Bunková línia T98G
BunkyT98G predstavujú ľudskú bunkovú líniu glioblastómu, ktorá sa všeobecne používa v biomedicínskom výskume. Tieto bunky sa využívajú najmä v štúdiách rakoviny mozgu na skúmanie kľúčových buniek a molekulárnych faktorov, ktoré k nej prispievajú. Okrem toho pomáhajú výskumníkom pri skríningu a testovaní nových liekov proti rakovine, ktoré môžu pomôcť pri vývoji liekov.
Tento článok obsahuje všetky podstatné informácie o bunkovej línii T98G, ktoré budete potrebovať pred začatím práce s ňou, ako napr:
- Všeobecná charakteristika a pôvod bunkovej línie T98G
- Informácie o kultivácii bunkovej línie T98G
- Bunková línia T98G: Výhody a nevýhody
- Aplikácie buniek T98G
- Výskumné publikácie s bunkami T98G
- Zdroje pre bunky T98G: Protokoly, videá a ďalšie zdroje
1. Všeobecná charakteristika a pôvod bunkovej línie T98G
Táto časť článku vám pomôže preskúmať základné charakteristiky bunkovej línie T98G. Bude obsahovať informácie o pôvode bunkovej línie, morfológii, veľkosti a ploidii. Okrem toho komplexne pochopí nasledujúce otázky: Čo sú bunky T98G? Aký typ buniek je T98G? Odkiaľ pochádza T98G? Aké sú vlastnosti bunkovej línie T98G? Čo je glioblastómová bunková línia T98G U87?
- Bunkovú líniu T98G vytvoril GH Stein. Tvoria ju bunky podobné fibroblastom, ktoré boli získané z mozgového tkaniva 61-ročného muža kaukazskej rasy s multiformným glioblastómom [1].
- Bunky T98G sú netumorigénne; po injekčnom podaní nahým myšiam nespôsobujú nádory. Majú však tendenciu množiť sa pri vhodnom ukotvení v bunkovej kultúre.
- Tieto bunky majú morfológiu podobnú fibroblastovým bunkám.
- Bunková línia glioblastómu T98G predstavuje hyperpentaploidiu. Modálny počet chromozómov sa pohybuje medzi 128 až 132. Vyššie ploidie sa môžu vyskytovať u 1,39 % bunkovej populácie.
T98 vs T98G
Obe sú bunkové línie ľudského glioblastómu a majú podobný pôvod. Jediným rozdielom medzi týmito bunkovými líniami je počet chromozómov. T98G má takmer dvojnásobný počet chromozómov ako T98. Preto je T98G známy ako polyploidný variant T98.
T98G a U87
U87 a T98G sú bunkové línie ľudského glioblastómu používané pri výskume rakoviny mozgu. U87 vykazuje agresívnejší fenotyp v porovnaní s GBM T98G.
2. Informácie o kultivácii bunkovej línie T98G
Informácie o kultivácii bunkovej línie je nevyhnutné poznať skôr, ako s ňou začnete pracovať. Pomôžu vám ľahko a pohodlne manipulovať s bunkovou líniou v laboratóriu. Mali by ste vedieť: Aký je čas zdvojnásobenia bunkovej línie T98G? Aké rastové médium je najlepšie pre bunky T98G? Aké sú rastové charakteristiky T98G? Aká je hustota výsevu buniek T98G? Ako sa zmrazujú bunky T98G?
Kľúčové body pre kultiváciu buniek T98G
|
Čas zdvojnásobenia: |
Približný čas zdvojnásobenia buniek T98G je 40 hodín. Môže sa líšiť v závislosti od podmienok kultivácie. |
|
Adherentné alebo v suspenzii: |
Bunky T98G sú adherentné. Pripájajú sa na dno kultivačných nádob a vytvárajú monovrstvy. |
|
Pomer rozdelenia: |
Bunky T98G sa podkultivujú v pomere 1:2 až 1:5. Na tento účel sa bunky najprv premyjú 1 X PBS pufrom a potom sa inkubujú s pasážovacím roztokom (Accutase) 8 až 10 minút pri teplote okolia. Po inkubácii sa oddelené bunky pridajú do čerstvého rastového média a odstredia sa. Potom sa odobratý bunkový pelet opatrne resuspenduje a bunky sa dávkujú do kultivačnej banky obsahujúcej rastové médium. |
|
Rastové médium: |
Na kultiváciu buniek T98G sa používa médium EMEM obsahujúce 10 % fetálneho hovädzieho séra, 2 mM L-Glutamín, 2,2 g/l NaHCO3 a EBSS. Médium by sa malo vymieňať 3 až 4-krát týždenne. |
|
Rastové podmienky: |
Bunky T98G sa udržiavajú vo zvlhčenom inkubátore pri teplote 37 °C a sú napojené na prívod CO2. |
|
Skladovanie: |
Zmrazené bunky sa môžu skladovať pri teplote nižšej ako -150 °C alebo v parnej fáze tekutého dusíka, aby sa dlhodobo chránila životaschopnosť buniek. |
|
Proces zmrazovania a médium: |
Bunky T98G sa odporúča zmrazovať v médiu na zmrazovanie buniek CM-1 alebo CM-ACF. Na tento účel sa odporúča pomalý proces zmrazovania, ktorý umožňuje pokles teploty len o 1 °C za minútu. Tým sa zabráni akémukoľvek šoku buniek a zachová sa ich životaschopnosť. |
|
Proces rozmrazovania: |
Zmrazené bunky sa jemne rozmrazujú tak, že sa umiestnia do vopred zohriateho vodného kúpeľa pri teplote 37 °C na 40 až 60 sekúnd. Potom sa resuspendujú v čerstvom rastovom médiu a prenesú sa do novej banky. Po 24 hodinách inkubácie sa médium vymení, aby sa odstránili zložky zmrazovacieho média. |
|
Úroveň biologickej bezpečnosti: |
T98G kultúry sa udržiavajú v laboratóriu s biologickou bezpečnosťou 1. |
3. Bunková línia T98G: Výhody a nevýhody
T98G je široko používaná bunková línia glioblastómu odvodená od človeka. Má niekoľko výhod a nevýhod, ktoré ju odlišujú od ostatných. Niekoľko významných je uvedených v tejto časti článku.
Výhody
Výhody buniek T98G sú:
-
Dobre charakterizované
Dobre zavedená a dobre charakterizovaná bunková línia. Rozsiahlo študovaná a zdokumentovaná v literatúre.
-
Model in vitro
Reprezentuje vlastnosti glioblastómu, najagresívnejšieho nádoru mozgu. Cenný nástroj na skúmanie ochorenia, pochopenie biológie a vývoj liečby.
Nevýhody
Nevýhody spojené s bunkami T98G sú:
-
Heterogenita
Genetická heterogenita v populácii buniek T98G môže viesť k nekonzistentnosti experimentálnych výsledkov a komplikovať interpretáciu údajov.
4. Použitie buniek T98G
Bunková línia T98G je cenným nástrojom používaným vo výskume rakoviny. Tu je uvedených niekoľko hlavných výskumných aplikácií buniek T98G:
- Výskum rakoviny: Bunková línia T98G je cenným nástrojom na skúmanie biológie glioblastómových nádorov. Tieto bunky sa používajú najmä na štúdium zložitých molekulárnych dráh, ktoré sú základom vývoja a progresie glioblastómového ochorenia. Okrem toho sa využívajú na identifikáciu genetických mutácií, ktoré riadia rast nádorov, a ďalších mechanizmov rakovinových buniek. Yang Chen a jeho kolegovia pracovali na týchto bunkách a zistili, že nadmerná expresia miRNA-21 znižuje hladinu PDCD4 (Programmed cell death protein 4) v bunkách T98G. To vedie k inhibícii apoptózy buniek T98G sprostredkovanej PDCD4. Štúdia teda naznačuje miRNa-21 ako potenciálny cieľ pre vývoj terapií [2]. Podobne ako v tejto štúdii Fanqiang Kong a jeho kolegovia skúmali úlohu mikroRNA-15a pri proliferácii a invázii glioblastómových buniek T98G. Zistili, že miRNA-15a-5p podporuje tieto bunkové procesy tým, že sa zameriava na molekulu bunkovej adhézie 1 (CADM1) [3].
- Testovanie liekov a terapeutický vývoj: T98G slúži ako skvelý model glioblastómu in vitro na skríning nových liekov a poskytuje platformu na hodnotenie účinnosti potenciálnych terapií rakoviny. Výskumníci tiež testujú rôzne zlúčeniny a terapie s cieľom identifikovať a objaviť kandidátov na lieky s najsľubnejšími antiglioblastómovými vlastnosťami. To vedie k vývoju nových liekov a liečebných stratégií, ktoré ponúkajú nádej pre pacientov s glioblastómom. V takejto štúdii sa skúmal protirakovinový potenciál prírodnej zlúčeniny nazývanej korilagin v bunkovej línii GBM T98G rezistentnej na temozolomid. Výsledky štúdie navrhli, že korilagin v kombinácii s temozolomidom vyvoláva v bunkách vyššie hladiny antiproliferačných a antiapoptotických účinkov [4].
5. Výskumné publikácie s bunkami T98G
Nasledujú niektoré zaujímavé a často citované výskumné publikácie o glioblastómovej bunkovej línii T98G.
Chemoterapeutický účinok SR9009, agonistu REV-ERB, na bunky ľudského glioblastómu T98G
V tejto publikácii v časopise ASN Neuro (2019) sa skúmal protinádorový účinok agonistu REV-ERB s názvom SR9009 na glioblastómové bunky T98G.
Tento výskumný článok v Neurochemical research (2019) navrhol, že butyrát sodný a kvercetín synergicky inhibujú ochrannú autofágiu v bunkách T98G a zvyšujú apoptózu buniek.
Táto štúdia v časopise Genes (2023) podrobila bunkovú líniu T98G adaptovanú na hypoxiu sekvenovaniu RNA a navrhla IRE1 (Inositol-requiring enzyme 1) ako sľubný terapeutický cieľ.
Tento článok bol uverejnený v časopise Oncology Letters (2017). V štúdii sa skúmalo, že miRNA-548c-3p sa zameriava na onkogény T98G (c-Myb), aby inhibovala proliferáciu a migráciu buniek T98G.
V tomto článku v časopise Journal of Medicinal Plants Research (2011) sa navrhuje, že chloroformový extrakt Dracocephalum tanguticum má antiproliferačné účinky na bunky T98G moduláciou génov kaspázy-3, Bax a P21.
6. Zdroje pre bunky T98G: Riešenia: protokoly, videá a ďalšie materiály
Tu sú uvedené dostupné zdroje s protokolmi kultivácie a transfekcie buniek T98G.
- Transfekcia T98G: Tento výskumný článok obsahuje protokol transfekcie buniek T98G. Stručne vysvetľuje metódu a potrebné činidlá.
Nasledujúce odkazy vám výrazne pomôžu naučiť sa protokol kultivácie buniek T98G a uľahčia vám prácu s ním.
- Bunky T98G: Táto webová stránka obsahuje dôležité informácie týkajúce sa protokolov kultivácie buniek T98G vrátane subkultivácie a manipulácie s proliferačnými a kryokonzervovanými kultúrami. Okrem toho vám pomôže dozvedieť sa aj o médiách na rast buniek, podmienkach a zdvojnásobení času.
Referencie
- Haehl, E., Endotelovými bunkami indukovaná radiorezistencia u glioblastómu. 2021, Universität Tübingen.
- Chen, Y., et al., MicroRNA-21 down-regulates the expression of tumor suppressor PDCD4 in human glioblastoma cell T98G. Cancer letters, 2008. 272(2): p. 197-205.
- Kong, F., et al., MicroRNA-15a-5ppodporuje proliferáciu a inváziu glioblastómových buniek T98G prostredníctvom cielenia na molekulu bunkovej adhézie 1. Oncology Letters, 2021. 21(2): p. 1-1.
- Milani, R., et al., Corilagin Induces High Levels of Apoptosis in the Temozolomide-Resistant T98G Glioma Cell Line (Korilagín indukuje vysokú úroveň apoptózy v bunkovej línii gliómu T98G rezistentnej voči temozolomidu). Oncol Res, 2018. 26(9): p. 1307-1315.