Bunky NCI-H460 - Navigácia vo výskume rakoviny pľúc pomocou poznatkov o bunkách NCI-H460
NCI-H460 sú ľudské bunky nemalobunkového karcinómu pľúc, ktoré sa bežne používajú vo výskume karcinómu pľúc a toxikológii. Táto bunková línia je cenným nástrojom na štúdium rôznych aspektov biológie rakoviny zahŕňajúcich vývoj, rast a odolnosť nádorov voči liekom. Okrem toho sú bunky NCI-H460 vhodným modelom na vývoj protirakovinových činidiel.
Bunky NCI-H460: Pôvod a všeobecné charakteristiky
Pôvod a všeobecné charakteristiky bunkovej línie významne prispievajú k jej výskumným aplikáciám. Táto časť článku vám pomôže pri spoznávaní pôvodu a hlavných vlastností buniek NCI-H460 rakoviny pľúc. Dozviete sa: Čo sú bunky NCI-H460? Čo je typ bunkovej línie NCI-H460? Aká je morfológia NCI-H460?
- Bunková línia NCI-H460 pochádza z pleurálneho výpotku európskeho muža s veľkobunkovým karcinómom pľúc. V roku 1982 ju vytvoril A. F. Gazdar a jeho kolegovia.
- Bunky rakoviny pľúc NCI-H460 majú epitelovú morfológiu.
- NCI-H460 je nádorová bunková línia s hypotriploidným karyotypom. Modálne číslo chromozómov týchto buniek je 57. Bunky NCI-H460 majú tiež 58 modálnych chromozómov v porovnateľnej miere.
- Tieto bunky rakoviny pľúc majú mnoho mutácií NCI-NCI-H460 ako nemalobunkové nádory pľúc, napríklad mutáciu NCI-H460 KRAS, ktoré sa podieľajú na proliferácii buniek, raste, invázii a metastázach.
Informácie o kultivácii buniek NCI-H460
Pre správnu manipuláciu a údržbu bunkovej línie NCI-H460 by ste mali poznať nasledujúce kľúčové body. Poskytnú vám informácie o čase zdvojnásobenia NCI-H460, kultivačnom médiu NCI-H460 a základných postupoch kultivácie buniek rakoviny pľúc NCI-H460.
Kľúčové body pre kultiváciu buniek NCI-H460
|
Čas zdvojnásobenia: |
Čas zdvojenia buniek NCI-H460 je približne 33 hodín. |
|
Adherentné alebo v suspenzii: |
Bunky rakoviny pľúc NCI-H460 sú adherentné. |
|
Pomer subkultivácie: |
Odporúčaný pomer delenia pre bunkovú líniu NCI-H460 je 1:2 a 1:4. Po odstránení starého média sa adherentné bunky opláchnu fyziologickým roztokom s 1 x fosfátovým pufrom. Potom sa bunky inkubujú s pasážovacím roztokom Accutase 8 až 10 minút pri teplote okolia. Disociované bunky sa resuspendujú v kultivačnom médiu a odstredia sa. Zozbierané bunky sa opäť resuspendujú a prelejú do novej banky na kultiváciu. |
|
Rastové médium: |
Ako kultivačné médium NCI-H460 sa používa RPMI 1640. Je doplnené 10 % fetálnym hovädzím sérom, 2,1 mM stabilným glutamínom a 2,0 g/l NaHCO3. Médium by sa malo vymieňať 2 až 3-krát týždenne. |
|
Rastové podmienky: |
Kultúry NCI-H460 sa udržiavajú pri teplote 37 °C vo zvlhčenom inkubátore s nepretržitým prívodom 5 % CO2. |
|
Skladovanie: |
Bunky rakoviny pľúc NCI-H460 sa môžu dlhodobo skladovať v parnej fáze tekutého dusíka alebo pri teplote nižšej ako -150 °C v elektrickej mrazničke s veľmi nízkou teplotou. |
|
Proces zmrazovania a médium: |
Na zmrazenie a skladovanie buniek NCI-H460 sa používa médium CM-1 alebo CM-ACF. Na ochranu maximálnej životaschopnosti buniek sa odporúča pomalá metóda zmrazovania. |
|
Postup rozmrazovania: |
Zmrazené bunky NCI-H460 sa rozmrazujú vo vopred zohriatom vodnom kúpeli (pri teplote 37 °C) počas 40 až 60 sekúnd, kým nezostane malý ľadový chumáč. Rozmrazené bunky sa pridajú s čerstvým médiom a odstredia sa, aby sa odstránili zložky zmrazovacieho média. Odobratý bunkový pelet sa opäť resuspenduje a bunky sa dávkujú do nových baniek obsahujúcich médium na rast. Prichytenie buniek NCI-H460 na povrch banky môže trvať takmer 24 hodín. |
|
Úroveň biologickej bezpečnosti: |
S bunkami rakoviny pľúc NCI-H460 sa manipuluje a udržiava v laboratóriách s úrovňou biologickej bezpečnosti 1. |
Výhody a nevýhody buniek NCI-H460
NCI-H460 je široko používaná bunková línia vo výskume rakoviny pľúc. Táto časť sa zaoberá všeobecnými výhodami a nevýhodami súvisiacimi s bunkami NCI-H460 pre rakovinu pľúc.
Výhody
Výhody bunkovej línie nemalobunkového karcinómu pľúc NCI-H460 sú:
-
Nádorový pôvod
Bunková línia NCI-H460 bola odvodená od pacienta s veľkobunkovým karcinómom pľúc, ktorý predstavuje tento konkrétny typ rakoviny pľúc. Používa sa ako model na štúdium biológie rakoviny pľúc a na vývoj nových a účinných liečebných postupov. Bunky NCI-H460 majú tumorigénny potenciál a môžu sa aplikovať imunodeficientným myšiam na vytvorenie in vivo nádorových modelov na štúdium rastu, vývoja a účinnosti potenciálnych liekov.
-
Vysoká miera proliferácie
NCI-H460 vykazuje vyššiu rýchlosť rastu ako iné bunkové línie nemalobunkového karcinómu pľúc, napríklad A549. Táto výhoda zvyšuje ich dostupnosť a pomáha výskumníkom vykonávať reprodukovateľné a časovo náročné experimenty.
Nevýhody
Nevýhody spojené s bunkami rakoviny pľúc NCI-H460 sú:
-
Homogenita
Bunky NCI-H460 sú homogénne, pretože boli získané z nádoru jedného pacienta. Preto im vo všeobecnosti chýba komplexnosť a heterogenita pozorovaná v nádoroch pacientov.
Výskumné využitie buniek NCI-H460
Bunky rakoviny pľúc NCI-H460 sa vo veľkej miere používajú v štúdiách týkajúcich sa karcinómu pľúc. Tu sú niektoré z dôležitých výskumných aplikácií buniek NCI-H460:
- Výskum rakoviny pľúc: Bunky NCI-H460 sú neoceniteľným modelom na skúmanie bunkových a molekulárnych mechanizmov, ktoré sa podieľajú na vývoji, raste a metastázovaní nádorov. Okrem toho sa používajú na štúdium nevyhnutných signálnych dráh, molekulárnych cieľov a rôznych genetických mutácií spojených s progresiou rakoviny pľúc. Na bunkách NCI-H460 sa uskutočnilo niekoľko štúdií s cieľom účinne študovať tieto faktory. Štúdia uskutočnená v roku 2019 navrhla, že nadmerne exprimovaný nukleárny ubikvitný kazeín a substrát cyklín-dependentných kináz (NUCKS) sa podieľajú na raste nádorových buniek prostredníctvom regulácie signálnej dráhy PI3K/AKT [1]. Podobne sa v štúdii in vitro a in vivo použili bunky NCI-H460 na štúdium úlohy génu eIF4E. Zistenia odhalili, že gén eIF4E sa podieľa na raste pľúcneho karcinómu a angiogenéze a možno ho zacieliť na vývoj sľubných liekov proti rakovine pľúc [2].
- Objavovanie a vývoj liekov: NCI-H460, bunková línia ľudského karcinómu pľúc, sa široko používa v štúdiách objavovania a vývoja liekov. Výskumníci používajú tieto bunky na skúmanie toxicity a účinnosti nových kandidátskych liekov, cielených terapií a liečby zameranej najmä na mutácie KRAS NCI-H460. V štúdii, ktorú uskutočnil Haoyue Hu a jeho kolegovia v roku 2023, sa použili bunky NCI-H460 na štúdium protinádorových účinkov lieku anlotinib. Výsledky ukázali, že anlotinib čiastočne ovplyvnil rast buniek rakoviny pľúc s mutáciou KRAS inhibíciou signalizačnej kaskády MEK/ERK [3]. Podobne sa na antiproliferačnú a proapoptotickú aktivitu skrínovala fenolová zlúčenina, kyselina karnosová, s použitím buniek NCI-H460 [4].
- Rezistencia na liečivá: Bunková línia NCI-H460 je ideálna na štúdium mechanizmu rezistencie pľúcneho karcinómu na lieky. Výskumníci používajú tieto bunky na vývoj modelov rezistencie na lieky s cieľom identifikovať základné gény, molekulárne faktory a signálne dráhy. Ako napríklad štúdia, v rámci ktorej boli vyvinuté bunky NCI-H460 rezistentné voči pemetrexedu, viacúčelovému antifolátovému činidlu, s cieľom študovať základné molekulárne mechanizmy rezistencie voči pemetrexedu v bunkách nemalobunkového karcinómu pľúc [5].
Zakúpte si bunkovú líniu NCI-H460: Brána k výskumu rakoviny pľúc
Výskumné publikácie s bunkami NCI-H460
Tu je niekoľko zaujímavých výskumných publikácií o bunkovej línii karcinómu pľúc NCI-H460.
Táto štúdia v časopise Molecules (2023) navrhla, že prírodný α-1,6-glukán, BBWPW, z čiernej fazule inhibuje proliferáciu buniek NCI-H460 prostredníctvom regulácie dráhy PI3K/AKT/MAPK.
V tomto článku v časopise Phytomedicine (2019) sa skúmalo, že dioscín-6′-O-acetát, nová prírodná zlúčenina, pôsobí antiproliferačne na bunky rakoviny pľúc NCI-H460.
miRNA-425-5p zvyšuje rast rakoviny pľúc prostredníctvom signálnej osi PTEN/PI3K/AKT
Vo výskume BMC Pulmonary Medicine (2020) sa uvádza, že mikroRNA-425-5p zvyšuje nádorové bujnenie karcinómu pľúc prostredníctvom dráhy PTEN/PI3K/AKT.
V tomto článku v časopise Molecular Medicine Reports (2017) bol navrhnutý protinádorový potenciál a základné mechanizmy zlúčeniny chinalizarínu v bunkách NCI-H460 a iných bunkách rakoviny pľúc.
Tento výskum v časopise Food and Function (2019) poukazuje na potenciálny protirakovinový účinok extraktu Eucalyptus globulus labill. s použitím buniek NCI-H460. Zistenia ukázali, že rastlinný extrakt tieto účinky prejavil zvýšením expresie p53 v NCI-H460 a úpravou profilu bunkového cyklu.
Zdroje pre bunkovú líniu NCI-H460: Riešenia: protokoly, videá a ďalšie zdroje
Tu je niekoľko online zdrojov, ktoré obsahujú bunky rakoviny pľúc NCI-H460.
- Transfekcia buniek NCI-H460: Tento videonávod je sprievodcom krok za krokom pre transfekciu buniek NCI-H460 plazmidovou DNA.
Nasledujúce odkazy obsahujú nevyhnutné informácie o bunkových kultúrach pre bunky H460.
- Bunky NCI-H460: Táto webová stránka poskytuje dôležité informácie o médiách, subkultivácii, zmrazovaní a rozmrazovaní buniek NCI-H460.
- Pasážovanie buniek NCI-H460: Tento dokument vám poskytne informácie o pasážovaní a subkultivácii bunkovej línie NCI-H460. Okrem toho vám pomôže naučiť sa protokol transfekcie buniek NCI-H460.
Skúmanie bunkovej línie NCI-H460: Často kladené otázky a poznatky
Odkazy
- Hu, C., et al., NUCKS podporuje proliferáciu, migráciu a inváziu buniek rakoviny pľúc prostredníctvom signálnej dráhy Pi3k/Akt. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): s. E55-61.
- Qi, X., a i., EGPI-1, nový inhibítor interakcie eIF4E/eIF4G, inhibuje rast buniek rakoviny pľúc a angiogenézu prostredníctvom signálnej dráhy Ras/MNK/ERK/eIF4E. Chemicko-biologické interakcie, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al. anlotinib vykazuje protinádorové účinky na bunky karcinómu pľúc s mutáciou KRAS prostredníctvom potlačenia dráhy MEK/ERK. Cancer Management and Research, 2020: s. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., Carnosic acid exhibits antiproliferative and proapoptotic effects in tumoral NCI-H460 and nontumoral IMR-90 lung cells (Kyselina karnosová vykazuje antiproliferačné a proapoptotické účinky v nádorových bunkách pľúc NCI-H460 a nenádorových bunkách IMR-90 ). Journal of Toxicology and Environmental Health, časť A, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L., et al. vytvorenie a charakterizácia buniek NCI-H460/PMT rezistentných voči pemetrexedu. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (predtým Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.