Bunková línia HT-29

HT-29 je bunková línia ľudského kolorektálneho karcinómu so širokou škálou aplikácií v oblasti výskumu rakoviny a toxikológie. Tieto bunky sú napríklad citlivé na štandardné chemoterapeutické postupy proti kolorektálnemu karcinómu. Okrem toho je bunková línia HT-29 dobre charakterizovaným in vitro modelom na skúmanie reakcie črevného epitelu na bakteriálnu infekciu. Bunky HT-29 napodobňujú vlastnosti zrelých črevných buniek, t. j. enterocytov, a preto sú vhodné na pripútanie a mechanistické štúdie.

Tento článok sa zaoberá všetkými aspektmi bunkovej línie HT-29, ktoré potrebujete poznať pred prácou s ňou. Bude zahŕňať najmä:

1. Bunky HT-29: Pôvod a všeobecné informácie
2. Informácie o bunkovej kultúre bunkovej línie HT-29
3. Bunky HT-29: Výhody a obmedzenia
4. Bunky HT-29: Použitie
5. Výskumné publikácie o bunkách HT-29
6. Zdroje o bunkách HT-29: Protokoly, videá a ďalšie zdroje

1. Bunky HT-29: Pôvod a všeobecné informácie

Pred použitím akejkoľvek bunkovej línie by ste mali vedieť o všeobecných vlastnostiach a pôvode bunkovej línie. Táto časť vám pomôže získať tieto informácie: Čo sú bunky HT-29? Je HT-29 bunková línia kolorektálneho karcinómu? Aká je morfológia buniek HT-29?

Čo je bunková línia HT-29? HT-29 je bunková línia kolorektálneho adenokarcinómu, ktorú v roku 1964 vytvorili Trempe a Fogh. Bunky boli pôvodne odvodené z primárneho nádoru kaukazskej ženy (44 rokov) s kolorektálnym adenokarcinómom [1]. Od svojho vzniku sa táto bunková línia používa na štúdium biológie nádorových ochorení.

Morfológia buniek HT-29: Bunková línia HT-29 má vo všeobecnosti epitelovú morfológiu. Diferencované bunky rastú v monovrstvách, vytvárajú tesné bunkové spojenia a majú apikálny kartáčový okraj. Ak sa tieto bunky pestujú v prostredí s nedostatkom glukózy alebo sa im podávajú induktory, ako je butyrát alebo kyselina, vykazujú vlastnosti podobné enterocytom.

Veľkosť buniek: Priemer bunkovej línie kolorektálneho karcinómu HT-29 je 11 μm.

Genóm a ploidia: Počet chromozómov bunkovej línie HT-29 je 71. Môže sa pohybovať od 68 do 72. Okrem toho je racionálny počet chromozómov pre bunky HT-29 hypertriploidný, pričom zložka 2S sa vyskytuje vo výške 2,4 %.

Čo je HT29 MTX? HT29 MTX je bunková línia rezistentná na metotrexát izolovaná z pôvodnej bunkovej línie HT-29 ľudského karcinómu hrubého čreva adaptáciou na 10 µM metotrexát. Tieto bunky majú vlastnosti zrelých pohárikových buniek vylučujúcich hlien.

3. Bunky HT-29: Výhody a obmedzenia

Každá bunková línia má jedinečné výhody a nevýhody, ktoré ju odlišujú od iných bunkových línií. Táto časť sa zaoberá hlavnými výhodami a obmedzeniami súvisiacimi s bunkami HT-29.

Výhody

Hlavné výhody buniek HT-29 sú:

• Jednoduchá kultivácia

  S bunkovou líniou HT-29 sa ľahko manipuluje a udržiava, na jej kultiváciu nie sú kladené žiadne zložité požiadavky. Vo výskumných laboratóriách sa bežne kultivuje.

• In vitro model črevných buniek

  Bunky HT-29 sa môžu za špecifických kultivačných podmienok diferencovať na zrelé črevné bunky (enterocyty a bunky produkujúce hlien). Používajú sa ako bunkový model na štúdium trávenia a biologickej dostupnosti potravín.

• Vysoká účinnosť transfekcie

  Bunky rakoviny hrubého čreva HT-29 majú vysokú účinnosť transfekcie, vďaka čomu sú vhodné na štúdie génovej expresie a regulácie. Experimenty s prechodnou aj stabilnou transfekciou sa môžu vykonávať rôznymi metódami.

• Citlivosť na liečivá

  Bunky HT-29 sú citlivé na chemoterapeutiká, ako sú fluorouracil a oxaliplatina, ktoré sa bežne používajú pri liečbe rakoviny hrubého čreva. Používajú sa na štúdium rezistencie na lieky a skríning potenciálnych terapeutických liekov na kolorektálny karcinóm.

Obmedzenia

• Heterogenita

  Bunky HT-29, podobne ako iné rakovinové bunkové línie, vykazujú heterogenitu a nemusia tvoriť jednotnú bunkovú populáciu. To môže ovplyvniť reprodukovateľnosť výsledkov v určitých testoch a viesť k menším odchýlkam v experimentálnych výsledkoch.

• Obmedzená diferenciácia

  Bunky HT-29 majú obmedzený diferenciačný potenciál. Nediferencujú sa úplne na bunky čreva alebo hrubého čreva, ale vykazujú len niekoľko charakteristických znakov. Toto obmedzenie môže obmedziť ich použitie pri štúdiu zložitejších biologických procesov.

4. bunky HT-29: Použitie

Bunková línia HT-29 sa vo veľkej miere kultivuje vo výskumných laboratóriách vďaka širokému spektru jej aplikácií. Táto časť sa bude zaoberať len niekoľkými významnými aplikáciami buniek HT-29.

Výskum rakoviny: HT-29 je bunková línia kolorektálneho adenokarcinómu, preto sa používa na štúdium progresie rakoviny, jej vývoja a základných molekulárnych mechanizmov. V štúdii uskutočnenej v roku 2018 sa bunková línia HT-29 použila na skúmanie bunkových molekúl zodpovedných za metastázovanie. V tejto štúdii sa pozorovalo, že gény vimentínu a CXCR4 regulujú metastázovanie buniek. Zatiaľ čo transfekcia imitátora mikroRNA-193a-5p môže znížiť hladiny mRNA týchto génov a úspešne znížiť metastázovanie rakovinových buniek [2].

Toxikologický výskum: Bunková línia HT-29 sa vo veľkej miere používa v toxikologickom výskume. Tieto bunky kolorektálneho karcinómu sa používajú na hodnotenie toxicity rôznych kandidátov na lieky pomocou rôznych testov. Napríklad v štúdii sa skúmal potenciál toxicity etanolového extraktu rastliny Syzygium cumini na bunkovej línii HT-29. Výsledky ukázali významné potlačenie rastu buniek HT-29, čo naznačuje sľubné protirakovinové vlastnosti extraktu [3].

Mikrobiológia: HT-29 možno použiť ako hostiteľský bunkový systém na skúmanie patogenézy potenciálnych mikróbov, t. j. baktérií a vírusov. Výskumníci môžu infikovať bunky HT-29 mikróbmi a skúmať ich virulenciu a reakciu hostiteľa. V takejto štúdii sa použili bunky HT-29 na skúmanie probiotických vlastností baktérií mliečneho kvasenia [4]. V inej štúdii sa použili bunky HT-29 na hodnotenie účinnosti a bezpečnosti liečby bakteriofágmi [5].

5. Výskumné publikácie o bunkách HT-29

V tejto časti sa dozviete o niektorých významných publikáciách o bunkách HT-29, ktoré vám pomôžu pri vypracovaní vašej výskumnej štúdie.

Hodnotenie protinádorového účinku etanolového extraktu Syzygium cumini na kolorektálnu bunkovú líniu HT-29

Táto štúdia navrhla etanolový extrakt Syzygium cumini ako potenciálnu protirakovinovú látku proti bunkovej línii kolorektálneho karcinómu HT-29. Extrakt významne potláčal rast rakovinových buniek.

Tetrandrín inhibuje rast buniek karcinómu hrubého čreva HT-29 prostredníctvom Bcl-2/Caspase 3/PARP dráhy a G1/S fázy

V tejto publikácii v časopise Bioscience Reports sa testovala protirakovinová aktivita zlúčeniny tetradrín na bunkách HT-29. Výsledky odhalili, že tetrandrín inhibuje proliferáciu a rast rakovinových buniek prostredníctvom regulácie bunkových signálnych dráh.

mikroRNA-193a-5p inhibuje migráciu ľudských buniek rakoviny hrubého čreva HT-29 prostredníctvom potlačenia dráhy metastázovania

Táto štúdia navrhla, že miRNA-193a-5p môže potenciálne regulovať metastázovanie buniek HT-29 prostredníctvom regulácie génov súvisiacich s metastázovaním.

Bakteriofágy sú virulentnejšie pre baktérie s ľudskými bunkami ako v bakteriálnej kultúre; poznatky z buniek HT-29

Tento článok bol uverejnený v časopise Nature Scientific Reports v roku 2018. V tejto štúdii sa použila nádorová bunková línia HT-29 ako črevný bunkový model na vyhodnotenie účinnosti navrhovanej liečby bakteriofágmi.

Probiotické vlastnosti laktobacilov a ich schopnosť inhibovať adhéziu enteropatogénnych baktérií na bunky Caco-2 a HT-29

V tejto štúdii výskumníci použili bunky HT-29 na skúmanie probiotických aktivít baktérií mliečneho kvasenia. Zaujímavé je, že štúdia ukázala, že baktérie laktobacilov zabraňujú adhézii patogénnych baktérií na bunky hrubého čreva.

6. Zdroje buniek HT-29: Protokoly, videá a ďalšie zdroje

Táto časť sa zaoberá niektorými dostupnými online zdrojmi o bunkách HT-29, ktoré vám pomôžu naučiť sa ich udržiavanie, kultiváciu a transfekčné protokoly.

Protokoly kultivácie buniek

Nasledujúce zdroje vám poskytnú informácie o subkultivácii buniek HT-29.

• Kultivácia buniek HT-29: Tento odkaz poskytne základné poznatky o rastovom médiu, rozmrazovaní a subkultivácii buniek HT-29.
• Udržiavanie kultúr HT-29: Tento článok obsahuje všetky užitočné informácie o kultivácii a udržiavaní buniek HT-29.

Protokoly transfekcie

Bunková línia HT-29 má veľkú účinnosť transfekcie a často sa používa v štúdiách génovej expresie. Nasledujúce zdroje opisujú možné transfekčné protokoly pre tieto bunky.

• Transfekcia HT-29: Tento odkaz na webovú stránku obsahuje podrobný protokol transfekcie buniek HT-29.
• Transfekcia bunkovej línie HT-29: Tento dokument opisuje protokol transfekcie bunkovej línie HT-29 plazmidovou DNA.

Videá týkajúce sa bunkovej línie HT-29

Tu je niekoľko videí o kultivácii a udržiavaní tejto nádorovej bunkovej línie.

• Pasážovanie buniek: Toto video zobrazuje protokol pasážovania buniek pre adherentné bunkové línie.
• Transfekcia buniek HT-29: Toto video vás oboznámi s metódou transfekcie používanou pre bunky HT-29.

Očakávame, že informácie v tomto článku sú pre vás cenné a postačujúce pri manipulácii s bunkovou líniou HT-29 a jej udržiavaní. Ak plánujete použiť bunky HT-29 vo svojej štúdii, objednajte si ich u nás.

Odkazy

1. Martínez-Maqueda, D., B. Miralles a I. Recio, bunková línia HT29. Vplyv potravinových bioaktívnych látok na zdravie: modely in vitro a ex vivo, 2015: s. 113-124.
2. Shirafkan, N., et al. microRNA-193a-5p inhibuje migráciu ľudských buniek rakoviny hrubého čreva HT-29 prostredníctvom potlačenia dráhy metastázovania. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
3. Khodavirdipour, A., R. Zarean a R. Safaralizadeh, Evaluation of the anti-cancer effect of Syzygium cumini ethanolic extract on HT-29 colorectal cell line (Hodnotenie protinádorového účinku etanolového extraktu Syzygium cumini na kolorektálnu bunkovú líniu HT-29 ). Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: p. 575-581.
4. Fonseca, H.C., et al., Probiotické vlastnosti laktobacilov a ich schopnosť inhibovať adhéziu enteropatogénnych baktérií na bunky Caco-2 a HT-29. Probiotiká a antimikrobiálne proteíny, 2021. 13: p. 102-112.
5. Shan, J., a i., Bakteriofágy sú virulentnejšie pre baktérie s ľudskými bunkami ako v bakteriálnej kultúre; poznatky z buniek HT-29. Vedecké správy, 2018. 8(1): p. 5091.