Buněčná línia MX-1

MX-1 je bunková línia ľudského adenokarcinómu prsníka odvodená z modelu xenotransplantátu rakoviny prsníka u atymických myší. Bunky ľudského adenokarcinómu prsníka boli izolované z nádoru prsníka 29-ročnej ženy kaukazského pôvodu. Bunky MX-1 predstavujú trojnásobne negatívny karcinóm prsníka (TNBC), ktoré sa vo veľkej miere využívajú na výskum rezistencie voči liekom, bunkovej signalizácie, mechanizmu reakcie na lieky atď.

Pôvod a všeobecné informácie o bunkách MX-1

Pred začatím práce s touto bunkovou líniou by ste sa mali oboznámiť s jej základnými vlastnosťami. Prejdeme si takmer všetky všeobecné informácie týkajúce sa bunkovej línie MX-1.

Nesmrteľná bunková línia MX-1 je tumorigenická bunková línia získaná z nádorového xenotransplantátu. Bunky MX-1 sa považujú za typ trojitého negatívneho karcinómu prsníka (TNBC) [1]. Navyše sú tieto bunky negatívne na estrogénový receptor a p53, keďže tieto gény nevyjadrujú.

Bunky MX-1 – modelový systém pre trojnásobne negatívnu rakovinu prsníka

Kultivačné podmienky buneckej línie MX-1 nie sú náročné. Tieto bunky sa dajú ľahko rozmnožovať a používať v rôznych výskumných laboratóriách na štúdie transfekcie. Metódou prechodnej transfekcie sa bežne skúmajú základné bunkové mechanizmy a vzory génovej expresie v tejto buneckej línii [2, 3].

Táto bunková línia je spoľahlivým modelovým systémom pre karcinómy prsníka. Môže sa použiť na pochopenie molekulárnych mechanizmov stojacich za progresiou ochorenia, ako aj na skríning a vývoj liekov na boj proti ochoreniu. Konkrétnejšie, ľudská bunková línia adenokarcinómu prsníka MX-1 môže byť alternatívou k bunkám TNBC, keďže je negatívna na estrogénové receptory [4].

Uverejnené: 2023 | Posledná revízia: máj 2026

Bunka MX-1: Informácie o kultivácii

• Doba zdvojnásobenia: Doba zdvojnásobenia populácie buniek INS-1 je približne 44 hodín.
• Adherentné alebo v suspenzii: Bunky INS-1 rastú ako v suspenzii, tak aj v adherentnej forme.
• Pomer subkultivácie: Bunky INS-1 sa subkultivujú v pomere rozdelenia 1:3. Stručne povedané, bunky v suspenzii sa zozbierajú. Adherentné bunky sa prepláchnu PBS a inkubujú s roztokom Accutase. Po oddelení sa k bunkám pridá čerstvé médium. Následne sa centrifugujú a zozbierajú ako bunky v suspenzii, tak aj adhézne bunky. Bunky sa opatrne resuspendujú a rozdelia do nových fliaš na rast.
• Rastové médium: Na kultiváciu buniek inzulínómu potkana INS-1 sa používa RPMI 1640. Kultivačné médium je doplnené 10 % tepelne inaktivovaným fetálnym bovinným sérom, 2,1 mM stabilným glutamínom, 10 mM HEPES, 2,0 g/l NaHCO₃ a 1 mM pyruvátom sodným.
• Podmienky kultivácie: Bunky INS-1 sa uchovávajú vo zvlhčenom inkubátore nastavenom na teplotu 37 °C s nepretržitým prívodom 5 % CO₂.
• Skladovanie: Beta-bunky INS-1 je možné dlhodobo skladovať v parnej fáze tekutého dusíka alebo pri teplote nižšej ako -150 °C v elektrickom mrazničke.
• Proces zmrazovania a médium: Na zmrazenie buniek INS-1 sa používajú médiá CM-1 alebo CM-ACF prostredníctvom procesu pomalého zmrazovania. Ten umožňuje pokles teploty iba o 1 °C za minútu, aby sa zachovala životaschopnosť buniek.
• Proces rozmrazovania: Zmrazené bunky INS-1 sa rozmrazujú vo vodnom kúpeli, ktorý je vopred nastavený na teplotu 37 stupňov Celzia, po dobu 40 až 60 sekúnd. Po rozmrazení sa do buniek pridá čerstvé médium a bunky sa priamo prelejú do novej banky na kultiváciu. Po 24 hodinách sa médium vymení, aby sa odstránili zložky zmrazeného média.
• Úroveň biologickej bezpečnosti: Na kultiváciu buniek inzulínomu potkana INS-1 je potrebné laboratórium s úrovňou biologickej bezpečnosti 1.

Bunky MX-1: Využitie vo výskume

Táto bunková línia MX-1 ľudského adenokarcinómu prsníka sa bežne používa v štúdiách rakoviny prsníka namiesto buniek, ako sú MDA-MB-231 alebo MCF-7. Tu je niekoľko špeciálnych aplikácií tejto bunkovej línie vo výskume rakoviny.  

Mechanizmy rezistencie voči liekom

Bunky MX-1 sa používajú na štúdium molekulárnych faktorov sprostredkovávajúcich vývoj rezistencie voči liekom na rakovinu prsníka. V štúdiách sa bunky MX-1 široko využívajú na vytvorenie modelov rezistencie voči liekom. Štúdia uverejnená v roku 2021 uvádza použitie buniek MX-1 na vytvorenie buneckej línie rakoviny prsníka rezistentnej voči doxorubicínu. Vyvinutý bunkový model potvrdil účasť transportéra ABCB1 a epiteliálno-mezenchymálnej transformácie (EMT) na získaní chemorezistencie [5].

Expresia génov/signálne dráhy buniek

Bunka MX-1 sa dá dočasne transfekovať s cieľom objasniť vzory génovej expresie a bunkové signálne dráhy. V štúdiách sa bunky MX-1 používali na transfekciu shRNA (krátka vlásenková RNA) a nekódujúcej RNA s cieľom preskúmať ich vplyv na proliferáciu a rast buniek rakoviny prsníka. Okrem toho sa objasňujú súvisiace génové signálne dráhy [2, 6].

Skríning potenciálnych inhibítorov

Bunky MX-1 možno použiť na skríning potenciálnych liekov proti rakovine prsníka, keďže napodobňujú mikroprostredie rakovinových buniek. Výskumná štúdia preukázala terapeutickú aktivitu vinorelbínu, toxínu mikrotubulov, ktorý v bunkách MX-1 vyvolal bunkovú smrť a polyploidiu [4].

Objednajte si bunkovú líniu MX-1 ešte dnes

Zdroje týkajúce sa bunkovej línie MX-1: protokoly, videá a ďalšie materiály

Zdroje týkajúce sa metód kultivácie a transfekcie sú obmedzené, ale zhromaždili sme pre vás čo najviac informácií.

Protokoly kultivácie buniek

Bunky MX-1 sa používajú v mnohých štúdiách zameraných na analýzu prechodnej transfekcie. Tu sme uviedli niekoľko zdrojov, ktoré vám pomôžu s protokolmi transfekcie.

• Transfekcia buniek MX-1: Táto publikácia opisuje protokol transfekcie siRNA v bunkách MX-1 na vývoj modelu génového knock-outu.
• Transfekcia cicavčích buniek: Tento článok obsahuje všetky podstatné informácie o metódach transfekcie používaných v cicavčích bunkových líniách.

Dúfame, že vám tento článok poskytol cenné poznatky o bunkovej línii MX-1 a že ste získali lepší prehľad o tom, ako tieto bunky kultivovať, udržiavať a využívať vo vašom výskume. Ak máte záujem pracovať s bunkovou líniou MX-1, neváhajte si ju u nás objednať a začnite svoju výskumnú cestu!

Často kladené otázky o bunkovej línii karcinómu prsníka MX-1

Referencie

1. Stefanski, C.D. a J.R. Prosperi, Boj proti rezistencii voči CHK1 pri trojito negatívnom karcinóme prsníka: inhibícia EGFR ako potenciálna kombinovaná terapia. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): s. 229.
2. Vasiyani, H., et al., Analóg cGAMP, c-di-AMP, aktivuje dráhu bunkovej smrti sprostredkovanú STING v bunkách karcinómu prsníka negatívneho na estrogénový receptor. Apoptosis, 2021. 26: s. 293–306.
3. Xiang, S., et al., Proteomická analýza vplyvu proteínu podobného inhibítoru apoptózy 2 na proliferáciu buniek rakoviny prsníka. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): s. 1–11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa a J. Magae, Vinorelbín, toxín mikrotubulov, indukuje apoptózu a polyploidiu v MX-1, ľudskej bunkovej línii trojitého negatívneho karcinómu prsníka. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): s. 447–451.
5. Kubiliute, R. a kol., Negenotoxický aktivátor ABCB1, tetrafenylfosfónium, môže prispievať k rezistencii voči doxorubicínu v bunkovej línii karcinómu prsníka MX-1. Scientific reports, 2021. 11(1): s. 1–11.
6. Jiang, R., et al., Mixomická analýza rakoviny prsníka: Dlhá nekódujúca RNA linc01561 pôsobí ako ceRNA zapojená do progresie rakoviny prsníka. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: s. 1–9.