov in vitro. Majú schopnosť diferencovať sa na bunky podobné makrofágom, keď sa na ne pôsobí fórbol 12-myristát 13-acetátom (PMA), čo napodobňuje prechod, ktorým prechádzajú periférne monocyty, aby sa v tele stali makrofágmi. Po diferenciácii sa makrofágy odvodené od THP-1 môžu polarizovať na makrofágy M1 alebo M2 prostredníctvom špecifických podnetov, ktoré odrážajú prozápalový stav spojený s M1 alebo protizápalový stav spojený s M2 a obnovu tkaniva.
Tieto diferencované makrofágy THP-1 si zachovávajú kľúčové funkcie, ako je fagocytóza, prezentácia antigénu a produkcia cytokínov, čo z nich robí neoceniteľný in vitro systém na skúmanie molekulárnych a bunkových mechanizmov, ktoré sú základom reakcií makrofágov na rôzne signály. Štúdie využívajúce bunky THP-1 poskytli poznatky o aktivitách makrofágov vrátane reakcií na infekčné agensy, interakcií s rakovinovými bunkami a úlohy makrofágov v imunoregulácii a zápale. Bunky THP-1 slúžia aj ako účinný nástroj na skríning potenciálnych terapeutických zlúčenín, ktoré môžu modulovať aktivitu makrofágov, a na skúmanie imunologických aspektov účasti makrofágov na patogenéze a riešení chorôb.
Skúmanie polarizácie a aktivity makrofágov pomocou THP-1
Bunky THP-1 sú dôležité pri štúdiu polarizácie ľudských makrofágov, čo je proces, ktorý je kľúčový pre pochopenie imunitných reakcií v zdraví a chorobe. Diferenciáciou buniek THP-1 na makrofágy M0, M1 a M2 môžu výskumníci skúmať klasickú aktiváciu makrofágov (M1) spojenú s prozápalovými reakciami a polarizáciu makrofágov M2, ktorá súvisí s protizápalovými alebo hojivými procesmi. Tento model polarizácie makrofágov umožňuje hlbšie pochopiť zobrazovacie funkcie makrofágov v rôznych kontextoch vrátane vývoja nádorov a reakcie rakovinových buniek na terapiu.
THP-1 vo výskume rakoviny: Od apoptózy po chemorezistenciu
Bunková línia THP-1 je kľúčovým hráčom pri štúdiu apoptózy rakovinových buniek a mechanizmov, ktoré sú základom reakcií nádorových buniek na liečbu. Testy využívajúce bunky THP-1, ako napríklad testy ADCP zamerané na špecifické rakovinové bunky, pomáhajú objasniť interakcie medzi makrofágmi a nádorovými bunkami vrátane buniek HepG2. Okrem toho skúmanie aktivity kaspáz v bunkách THP-1 prispieva k pochopeniu apoptózy, ktorá je kritickým procesom pri progresii a liečbe rakoviny. Vplyv chemoterapeutík, ako je etopozid, na bunky THP-1 ponúka pohľad na úlohu týchto buniek v chemorezistencii, čo ďalej zdôrazňuje ich význam vo výskume rakoviny.
Bunky THP-1 a imunoterapia: Cieľové skupiny a odozva
V oblasti imunoterapie sa bunky THP-1 používajú na modelovanie interakcie medzi imunitnými bunkami a rakovinou, pričom sa skúma, ako sa makrofágy dajú využiť na zacielenie na rakovinové bunky, ako sú bunky Raji. Štúdium expresie mRNA a proteínov v bunkách THP-1 pomáha pochopiť zložité signálne dráhy zapojené do imunitnej odpovede a možnosti terapeutického zásahu. Tento výskum je kľúčový pre vývoj stratégií na manipuláciu aktivít makrofágov s cieľom dosiahnuť lepšie imunoterapeutické výsledky.
Bunková línia THP-1 sa vďaka svojej schopnosti napodobňovať periférne monocyty a podliehať polarizácii makrofágov stala základným kameňom pri štúdiu ľudskej leukémie, biológie makrofágov a ich vplyvu na rakovinu a imunoterapiu. Jeho všestrannosť a význam v rôznych testoch z neho robia základný nástroj na zlepšenie nášho chápania úlohy imunitného systému v zdraví a chorobe.
Preskúmajte našu kolekciu bunkových línií THP-1
Výskumné aplikácie buniek THP-1
Pred prácou s akoukoľvek bunkovou líniou si prejdite jej výskumné aplikácie a pochopte, ako tieto bunky využiť vo svojej štúdii. Tu sme uviedli niekoľko významných výskumných aplikácií bunkovej línie THP-1.
Bunková línia THP-1 sa široko používa v imunologickom výskume, pretože sa môže diferencovať na rôzne imunitné bunky. Tu je niekoľko príkladov štúdií, v ktorých boli použité bunky THP-1:
- V štúdii z roku 2018 sa bunky THP-1 použili na odvodenie makrofágových buniek a skúmanie zápalových dráh a súvisiacich mechanizmov. Výskumníci zistili, že proteín nazývaný apolipoproteín A-1 viažuci proteín (AIBP) môže zastaviť zápalové dráhy tým, že sa viaže na apoA-1 a stabilizuje ATP-viažuci kazetový transportér A1 (ABCA1) [3].
- V inej štúdii sa použili bunky THP-1 na vytvorenie buniek podobných monocytom a skúmali sa účinky neuroprotektívnej kyseliny dokozahexaénovej (DHA) na tieto bunky v súvislosti s Alzheimerovou chorobou. Štúdia skúmala potenciálne mechanizmy, ktoré sú základom interakcie s proteínom amyloid beta (Aβ) [4].
- Makrofágy odvodené od bunkovej línie THP-1 boli využité v inej štúdii na skúmanie nádorového potenciálu exozómov vylučovaných bunkami duktálneho adenokarcinómu pankreasu (PDAC) [5].
Publikácie zdôrazňujúce bunky THP-1 vo vedeckom výskume
Existuje množstvo štúdií o bunkách THP-1. Tu uvádzame niekoľko relevantných príkladov:
- Apolipoproteín A-1 viažuci proteín inhibuje zápalové signálne dráhy tým, že sa viaže na apolipoproteín A-1 v makrofágoch THP-1. Táto štúdia bola uverejnená v časopise Circulation Journal v roku 2018. V rámci tohto výskumu boli makrofágy odvodené od bunkovej línie THP-1 ošetrené lipopolysacharidom, aby sa indukovali zápalové dráhy. Štúdia navrhla, že proteín viažuci apolipoproteín A-1 zabraňuje zápalovým kaskádam tým, že sa viaže na proteín apolipoproteínu A-1.
- DHA oslabuje nekroptózu vyvolanú Aβ prostredníctvom signálnej dráhy RIPK1/RIPK3 v monocytoch THP-1. Tento výskum navrhol, že kyselina dokozahexaenová (DHA) inhibuje nekroptózu indukovanú proteínom amyloid beta v monocytoch odvodených od THP-1 v kontexte Alzheimerovej choroby
- Nádor podporujúce účinky exozómov buniek rakoviny pankreasu na makrofágy odvodené od THP-1: V tejto publikácii Linton a jeho kolegovia pozorovali rakovinotvorný účinok exozómov vylučovaných bunkami pankreatického duktálneho adenokarcinómu na makrofágy pochádzajúce z bunkovej línie THP-1.
- Vplyv triedenia odpadu na mikrobióm prostredia, životaschopnosť buniek THP-1 a zápalové reakcie: V tejto štúdii sa použili makrofágy odvodené z bunkovej línie THP-1 a skúmal sa vplyv mikrobiómu prítomného v priemysle triedenia odpadu na sekréciu prozápalových cytokínov týmito bunkami.
- Štandardizované protokoly na diferenciáciu buniek THP-1 na makrofágy s odlišnými fenotypmi M (IFNγ+ LPS), M (IL-4) a M (IL-10): Táto štúdia opisuje protokoly na indukciu diferenciácie buniek THP-1 a vývoj makrofágov s konkrétnymi fenotypmi.
- Proaterogénna proteoglykanáza ADAMTS-1 je v makrofágoch odvodených od THP-1 downregulovaná kyselinou laurovou prostredníctvom PI3K a JNK signálnych dráh. Tento článok bol uverejnený v časopise Molecular Biology Reports v roku 2019. Táto štúdia skúmala terapeutický potenciál kyseliny laurovej na makrofágoch odvodených od THP-1. Výsledky ukázali, že kyselina laurová stabilizuje plak aterosklerózy a inhibuje trombózu moduláciou expresie ADAMS-1 (proaterogénnej proteoglykanázy).
Zdroje pre bunkovú líniu THP-1
V tejto časti sú uvedené všetky dostupné online zdroje o bunkách THP-1. Významne vám to pomôže naučiť sa kultiváciu, diferenciáciu a transfekčné protokoly.
Protokoly kultivácie buniek
Toto je niekoľko zdrojov vysvetľujúcich kultivačné protokoly a protokoly manipulácie s bunkami THP-1.
- Protokol kultivácie a diferenciácie: Tento dokument obsahuje podrobné a komplexné informácie o médiách na kultiváciu buniek, subkultivácii, zmrazovaní a rozmrazovaní a protokoloch diferenciácie týchto buniek.
- Subkultivácia buniek THP-1: Tento dokument obsahuje protokol subkultivácie buniek THP-1.
Protokoly transfekcie
- Transfekcia buniek THP-1: Tento odkaz sa týka transfekcie buniek THP-1 plazmidovou DNA.
- Tento dokument opisuje protokol transfekcie buniek THP-1.
Videá týkajúce sa buniek THP-1
THP-1 je široko kultivovaná bunková línia. K dispozícii je mnoho video zdrojov, ktoré vysvetľujú manipuláciu s touto bunkovou líniou a jej kultiváciu:
- Kultivácia buniek THP-1: Toto video je o kultivácii bunkovej línie THP-1.
- Transfekcia bunkovej línie THP-1: Toto video ukazuje protokol na vysoko účinnú transfekciu buniek THP-1.
Dúfame, že tento článok obsahuje vhodné informácie o kultivácii buniek THP-1, diferenciácii, výhodách a výskumných aplikáciách. Ak plánujete použiť tento bunkový model akútnej myeloidnej leukémie in vitro vo svojom výskume, zvážte možnosť objednania u nás.
Často kladené otázky týkajúce sa bunkovej línie THP-1
Odkazy
- Chanput, W., J.J. Mes a H.J. Wichers, Bunkové línie THP-1: bunkový model in vitro pre prístup k imunitnej modulácii. Medzinárodná imunofarmakológia, 2014. 23(1): p. 37-45.
- Chanput, W., V. Peters a H. Wichers, THP-1 and U937 Cells ( Bunky THP-1 a U937). Vplyv potravinových bioaktívnych látok na zdravie: modely in vitro a ex vivo, 2015: s. 147-159.
- Zhang, M., a i., Apolipoprotein A-1 binding protein inhibuje zápalové signálne dráhy tým, že sa viaže na apolipoproteín A-1 v makrofágoch THP-1. Circulation Journal, 2018. 82(5): p. 1396-1404.
- Yuan, S., et al, DHA attenuates Aβ-induced necroptosis through the RIPK1/RIPK3 signaling pathway in THP-1 monocytes. Biomedicína a farmakoterapia, 2020. 126: p. 110102.
- Linton, S.S., et al., Tumor-promoting effects of pancreatic cancer cell exosomes on THP-1-derived macrophages ( Nádorové podporné účinky exozómov buniek rakoviny pankreasu na makrofágy odvodené od THP-1). PLoS One, 2018. 13(11): p. e0206759.