Bunky RBL-2H3 - význam RBL-2H3 v alergickej reakcii a imunologických štúdiách
Bunková línia RBL-2H3 je bazofilná leukemická bunková línia odvodená od potkanov, ktorá sa používa v imunologickom výskume. Slúži ako modelový systém na štúdium fyziológie, správania a funkcií mastocytov. Tieto bunky sa používajú aj na štúdium alergických reakcií, imunologických procesov a testovanie a vývoj liekov.
Článok poskytne informácie o pôvode RBL-2H3, všeobecných vlastnostiach, požiadavkách na kultiváciu a výskumných aplikáciách.
Bunky RBL-2H3: Pôvod a všeobecné vlastnosti
Pred použitím bazofilnej bunkovej línie vo vašom výskume by ste mali poznať jej pôvod a všeobecné vlastnosti. Táto časť článku vás bude informovať o základoch buniek RBL-2H3. Napríklad: Čo sú to mastocyty RBL-2H3? Prečo používať bunky RBL-2H3? Čo sú to bunky RBL-2H3 pri bazofilnej leukémii potkanov? Aká je morfológia buniek RBL-2H3? Sú bunky RBL-2H3 nesmrteľné?
- RBL-2H3 sú bunky bazofilnej leukémie odvodené z bazofilných buniek potkana Wistar v roku 1978 v laboratóriu imunológie Národného ústavu pre výskum zubov.
- Bunky RBL-2H3 majú receptorovú tyrozínkinázu c-kit a receptory proteázy žírnych buniek II (RMCP-II), čo z nich robí potenciálny model žírnych buniek. Preto sa bežne nazývajú žírnymi bunkami napriek ich pôvodu z potkaních bazofilov [1].
- Pri aktivácii uvoľňujú histamín a ďalšie mediátory a exprimujú vysokoafinitné IgE receptory.
- Bunky RBL-2H3 vykazujú morfológiu podobnú fibroblastom.
Bunky RBL-2H3: Informácie o kultivácii
Táto časť vám pomôže zistiť niektoré kľúčové aspekty kultivácie bunkovej línie RBL-2H3. Budete vedieť: Čo je to čas zdvojenia buniek RBL-2H3? Aká je hustota výsevu buniek RBL-2H3? Aký je protokol kultivácie buniek RBL-2H3? Čo je to médium na zmrazovanie bunkovej línie RBL-2H3?
Kľúčové body pre kultiváciu buniek RBL-2H3
|
Čas zdvojnásobenia populácie: |
Čas zdvojnásobenia buniek RBL-2H3 je približne 50 - 60 hodín. |
|
Adherentné alebo v suspenzii: |
RBL-2H3 je adherentná bunková línia. |
|
Pomer subkultivácie: |
V prípade buniek RBL-2H3 sa pomer delenia udržiava v rozmedzí 1:2 až 1:4. Adherentné bunky sa premývajú 1 x roztokom PBS bez obsahu horčíka a vápnika. Pridá sa pasážovací roztok Accutase a bunky sa 10 minút udržiavajú pri teplote okolia, aby sa oddelili od dna kultivačnej nádoby. Pridá sa čerstvé médium a bunky sa odstredia. Zozbierané bunky sa opatrne resuspendujú v čerstvom médiu a prelejú sa do nových fliaš obsahujúcich rastové médium. |
|
Rastové médium: |
Na kultiváciu buniek RBL-2H3 sa používa médium EMEM obsahujúce 10 % FBS, 2 mM L-Glutamín, 2,2 g/l NaHCO3 a soľ EBSS. Médium by sa malo vymieňať 2 až 3-krát týždenne. |
|
Rastové podmienky: |
Bunky RBL-2H3 sa kultivujú vo zvlhčenom inkubátore pri teplote 37 °C a sú napojené na zdroj 5 %CO2. |
|
Skladovanie: |
Bunky sa skladujú v parnej fáze tekutého dusíka alebo pri teplote nižšej ako -150 °C v elektrickej mrazničke, aby sa dlhodobo chránila životaschopnosť buniek. |
|
Proces zmrazovania a médium: |
Na zmrazenie buniek RBL-2H3 sa používa zmrazovacie médium CM-1 alebo CM-ACF s použitím pomalého zmrazovacieho procesu. Táto metóda umožňuje zníženie teploty o 1 °C za minútu a chráni bunky pred šokom. |
|
Postup rozmrazovania: |
Bunky RBL-2H3 sa rozmrazujú v prednastavenom vodnom kúpeli (37 °C) približne 60 sekúnd. Potom sa bunky pridajú do čerstvého kultivačného média a odstredia sa. Tento krok je nevyhnutný na odstránenie zložiek zmrazovacieho média. Potom sa bunkový pelet resuspenduje v rastovom médiu a bunky sa dávkujú do banky na kultiváciu. |
|
Úroveň biologickej bezpečnosti: |
Bunky RBL-2H3 by sa mali uchovávať v laboratóriách s biologickou bezpečnosťou 1. |
Výhody a obmedzenia bunkovej línie RBL-2H3 Bazofilné bunky
Bunky RBL-2H3 sa bežne používajú v imunologickom výskume. V tejto časti sú uvedené ich hlavné výhody a obmedzenia.
Výhody
- Jednoduchá kultivácia: Bunky RBL-2H3 sa dajú ľahko kultivovať a udržiavať v laboratórnom prostredí. To uľahčuje nákladovo efektívne a reprodukovateľné experimenty, vďaka čomu sú obľúbenou voľbou pre počiatočné štúdie v imunológii.
Obmedzenia
- Nie sú ľudského pôvodu: Bunky RBL-2H3 pochádzajúce z potkaních bazofilov nemusia presne napodobňovať ľudské biologické procesy, čo môže obmedzovať ich použiteľnosť v špecifických výskumných štúdiách na ľuďoch. To si vyžaduje opatrnú interpretáciu údajov pri extrapolácii výsledkov na ľudské systémy.
- Zjednodušený model žírnych buniek: Hoci tieto bunky poskytujú základný model na štúdium funkcií žírnych buniek, nereprezentujú v plnej miere komplexnú povahu interakcií žírnych buniek v rámci ľudského imunitného systému. V dôsledku toho nemusia adekvátne modelovať mnohostranné úlohy žírnych buniek v imunitných reakciách alebo chorobných stavoch in vivo.
Bunková línia RBL-2H3: RBL-2H: základný kameň imunologického výskumu
Výskum bazofilov a mastocytov s využitím bunkovej línie RBL-2H3
Bunková línia RBL-2H3, odvodená od Rattus norvegicus, slúži ako kľúčový model na štúdium biológie bazofilov a mastocytov. Tieto žírne bunky potkanov poskytujú zásadné poznatky o uvoľňovaní mediátorov žírnymi bunkami, ktoré sú rozhodujúce pre pochopenie alergických stavov, ako je alergická nádcha. Prostredníctvom týchto buniek vedci skúmajú dynamiku bunkových receptorov a vytváranie imunologických synapsií, ktoré sú kľúčové pre reakciu imunitného systému na alergény. zaujímavá štúdia uverejnená v roku 2019 využívala bunkovú líniu RBL-2H3 a skúmala mechanizmy, ktoré stoja za pseudoalergickými reakciami vyvolanými injekciou Qingkailing. Štúdia zistila, že signalizačná kaskáda PI3K-RAC1 čiastočne vyvoláva túto alergickú reakciu v bunkách [2]
Dynamika imunologických synapsií vo výskume alergie
Bunky RBL-2H3, ktoré sa vo veľkej miere využívajú v imunologickom výskume, sú obzvlášť účinné na skúmanie dynamiky imunologických synapsií. Pomáha to pri objasňovaní komunikačných procesov imunitného systému, pričom sa uplatňuje pri štúdiu žírnych buniek periférnej krvi aj peritoneálnych žírnych buniek. Takýto výskum je nevyhnutný pre komplexné pochopenie imunitnej odpovede v systémových aj lokálnych súvislostiach
Skríning liekov a testovanie toxicity
Pri skríningu a testovaní liekov sa využíva reaktivita buniek RBL na rôzne podnety vrátane štúdia toho, ako H2O2 inhibuje reakcie sprostredkované IgE. Tieto bunky zohrávajú zásadnú úlohu pri vývoji liečby ochorení, ako sú streptokokové infekcie, pri ktorých streptokoky skupiny mitis inhibujú aktiváciu mastocytov. Okrem toho výskumníci hodnotia toxické účinky rôznych látok vrátane chemikálií, liekov a nanočastíc pomocou tohto modelu RBL 2H3 mc. Napríklad v nedávnej štúdii (2022) sa hodnotila cytotoxicita polystyrénových mikroplastov na bunky RBL 2H3. Zistili, že mikroplasty poškodzujú organely buniek RBL-2H3 a podporujú bunkovú smrť [3]. V ďalšej štúdii z roku 2021 sa hodnotil protialergický a protizápalový potenciál prírodného produktu, neferínu, na modeli mc RBL 2H3. Štúdia odhalila dobré protialergické a protizápalové vlastnosti zlúčeniny [4]
Pokročilé metodiky imunologických meraní
Vďaka konzistentnému a merateľnému uvoľňovaniu mediátorov z buniek RBL 2H3 sú tieto bunky ideálne na pohodlnú fluorimetriu, čo uľahčuje precízne a presné merania, ktoré sú kľúčové pre štúdium chorôb a hodnotenie terapeutických látok.
Bunková línia RBL-2H3 s pôvodom v Rattus norvegicus je neoceniteľným prínosom v základnom aj aplikovanom výskume v oblasti imunológie. Ponúka hlboké možnosti na zlepšenie našich vedomostí a liečby imunologických ochorení
Bunková línia RBL-2H3 pre pokročilý imunologický výskum
Bunky RBL-2H3: Výskumné publikácie
Nižšie sú uvedené niektoré zaujímavé výskumné publikácie týkajúce sa žírnych buniek RBL-2H3:
Inhibičná aktivita narirutínu na degranuláciu buniek RBL-2H3
Táto výskumná práca bola uverejnená v časopise Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). V štúdii sa navrhlo, že narirutín, prírodná zlúčenina, má inhibičné účinky na degranuláciu RBL 2H3 prostredníctvom regulácie NF-κB, MAPK a signálnej dráhy tyrozínkinázy.
Tento výskum v časopise International Journal of Molecular Sciences (2020) navrhol, že zlúčenina apigenínu významne potláča alergické a zápalové reakcie buniek RBL-2H3 a RAW264.7. Preto môže slúžiť ako potenciálny prostriedok na boj proti ochoreniam súvisiacim s imunitou.
V tejto výskumnej práci v časopise International Journal of Molecular Sciences (2021) sa hodnotili protialergické a protizápalové účinky prírodného produktu saponarínu s použitím rôznych bunkových línií vrátane RBL-2H3.
V tejto štúdii založenej na dôkazoch doplnkovej a alternatívnej medicíny (2014) sa zistilo, že extrakty a niektoré aktívne zložky Benchalokawichianu majú potenciálne inhibičné účinky na uvoľňovanie ß-hexosaminidázy z RBL 2H3.
Tento článok bol uverejnený v roku 2018 v časopise International Journal of Biological Macromolecules. V štúdii sa uvádza, že spirulina maxima, prírodný produkt, inhibuje degranuláciu RBL 2H3 tým, že zabraňuje fosforylácii MAPKs a AKT.
Zdroje pre bunkovú líniu RBL-2H3: Protokoly, videá a ďalšie zdroje
RBL-2H3 je široko používaná línia žírnych buniek. Tu sú uvedené dostupné zdroje, ktoré sa týkajú kultivácie RBL-2H3 a protokolov transfekcie:
- RBL 2H3 MC model: Tento výskumný článok obsahuje protokoly na udržiavanie kultúr RBL-2H3 a na transfekciu RBL-2H3.
Tu sú uvedené niektoré zdroje vysvetľujúce protokol kultivácie buniek RBL-2H3:
- RBL-2H3 bunky: Táto webová stránka je pre vás prospešná, aby ste sa naučili protokoly bunkových kultúr pre bunkovú líniu RBL-2H3. Okrem toho obsahuje informácie o médiách a podmienkach kultivácie buniek RBL 2H3.
Bunková línia RBL-2H3: Základné otázky a odpovede pre výskumníkov
Odkazy
- Passante, E. a N. Frankish, Bunková línia RBL-2H3: jej pôvod a vhodnosť ako modelu pre žírnu bunku. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q., et al., Pseudoalergická reakcia spôsobená injekciou Qingkailing čiastočne prostredníctvom signálnej dráhy PI3K-Rac1 v bunkách RBL-2H3. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al. polystyrénové mikro (nano) plasty poškodzujú organely buniek RBL-2H3 a podporujú MOAP-1 pri indukcii apoptózy. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al. antialergické a protizápalové účinky neferínu na bunky RBL-2H3. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.