Bunková línia HT22

HT22 je línia myších neurónových buniek, ktorá sa bežne používa v neurobiologickom výskume. Je cenná na štúdium neurogeneratívnych porúch a testovanie potenciálnych neuroprotektívnych terapií alebo liečby. Okrem toho sú bunky HT22 citlivé na glutamát, a preto sa používajú na skúmanie glutamátom indukovanej toxicity alebo poškodenia neurónov.

Tento článok poukazuje na nevyhnutné aspekty buniek HT22, ktoré vám môžu pomôcť pri vašej výskumnej práci. Budú sa v ňom rozoberať najmä:

Všeobecné vlastnosti a pôvod buniek HT22
Informácie o kultivácii bunkovej línie HT22
Výhody a nevýhody bunkovej línie HT22
Výskumné aplikácie bunkovej línie HT22
Výskumné publikácie s bunkami HT22
Zdroje pre bunky HT22: Protokoly, videá a ďalšie zdroje

1. Všeobecné vlastnosti a pôvod buniek HT22

Táto časť článku objasní pôvod a všeobecné vlastnosti buniek HT22. Znalosť týchto informácií o bunkovej línii je potrebná pred začatím práce s ňou. V tejto časti sa dozviete: Čo sú bunky HT22? Aká je morfológia buniek HT22 hipokampu? Aká je veľkosť buniek HT22?

HT22 je kontinuálna bunková línia odvodená z oblasti hipokampu myšieho mozgu. Je to subklon rodičovskej bunkovej línie HT-4, ktorá bola vyvinutá imortalizáciou myších neurónových tkanív prostredníctvom teplotne citlivého polyomavírusového antigénu T similského vírusu 40 (SV40).

Tieto bunky sa líšia od zrelých buniek hipokampu, pretože nemajú glutamátové a cholinergné receptory ako zrelé neuróny hipokampálneho pôvodu. Preto nie sú vhodné na výskumné štúdie súvisiace s pamäťou [1].

Bunky HT22 majú vzhľad podobný epitelovým bunkám.

Amyloidné plaky tvoriace sa medzi neurónmi pri Alzheimerovej chorobe.

2. Informácie o kultivácii bunkovej línie HT22

Bunky HT22 sa používajú vo výskumných laboratóriách v oblasti neurovedy. Pred kultiváciou týchto buniek vedci hľadajú základné informácie o kultivácii buniek, ktoré im uľahčia a zefektívnia prácu. Táto časť obsahuje všetky kľúčové body pre kultiváciu buniek HT22. Budete vedieť: Aký je čas zdvojenia buniek HT22? Ako sa kultivujú bunky HT22? Aký je protokol kultivácie buniek HT22? Aké sú médiá pre bunky HT22?

Kľúčové body pre kultiváciu buniek HT22

Čas zdvojenia:	Čas zdvojnásobenia buniek HT22 je približne 15 hodín.
Adherentné alebo v suspenzii:	Bunky HT22 sú adherentné.
Pomer subkultivácie:	Pomer subkultivácie pre hipokampálne bunky HT22 je 1:3 až 1:6. Krátko sa odstráni médium a adherentné bunky sa opláchnu 1 x PBS. Do banky sa pridá disociačný roztok akutázy a bunky sa inkubujú 8 až 10 minút pri teplote okolia. Potom sa pridá čerstvé kultivačné médium a bunky sa zhromaždia v nádobke na centrifugáciu. Získaný bunkový pelet sa opatrne resuspenduje a bunky sa dávkujú do kultivačnej banky na rast.
Rastové médium:	Na kultiváciu buniek HT22 sa používa médium DMEM. Je doplnené 10 % FBS, 4,5 g/l glukózy, 4 mM L-glutamínu, 1,5 g/l NaHCO3 a 1,0 mM pyruvátu sodného pre optimálny rast buniek.
Rastové podmienky:	Bunková kultúra HT22 sa uchováva vo zvlhčenom inkubátore (teplota 37 °C) s_prívodom5 %_CO2.
Skladovanie:	Zmrazené bunky HT22 sa môžu dlhodobo skladovať pri teplote nižšej ako -150 °C buď v parnej fáze tekutého dusíka, alebo v elektrickej mrazničke s veľmi nízkou teplotou.
Proces zmrazovania a médium:	Bunky HT22 sa môžu zmraziť v médiu CM-1 alebo CM-ACF pomocou metódy pomalého zmrazovania. Tento proces umožňuje zníženie teploty vzorky len o 1 °C za minútu, chráni bunky pred šokom a pomáha zachovať ich životaschopnosť.
Proces rozmrazovania:	Bunky sa rozmrazujú vo vodnom kúpeli s teplotou 37 °C počas 40 až 60 sekúnd, kým nezostane malá hrudka ľadu. Potom sa do buniek pridá kultivačné médium a odstredia sa, aby sa odstránili zložky zmrazovacieho média. Bunkový pelet sa resuspenduje a bunky sa prelejú do novej banky obsahujúcej kultivačné médium. Následne sa bunky inkubujú pri teplote 37 °C v inkubátore najmenej 24 hodín.
Úroveň biologickej bezpečnosti:	Na kultiváciu buniek HT22 je povinné laboratórne prostredie úrovne biologickej bezpečnosti 1.

30 % a 90 % konfluentné monovrstvy buniek HT22 v bunkovej kultúre.

3. Výhody a nevýhody bunkovej línie HT22

Hipokampálne bunky HT22 sa spájajú s niektorými výhodami a nevýhodami, ktoré ich odlišujú od iných neuronálnych bunkových línií. Tu sú uvedené niektoré významné výhody a nevýhody bunkovej línie.

Výhody

Výhody myšej neuronálnej bunkovej línie HT22 sú:

Rýchly rast
Bunky HT22 majú čas zdvojnásobenia 15 hodín, čo umožňuje rýchle a efektívne experimenty a pomáha včasnému získavaniu výsledkov výskumu.
Immortalizácia
HT22 je imortalizovaná bunková línia, ktorá zabezpečuje nepretržitý rast počas dlhšieho obdobia. To zabezpečuje stálu dostupnosť buniek, znižuje čas a náklady a uľahčuje dlhodobé experimenty s konzistentnými výsledkami.

Nevýhody

Nevýhody buniek HT22 sú:

Murínsky pôvod
Bunková línia HT22 bola odvodená z tkaniva myšieho mozgového hipokampu, ktoré nemusí plne reprezentovať komplexnosť fyziológie a správania ľudských neurónových buniek, čo obmedzuje ich translačný význam.

4. Výskumné aplikácie bunkovej línie HT22

Bunky HT22 sa vo veľkej miere používajú v neurobiologickom výskume. V tejto časti článku sa rozoberá niekoľko sľubných aplikácií tejto bunkovej línie:

Neurovedecký výskum: Bunky HT22 sa vo veľkej miere využívajú pri výskume neurodegeneratívnych ochorení, t. j. Alzheimerovej a Parkinsonovej choroby. Považujú sa za cenný výskumný nástroj na štúdium neurotoxicity a mechanizmov oxidačného stresu súvisiacich s týmito chorobami. Výskumom uskutočneným v roku 2020 sa zistilo, že dráha PI3K/AKT/CREB je zapojená do nervovej toxicity vyvolanej hyperglykémiou v bunkách HT22 [2]. Podobne nedávna štúdia navrhla, že dráha Nrf2/HO-1 a signalizačná os NF- κB zohrávajú významnú úlohu pri toxicite amyloidu beta v bunkách HT22 [3].
Skríning liečiv: Bunky HT22 sa vo veľkej miere používajú na účely testovania a skríningu liečiv. Pomáhajú výskumníkom identifikovať potenciálne terapeutické látky, ktoré vykazujú neuroprotektívne účinky v boji proti neurodegeneratívnym ochoreniam. V štúdii uskutočnenej v roku 2019 sa skúmal neuroprotektívny potenciál zlúčeniny tetrahydrokurkumínu v hipokampálnych bunkách HT22 ošetrených glutamátom. Glutamát tu vyvoláva oxidačný stres v bunkách HT22 a spôsobuje bunkovú smrť aktiváciou mitogén-aktivovaných proteínkináz [4].

800,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní plus náklady na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 305158

5. Výskumné publikácie s bunkami HT22

Tu je niekoľko zaujímavých výskumných prác, v ktorých je použitá bunková línia HT22:

Skúmanie neuroprotektívnych účinkov krocínu prostredníctvom antioxidačných aktivít v bunkách HT22 a u myší s Alzheimerovou chorobou

Táto štúdia v časopise International Journal of Molecular Medicine (2019) navrhla neuroprotektívny potenciál krocínu, zlúčeniny izolovanej z Crocus sativus L. vbunkách HT22poškodenýchL-glutamátom.

Nové oxindolové deriváty zabraňujú bunkovej smrti vyvolanej oxidačným stresom v myšacích hipokampálnych bunkách HT22

V tejto publikácii v časopise Neuropharmacology (2018) sa uvádza, že deriváty oxindolu chránia pred smrťou buniek HT22 vyvolanou oxidačným stresom.

Ginsenozid Rb2 potláča glutamátom sprostredkovaný oxidačný stres a bunkovú smrť neurónov v bunkách HT22

Táto výskumná práca bola uverejnená v časopise Journal of Ginseng Research v roku 2019. Táto štúdia skúmala neuroprotektívne účinky prírodného produktu, ginsenosidu Rb2, s použitím bunkovej línie HT22. Štúdia zistila, že ginsenozid rb2 účinne znížil glutamátom indukovaný oxidačný stres a bunkovú smrť v myšacích hipokampálnych bunkách HT22.

Nanočastice striebra indukovali cytotoxicitu v bunkách HT22 prostredníctvom autofágie a apoptózy prostredníctvom signálnej dráhy PI3K/AKT/mTOR

Táto štúdia v časopise Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) hodnotila cytotoxický potenciál nanočastíc striebra v bunkovej línii HT22.

Ferrostatín-1 chráni bunky HT-22 pred oxidačnou toxicitou

Tento výskumný článok bol uverejnený v roku 2020 v časopise Neural regeneration research. Navrhoval, že ferrostatín-1, inhibítor ferroptózy, zabraňuje oxidačnej toxicite v bunkách hipokampu HT22.

6. Zdroje pre bunky HT22: Zdroje: Protokoly, videá a ďalšie materiály

Niektoré online zdroje o bunkách HT22 vysvetľujú ich transfekciu, diferenciáciu a protokoly bunkových kultúr:

HT22 transfekcia: Tento dokument obsahuje optimalizovaný protokol pre transfekciu HT22 v 24- a 96-jamkových platniach na bunkové kultúry.
Diferenciácia buniek HT22: Tento článok vás komplexne oboznámi s protokolom diferenciácie buniek HT22.

Nasledujúci odkaz obsahuje protokol o kultivácii buniek HT22:

Subkultivácia buniek HT22: Tento odkaz vám pomôže naučiť sa protokol subkultivácie bunkovej línie HT22. Okrem toho vám pomôže naučiť sa protokol na vyvolanie neurotoxicity v bunkách.
HT22 hipokampálne bunky: Táto webová stránka obsahuje množstvo užitočných informácií o zdvojnásobení času buniek HT22, médiách a protokoloch kultivácie buniek.

Odkazy

He, M., et al., Differentiation renders susceptibility to excitotoxicity in HT22 neurons (Diferenciácia spôsobuje náchylnosť na excitotoxicitu v neurónoch HT22 ). Neural Regen Res, 2013. 8(14): p. 1297-306.
Zhang, S., et al., Fisetin preventes HT22 cells from high glucose-induced neurotoxicity via PI3K/Akt/CREB signaling pathway. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: p. 241.
Zhang, R.-l., et al., Protective effects of berberine against β-amyloid-induced neurotoxicity in HT22 cells via the Nrf2/HO-1 pathway. Bioorganická chémia, 2023. 133: p. 106-210.
Park, C.-H., et al., Neuroprotektívne účinky tetrahydrokurkumínu proti oxidačnému stresu vyvolanému glutamátom v hipokampálnych bunkách HT22. Molecules, 2019. 25(1): p. 144.