Bunková línia MX-1

MX-1 je bunková línia ľudského adenokarcinómu prsníka odvodená z modelu xenotransplantátu karcinómu prsníka na atýmových myšiach. Bunky ľudského adenokarcinómu prsníka boli vytvorené z nádoru prsníka 29-ročnej ženy kaukazskej rasy. Bunky MX1 sú triple-negatívnym karcinómom prsníka (TNBC), ktoré sa vo veľkej miere využívajú na výskum rezistencie na lieky, bunkovej signalizácie, mechanizmu odpovede na lieky atď.

Pôvod a všeobecné informácie o bunkách MX-1

Pred prácou s touto bunkovou líniou by ste sa mali oboznámiť s jej zákutiami. Preberieme takmer všetky všeobecné informácie týkajúce sa bunkovej línie MX-1.

Nesmrteľná bunková línia MX-1 je nádorová bunková línia vytvorená z nádorového xenotransplantátu. Bunky MX-1 sa považujú za typ trojito negatívneho karcinómu prsníka (TNBC) [1]. Okrem toho sú tieto bunky negatívne na estrogénový receptor a p53, pretože tieto gény neexprimujú.

Bunky MX-1 - modelový systém pre trojito negatívnu rakovinu prsníka

Podmienky kultivácie bunkovej línie MX-1 nie sú náročné. Tieto bunky sa dajú ľahko množiť a používať v rôznych výskumných laboratóriách na transfekčné štúdie. Metódou tranzientnej transfekcie sa bežne študujú základné bunkové mechanizmy a vzorce expresie génov v tejto bunkovej línii [2, 3].

Táto bunková línia je vhodným modelovým systémom pre karcinómy prsníka. Možno ju použiť na pochopenie molekulárnych mechanizmov, ktoré stoja za progresiou ochorenia, a na skríning a vývoj liekov na boj proti ochoreniu. Konkrétnejšie, ľudská bunková línia adenokarcinómu prsníka MX-1 môže byť alternatívou k bunkám TNBC, pretože je negatívna na estrogénové receptory [4].

Bunková línia MX-1: Informácie o kultivácii

• Čas zdvojenia: Čas zdvojenia populácie buniek INS-1 je približne 44 hodín.
• Adherentné alebo v suspenzii: Bunky INS-1 rastú v suspenznej aj adherentnej forme.
• Pomer subkultivácie: Bunky INS-1 sa subkultivujú v pomere 1:3. V krátkosti sa odoberú suspendované bunky. Adherentné bunky sa opláchnu PBS a inkubujú sa s roztokom Accutase. Po oddelení sa bunky doplnia čerstvým médiom. Potom sa suspendované aj adherentné bunky odstredia a zozbierajú. Bunky sa opatrne resuspendujú a dávkujú do nových baniek na rast.
• Rastové médium: Na kultiváciu bunkovej línie INS-1 inzulinómu potkana sa používa RPMI 1640. Médium je doplnené 10 % tepelne inaktivovaným fetálnym bovinným sérom, 2,1 mM stabilným glutamínom, 10 mM HEPES, 2,0 g/l NaHCO3 a 1 mM pyruvátom sodným.
• Rastové podmienky: Bunky INS-1 sa uchovávajú vo zvlhčenom inkubátore pri teplote 37 °C a s nepretržitým prívodom 5 % CO2.
• Skladovanie: Bunky INS-1 beta sa môžu dlhodobo skladovať v parnej fáze tekutého dusíka alebo pri teplote nižšej ako -150 °C v elektrickej mrazničke.
• Proces zmrazovania a médium: Na zmrazenie buniek INS-1 sa používajú médiá CM-1 alebo CM-ACF prostredníctvom pomalého procesu zmrazovania. Umožňuje pokles teploty len o 1 °C za minútu, aby sa ochránila životaschopnosť buniek.
• Proces rozmrazovania: Zmrazené bunky INS-1 sa rozmrazujú vo vodnom kúpeli nastavenom na teplotu 37 °C počas 40 až 60 sekúnd. Po rozmrazení sa bunky doplnia čerstvým médiom a priamo sa nalejú do novej banky na rast. Po 24 hodinách sa médium vymení, aby sa odstránili zložky zmrazeného média.
• Úroveň biologickej bezpečnosti: Na kultiváciu buniek INS-1 inzulinómu potkana sa vyžaduje laboratórium s úrovňou biologickej bezpečnosti 1.

Bunky MX-1: Použitie vo výskume

Táto línia buniek ľudského adenokarcinómu prsníka MX-1 sa bežne používa v štúdiách rakoviny prsníka namiesto buniek ako MDA-MB-231 alebo MCF-7. Tu je niekoľko špeciálnych aplikácií tejto bunkovej línie vo výskume rakoviny.

Mechanizmy rezistencie voči liekom

Bunky MX-1 sa používajú na štúdium molekulárnych faktorov sprostredkujúcich vznik rezistencie voči liekom proti rakovine prsníka. V štúdiách sa vo veľkej miere používajú bunky MX-1 na vytvorenie modelov rezistentných na lieky. V štúdii uverejnenej v roku 2021 sa uvádza použitie buniek MX-1 na vytvorenie bunkovej línie rakoviny prsníka rezistentnej na doxorubicín. Vytvorený bunkový model potvrdil účasť ABC transportéra ABCB1 a epiteliálno-mezenchymálneho prechodu (EMT) pri získavaní chemorezistencie [5].

Génová expresia/celulárna signálna dráha

Bunkovú líniu MX-1 možno transfekovať prechodne s cieľom objasniť vzorce expresie génov a signálne dráhy buniek. V štúdiách sa bunky MX-1 použili na transfekciu shRNA (krátka vlasová RNA) a nekódujúcej RNA s cieľom preskúmať ich účinok na proliferáciu a rast buniek rakoviny prsníka. Okrem toho sa objasnili súvisiace génové signálne dráhy [2, 6].

Skríning potenciálnych inhibítorov

Bunky MX-1 možno použiť na skríning potenciálnych liečiv proti rakovine prsníka, pretože napodobňujú mikroprostredie rakovinových buniek. Výskumná štúdia preukázala terapeutickú aktivitu vinorelbínu, mikrotubulárneho toxínu, ktorý vyvolal bunkovú smrť a polyploidizáciu v bunkách MX-1 [4].

Objednajte si svoju bunkovú líniu MX-1 ešte dnes

Bunková línia MX-1 Zdroje: Protokoly, videá a ďalšie zdroje

Dostupné zdroje týkajúce sa metód kultivácie a transfekcie sú obmedzené, ale zhromaždili sme pre vás čo najviac informácií.

Protokoly kultivácie buniek

Bunky MX-1 sa používajú v mnohých štúdiách analýzy tranzientnej transfekcie. Tu sme uviedli niekoľko zdrojov, ktoré vám pomôžu s transfekčnými protokolmi.

• Transfekcia buniek MX-1: Táto publikácia opisuje protokol transfekcie siRNA v bunkách MX-1 na vytvorenie modelu génového knock-out.
• Transfekcia buniek cicavcov: Tento článok obsahuje všetky podstatné informácie o metódach transfekcie používaných v bunkových líniách cicavcov.

Dúfame, že tento článok vám poskytol cenné poznatky o bunkovej línii MX-1 a že ste lepšie pochopili, ako tieto bunky kultivovať, udržiavať a využívať vo svojom výskume. Ak máte záujem pracovať s bunkovou líniou MX-1, neváhajte si ju u nás objednať a odštartovať tak svoju výskumnú cestu!

Často kladené otázky o bunkovej línii karcinómu prsníka MX-1

Odkazy

1. Stefanski, C.D. a J.R. Prosperi, Boj proti rezistencii na CHK1 u trikrát negatívneho karcinómu prsníka: Inhibícia EGFR ako potenciálna kombinovaná liečba. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): p. 229.
2. Vasiyani, H., et al. analóg cGAMP, c-di-AMP, aktivuje dráhu bunkovej smrti sprostredkovanú STING v bunkách estrogén-receptor negatívneho karcinómu prsníka. Apoptosis, 2021. 26: p. 293-306.
3. Xiang, S., et al. proteomická analýza inhibítora apoptózy proteínupodobnéhoproteínu-2na proliferáciu buniek rakoviny prsníka. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): p. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa, and J. Magae, Vinorelbine, a Microtubule Toxin, Induces Apoptosis and Polyploidy in MX-1, a Human Triple-Negative Breast Cancer Cell Line (Vinorelbín, mikrotubulárny toxín, indukuje apoptózu a polyploidiu v ľudskej trojito negatívnej bunkovej línii rakoviny prsníka). Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): p. 447-451.
5. Kubiliute, R., et al., Nongenotoxický aktivátor ABCB1 tetrafenylfosfónium môže prispievať k rezistencii na doxorubicín v bunkovej línii rakoviny prsníka MX-1. Vedecké správy, 2021. 11(1): p. 1-11.
6. Jiang, R., a i., Mixomická analýza rakoviny prsníka: Dlhá nekódujúca RNA linc01561 pôsobí ako ceRNA zapojená do progresie rakoviny prsníka. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: p. 1-9.