Bunky SiHa - vrhajú svetlo na výskum rakoviny krčka maternice
BunkySiHa sú bunky rakoviny krčka maternice, ktoré sa široko používajú v biomedicínskom výskume. Sú skvelými hostiteľmi na transfekciu, a preto sú vhodné na štúdie génovej expresie. Vzhľadom na ich ľudský pôvod a význam pre rakovinu krčka maternice sa tieto bunky využívajú najmä v rakovinovej biológii, virológii a v štúdiách vývoja liekov.
Všeobecné charakteristiky a pôvod buniek SiHa
Pochopenie pôvodu bunkovej línie a jej všeobecných vlastností je veľmi dôležité, pretože ovplyvňuje jej použitie v rámci vášho výskumu. V tejto časti článku sa dozviete o pôvode bunkovej línie SiHa, charakteristických vlastnostiach a mnohých ďalších informáciách: Čo je to rakovinová bunková línia SiHa? Čo sú bunky SiHa HPV? Aký je pôvod bunkovej línie SiHa? Aká je morfológia SiHa?
- SiHa, bunková línia karcinómu krčka maternice, bola odvodená z fragmentov primárnej biopsie maternice ázijskej ženy (55-ročnej) so skvamóznym karcinómom [1].
- Bunková línia SiHa vykazuje hypertriploidný karyotyp. Väčšina buniek má priemerný počet chromozómov medzi 69 a 72. Približne 24 % buniek má však modálne číslo chromozómov 71.
- Bunky SiHa sú pozitívne na ľudský papiloma vírus 16. Vykazujú integráciu približne 1 až 2 kópií genómu HPV na bunku [2].
- Tieto bunky rakoviny krčka maternice vykazujú epitelovú morfológiu.
Bunková línia SiHa: Informácie o kultivácii
Udržiavanie kultúry bunkovej línie nie je jednoduché, kým nepoznáte všetky kľúčové body jej kultivácie. Mali by ste vedieť: Aký je čas zdvojnásobenia SiHa? Čo je to bunkové médium SiHa? Ako kultivujete bunkovú líniu SiHa?
Kľúčové body kultivácie buniek SiHa
|
Čas zdvojenia: |
Čas zdvojenia buniek SiHa je približne 17 hodín. |
|
Adherentné alebo v suspenzii: |
SiHa je adherentná bunková línia. |
|
Pomer subkultivácie: |
Pomer subkultivácie pre bunky SiHa je 1:2 až 1:4. Na pasážovanie sa adherentné bunky oplachujú 1x PBS. Pridá sa roztok akutázy a bunky sa inkubujú 8 až 10 minút pri teplote okolia. Potom sa pridá kultivačné médium a bunky sa odstredia. Bunkový pelet sa resuspenduje a bunky sa prelejú do novej banky na kultiváciu. |
|
Rastové médium: |
Na ideálny rast buniek SiHa sa používa minimálne esenciálne médium Eagle (EMEM) obsahujúce 10 % FBS, 2 mM L-Glutamín, 2,2 g/l NaHCO3 a Earleov vyvážený soľný roztok (EBSS). Médium sa vymieňa 2 až 3-krát týždenne. |
|
Rastové podmienky: |
SiHa bunky sa udržiavajú vo zvlhčenom inkubátore pri 37 °C s prívodom 5 % CO2. |
|
Skladovanie: |
Zmrazené fľaštičky s bunkovou líniou rakoviny krčka maternice SiHa sa dlhodobo skladujú pri teplote pod -150 °C v elektrickej mrazničke alebo v parnej fáze tekutého dusíka. |
|
Proces zmrazovania a médium: |
Na zmrazenie buniek SiHa sa používa zmrazovacie médium CM-1 alebo CM-ACF. Bunky sa zmrazujú metódou pomalého zmrazovania, ktorá umožňuje pokles teploty len o 1 °C za minútu, aby sa ochránila životaschopnosť buniek. |
|
Proces rozmrazovania: |
Zmrazené bunky sa udržiavajú 40 až 60 sekúnd vo vodnom kúpeli s teplotou 37 °C, kým nezostane malý ľadový chumáč. Potom sa pridá čerstvé rastové médium a bunky sa odstredia, aby sa odstránili zložky zmrazovacieho média. Bunkový pelet sa resuspenduje a bunky sa dávkujú do kultivačnej banky na rast. |
|
Úroveň biologickej bezpečnosti: |
Na manipuláciu a udržiavanie bunkových kultúr SiHa sa vyžaduje laboratórium na úrovni biologickej bezpečnosti 1. |
Výhody a nevýhody bunkovej línie SiHa
Podobne ako iné ľudské karcinómové bunkové línie, aj SiHa má niektoré odlišné vlastnosti spojené s určitými výhodami a nevýhodami. V tomto texte sme sa venovali niekoľkým významným z nich.
Výhody bunkovej línie rakoviny krčka maternice SiHa
- Model rakoviny krčka maternice
- Odvodená od skvamózneho karcinómu krčka maternice.
- Používa sa na štúdium mechanizmov, rastu a vývoja rakoviny krčka maternice.
- Expresia génov p53+ a pRB+, ktoré súvisia s opravou DNA, reguláciou bunkového cyklu a potláčaním nádorov.
- Nádorový potenciál
- Bunky SiHa sú tumorigénne a môžu indukovať slabo diferencované epidermoidné nádory III. stupňa u nahých myší.
- Používajú sa na výskum rakoviny in vivo a testovanie protinádorovej liečby.
Nevýhody buniek SiHa
- Miera proliferácie
- Bunky SiHa sa rýchlo množia, čo vedie k nadmernému rastu.
- Vyžadujú časté pasážovanie, čo zvyšuje riziko genetickej nestability, ktorá môže časom ovplyvniť správanie buniek.
Výskumné aplikácie článkov SiHa
Bunková línia SiHa sa vo veľkej miere používa pri výskume rakoviny krčka maternice. Tu sa uvádza niekoľko konkrétnych aplikácií tejto bunkovej línie.
- Štúdie súvisiace s ľudským papilomavírusom (HPV): SiHa bunky sú HPV 16 pozitívne, a preto sú cennými jednotkami na štúdium infekcie ľudským papilomavírusom, jeho molekulárnych mechanizmov a jeho úlohy pri vývoji a progresii rakoviny krčka maternice. Výskumníci využívajú tieto bunky aj na skúmanie vírusovej replikácie, integrácie a jej vplyvu na procesy v hostiteľskej bunke. V štúdii uskutočnenej v roku 2020 sa použila bunková línia SiHa na skúmanie úlohy onkoproteínov HPV E6/E7 pri vzniku rakoviny krčka maternice, a to cieleným zásahom pomocou technológie CRISPR. Zistenia odhalili, že vyradenie génov E6/E7 spôsobilo inhibíciu rastu a apoptózu buniek SiHa. Tieto vírusové gény preto môžu slúžiť ako kľúčové ciele liekov na vývoj terapie proti rakovine krčka maternice súvisiacej s HPV [3].
- Biológia rakoviny: SiHa bunky slúžia ako neoceniteľný model na štúdium biológie rakoviny krčka maternice vrátane vývoja rakoviny, progresie, metastázovania a invázie. Výskumníci využívajú tieto bunky na skúmanie genetických mutácií a základných molekulárnych dráh, ktoré prispievajú k rozvoju a rastu rakoviny krčka maternice, napríklad v štúdii, v ktorej sa využili bunky SiHa a zistilo sa, že regulácia SEC61G (SEC61 translocon subunit gamma) podporuje proliferáciu buniek rakoviny krčka maternice prostredníctvom aktivácie kaskády MAPK [4].
- Skríning a testovanie liekov: SiHa je široko používanou líniou rakoviny krčka maternice na hodnotenie účinnosti potenciálnych protinádorových liekov špecifických pre HPV-asociovanú rakovinu krčka maternice. Výskumníci skúmajú antiproliferačný, apoptotický a antimetastatický potenciál liečiv pomocou týchto buniek. Ako napríklad štúdia uskutočnená v roku 2019, ktorá skúmala cytotoxický potenciál extraktov z plodov Vatica diospyroides Symington Type SS na bunkovej línii rakoviny krčka maternice SiHa [5].
Bunky SiHa pre váš výskum!
Výskumné publikácie s bunkami SiHa
Niektoré významné a často citované výskumné publikácie obsahujú bunkovú líniu skvamózneho karcinómu krčka maternice SiHa.
V tejto publikácii v časopise OncoTargets and Therapy (2019) sa navrhuje, aby prírodná zlúčenina aloe-emodín pôsobila apoptoticky na bunky rakoviny krčka maternice SiHa v súvislosti s HPV E6/E7 a metabolizmom glukózy.
Tento článok bol uverejnený v časopise Future Journal of Pharmaceutical Sciences v roku 2022. V tejto štúdii sa skúmala protinádorová aktivita extraktu z listov rastliny Excoecaria agallocha (L.) na bunkovej línii rakoviny krčka maternice SiHa.
Táto štúdia uverejnená v časopise Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022) navrhla, že molekula 1, 10-fenantrolínu po spojení so sulfátovými nanočasticami zinku má významné antiproliferačné účinky v bunkách SiHa.
Tento výskum bol uverejnený v časopise Oncology Reports v roku 2019. Štúdia odhalila, že Astragalozid IV, prírodný produkt, potláča migráciu a inváziu buniek SiHa prostredníctvom modulácie signálnych dráh PI3K a MAPK sprostredkovaných TGF-β1.
Táto štúdia v časopise Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) odhalila, že IFI16 (interferón-gama indukovateľný proteín 16) reguluje gén PD-L1 prostredníctvom aktivácie dráhy STING-TBK1-NF-kB, čím podporuje rast buniek rakoviny krčka maternice SiHa.
Zdroje pre bunkovú líniu SiHa: Zdroje: Protokoly, videá a ďalšie materiály
Tu sú niektoré online zdroje týkajúce sa buniek SiHa.
- Transfekcia buniek SiHa: Tento výskumný článok obsahuje protokol na udržiavanie buniek rakoviny krčka maternice SiHa a na transfekciu buniek SiHa.
Nasledujúci odkaz obsahuje informácie o bunkových kultúrach pre bunky SiHa.
- Bunková línia SiHa: Táto webová stránka obsahuje mnoho cenných údajov o bunkovej línii SiHa. Patria sem informácie o rastových médiách, podmienkach kultivácie, protokoloch subkultivácie buniek SiHa a manipulácii s jej proliferačnými a kryokonzervovanými kultúrami.
Často kladené otázky týkajúce sa buniek karcinómu krčka maternice SiHa
Odkazy
- Melzer, C., J. von der Ohe a R. Hass, Stručný prehľad: kríženie mezenchymálnej strómy/ buniek podobných kmeňom s rakovinovými bunkami poskytuje terapeutický potenciál. Kmeňové bunky, 2018. 36(7): p. 951-968.
- Ostrowska, K.M., et al., Investigation of the influence of the high-risk human papillomavirus on the biochemical composition of cervical cancer cells using vibrational spectroscopy (Skúmanie vplyvu vysoko rizikového ľudského papilomavírusu na biochemické zloženie buniek rakoviny krčka maternice pomocou vibračnej spektroskopie ). Analytika, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
- Chen, Y., et al., In vitro a in vivo inhibícia rastu buniek ľudského karcinómu krčka maternice prostredníctvom štiepenia mRNA ľudského papilomavírusu E6/E7 systémom CRISPR/Cas13a. Antiviral Research, 2020. 178: p. 104794.
- Fan, Y., et al, SEC61G podporuje proliferáciu rakoviny krčka maternice aktiváciou signálnej dráhy MAPK. Disease Markers, 2022. 2022.
- Chothiphirat, A., et al., Anticancer potential of fruit extracts from Vatica diospyroides symington type SS and their effect on program cell death of cervical cancer cell lines (Protinádorový potenciál výťažkov z plodov Vatica diospyroides symington typ SS a ich vplyv na programovú bunkovú smrť bunkových línií rakoviny krčka maternice ). The Scientific World Journal, 2019. 2019.
