Bunky HL-60: Základy výskumu akútnej myeloidnej leukémie
HL-60 je nesmrteľná ľudská leukemická bunková línia. Široko sa používa na štúdium biológie rakoviny a na skúmanie účinnosti protinádorových liekov. Okrem toho sa dá použiť aj na pochopenie rôznych bunkových a molekulárnych mechanizmov zapojených do proliferácie a diferenciácie leukemických buniek.
- Rastové médium
- Pozrite si stránku produktu
- Doba zdvojnásobenia
- Pozri stránku produktu
- Typ rastu
- Adherentný
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- BSL-1
- Dostupné od
- Cytion — Objednajte HL-60
- Bunková línia HL-60: Pôvod a všeobecné informácie
- Informácie o kultúre buniek HL-60
- Bunky HL-60: Výhody a nevýhody
- Využitie buneckej línie HL-60 vo výskume: Od rakoviny po imunológiu a ďalej
- Bunka HL-60 pre váš výskum
- Bunky HL-60: Vedecké publikácie
- Zdroje týkajúce sa buneckej línie HL-60: protokoly, videá a ďalšie
- Bunka HL-60: Dôležité otázky a odpovede pre výskumníkov
- Referencie
- Často kladené otázky
Bunka HL-60: Pôvod a všeobecné informácie
Bunková línia HL-60 slúži ako kľúčový model v hematologickom výskume a ponúka hlboký pohľad na povahu a liečbu akútnej promyelocytovej leukémie. Tento blogový príspevok sa zaoberá pôvodom a charakteristickými vlastnosťami bunkovej línie HL-60 a objasňuje jej kľúčovú úlohu v medicínskom výskume a vývoji liečebných metód.
HL-60 bola po prvýkrát izolovaná z leukemických buniek 36-ročnej ženy kaukazského pôvodu, u ktorej bola diagnostikovaná akútna promyelocytová leukémia. Túto priekopnícku prácu vykonal S.J. Collins a jeho tím, čo znamenalo významný prelom, keďže HL-60 bola prvou myeloidnou leukemickou bunkovou líniou, ktorú sa podarilo úspešne izolovať a kultivovať v suspenzii. Tento úspech umožnil množstvo výskumných príležitostí pri štúdiu leukémie a iných súvisiacich ochorení. Pokiaľ ide o fyzikálne charakteristiky, bunky HL-60 vykazujú lymfoblastickú morfológiu a je známe, že rastú v suspenzii, pričom majú guľatý tvar. Veľkosť týchto buniek sa líši, s priemerom v rozmedzí od 9 do 25 μm, čo odzrkadľuje ich heterogenitu. Na genomovej úrovni je bunková línia HL-60 prevažne pseudodiploidná, s modálnym počtom chromozómov 43. Zaujímavé je, že malé percento (6,2 %) buniek vykazuje 2S komponent, čo pridáva ďalšiu vrstvu zložitosti k ich genetickej výbave [1].
Porozumenie týmto základným aspektom buniek HL-60 nielenže rozširuje naše vedomosti o leukémii na bunkovej úrovni, ale tiež podporuje prebiehajúce výskumné úsilie zamerané na objavovanie nových spôsobov liečby. V nasledujúcich častiach sa budeme zaoberať tým, ako jedinečné vlastnosti buniek HL-60 prispeli k významnému pokroku v medicínskom výskume.
Informácie o kultivácii buniek HL-60
Kultivácia buniek HL-60 je jednoduchá a nenáročná. V tejto časti sa zoznámite so základnými informáciami, ako napríklad: Aká je doba zdvojnásobenia buniek buniek HL-60? Ide pri HL-60 o adhezívnu alebo suspenznú kultúru? Aká je hustota výsevu buniek HL-60? Aké médium sa používa na rast buniek HL-60?
Doba zdvojnásobenia:
Doba zdvojnásobenia buniek HL-60 je približne 36 až 48 hodín.
Adherentná alebo suspenzná kultúra:
Bunky HL-60 rastú ako suspenzné kultúry.
Hustota naočkovania:
Tieto bunky sa pri subkultivácii vysievajú v hustote 1 x 106 buniek/ml a pri založení novej kultúry v hustote 2 x 105 buniek/ml.
Rastové médium:
Na kultiváciu buniek HL-60 sa používa rastové médium RPMI 1640 s pridaním 10 % FBS a 2,5 mM L-glutamínu. Médium by sa malo obnovovať 2 až 3 krát týždenne.
Podmienky rastu:
Bunky HL-60 sa kultivujú v zvlhčenom inkubátore pri teplote 37 °C a prívode 5 % CO2.
Skladovanie:
Bunky HL-60 sa skladujú pri teplote pod -150 °C alebo v parnej fáze tekutého dusíka, aby sa zachovala maximálna životaschopnosť buniek.
Mrazivé médium a postup:
Na zmrazenie buniek HL-60 sa používajú zmrazovacie médiá CM-1 alebo CM-ACF. Pre zmrazenie buniek HL-60 sa uprednostňuje metóda pomalého zmrazenia.
Proces rozmrazovania:
Zmrazená fľaštička s bunkami HL-60 sa rýchlo premieša vo vodnom kúpeli nastavenom na teplotu 37 °C. Následne sa bunky odstreďujú, aby sa odstránilo mraziace médium. Pridá sa nové kultivačné médium a bunky sa resuspendujú, aby sa mohli naliať do fľaše na rast.
Úroveň biologickej bezpečnosti:
Pre manipuláciu s kultúrami HL-60 sa odporúča úroveň biologickej bezpečnosti 1.
Bunky HL-60: Výhody a nevýhody
Predtým, ako začnete pracovať s akoukoľvek bunkovou líniou, možno budete chcieť poznať jej výhody a nevýhody. Táto časť článku sa bude venovať niekoľkým kladom a zápory používania buniek HL-60.
Výhody
Medzi najvýznamnejšie výhody buneckej línie HL-60 patria:
- Všestrannosť: Bunky HL-60 majú schopnosť diferencovať sa na viacero typov buniek, vrátane monocytov, makrofágov a granulocytov, za vhodných podmienok rastu. Vďaka tomu sú užitočné pri štúdiu bunkovej diferenciácie a iných bunkových procesov.
- Ľahká kultivácia: Bunky HL-60 sa ľahko pestujú a udržiavajú v suspenzných kultúrach, čo z nich robí praktický nástroj na štúdium viacerých bunkových procesov.
- In vitro model leukémie: Tieto bunky boli získané od pacienta s akútnou myeloidnou leukémiou, a preto majú genetické a molekulárne charakteristiky podobné tejto chorobe.
Nevýhody
Nevýhody buneckej línie HL-60 sú:
- Obmedzený diferenciačný potenciál: HL-60 sa môže v reakcii na podnety diferencovať do niektorých myeloidných línií, ale ich diferenciačný potenciál je v porovnaní s primárnymi bunkami obmedzený.
Aplikácie buneckej línie HL-60 vo výskume: Od rakoviny po imunológiu a ďalej
Bunka HL-60, odvodená od pacienta s akútnou promyelocytovou leukémiou, sa stala základným kameňom medicínskeho výskumu vďaka svojej univerzálnosti a ľahkej kultivácii. Tieto kultúry s nízkymi nárokmi na údržbu sú kľúčové v nespočetných výskumných aplikáciách a našim cieľom je preskúmať niektoré z najvýznamnejších z nich, pričom zahrnieme širokú škálu kľúčových slov, aby sme poskytli komplexný prehľad.
Výskum rakoviny
V oblasti onkológie bola bunková línia HL-60 kľúčová pri odhaľovaní zložitostí signalizácie rakovinových buniek, pri posúvaní nášho chápania expresie onkogénov a pri urýchľovaní objavovania nových terapeutických cieľov. Táto bunková línia tvorí súčasť panelu leukemických bunkových línií používaných na skríning nových chemoterapeutických látok. Jedným z výstižných príkladov je použitie buniek HL-60 na overenie protileukemických vlastností zlúčenín extrahovaných z morských organizmov, ktoré odhalili ako antiproliferatívne, tak aj proapoptotické účinky [2]. Okrem toho táto bunková línia uľahčila skúmanie kľúčových signálnych dráh, ako je JAK/STAT, a ich vplyvu na proliferáciu leukemických buniek, ako aj hodnotenie terapeutického potenciálu bioaktívnych zlúčenín, ako je tymochinón [3].
Imunológia
Bunky HL-60 predstavujú robustný in vitro systém na skúmanie rôznych imunitných reakcií, vrátane komplexného procesu chemotaxie a regulácie expresie kľúčových imunitných mediátorov. Tieto bunky sa môžu diferencovať na myeloidné bunky podobné makrofágom a neutrofilom, čím slúžia ako univerzálny model na skúmanie zápalových dráh. Napríklad bunky podobné makrofágom odvodené z HL-60 boli použité na skúmanie protizápalového potenciálu fytochemikálií z rodu Brassica [4]. V inej štúdii diferenciácia buniek HL-60 na bunky podobné neutrofilom umožnila výskumníkom identifikovať gény kľúčové pre bunkovú diferenciáciu a súvisiace imunitné funkcie [5].
Objavovanie liekov
Schopnosti myeloidnej diferenciácie HL-60 sa tiež využili pri objavovaní liekov, najmä pri identifikácii kandidátov, ktorí by mohli potenciálne modulovať diferenciačnú dráhu, čo je kľúčové pri liečbe leukémie. Príkladom sú štúdie, ktoré použili bunkovú líniu HL-60 na hodnotenie protinádorového potenciálu prírodných produktov [6].
Okrem toho sa bunková línia HL-60 používa na štúdium rôznych aspektov biológie myeloidných buniek, napríklad na pochopenie toho, ako liečba látkami, ako je kyselina retinová, môže viesť k monocytovej diferenciácii, alebo ako tieto bunky napodobňujú primárne neutrofily pri tvorbe extracelulárnych pascí. Využitie tohto modelu pri objasňovaní molekulárnych udalostí hematologických malignít je ďalej rozšírené o jeho aplikáciu v štúdiách mutačných bunkových panelov, najmä v kontexte analýzy p53 hotspotov pri leukémii.
Pre tých, ktorí skúmajú bunkovú mechaniku, čas zdvojnásobenia HL-60 a ich reakciu na elektroporáciu v mikrofluidických kanáloch, ponúka táto bunková línia spoľahlivú platformu na výskum.
Bunka HL-60 pre váš výskum
Bunky HL-60: Vedecké publikácie
K dispozícii je niekoľko výskumných štúdií o bunkách HL-60. Tu uvádzame niekoľko významných príkladov:
Táto vedecká štúdia navrhla protinádorový účinok zlúčeniny Stigmast-5-en-3-ol na bunky leukémie HL-60 a bunky rakoviny prsníka MCF7.
Táto štúdia opisuje úlohu JAK/STAT signálnej dráhy v proliferácii buniek HL-60. Okrem toho výskumníci skúmajú terapeutický potenciál zlúčeniny tymochinónu s využitím tejto bunky leukémie. Zlúčenina inhibuje proliferáciu buniek a indukuje bunkovú smrť obnovením expresie negatívnych regulátorov JAK/STAT kaskády.
Táto štúdia využila bunky HL-60 na odvodenie modelu buniek podobných makrofágom na účely skúmania protizápalovej aktivity zlúčenín rastliny Brassica.
Táto štúdia uverejnená v časopise International Immunopharmacology vyvinula napodobeninu neutrofilných buniek z buneckej línie HL-60 pomocou dimetylsulfoxidu. Štúdia zistila, že gén ERK sa podieľa na diferenciácii týchto buniek.
Táto vedecká práca skúma protinádorový potenciál rastlinných polyfenolických zlúčenín, t. j. kyseliny galovej a ellagovej, na citlivé a rezistentné leukemické bunky HL-60.
Bunková línia HL-60 Zdroje: Protokoly, videá a ďalšie
K dispozícii je množstvo online vzdelávacích zdrojov o bunkovej línii HL-60. Táto sekcia sa venuje niekoľkým zdrojom, ktoré opisujú kultiváciu a transfekciu tejto bunkovej línie.
Protokoly kultivácie buniek
Zdroje popisujúce metódy kultivácie buniek HL-60 sú:
- Propagácia HL-60: Tento dokument poskytuje informácie o subkultivácii buniek HL-60.
- Bunková línia HL-60: Táto webová stránka obsahuje základné informácie o bunkách HL-60 a protokoloch, vrátane kultivácie, zmrazovania a rozmrazovania buniek.
Protokoly transfekcie
Tu sú niektoré zdroje opisujúce metódy transfekcie zvolené pre bunky HL-60.
- Transfekcia buniek HL-60: Tento odkaz obsahuje podrobný postup transfekcie pre leukemické bunky HL-60.
- Dočasná transfekcia buniek HL-60: Tento dokument obsahuje užitočné informácie o bunkovej línii a poskytuje podrobný protokol pre dočasnú transfekciu buniek HL-60.
Videá súvisiace s bunkovou líniou HL-60
Zdroje videí o bunkách HL-60 sú veľmi obmedzené.
- Pasážovanie buniek HL-60: Toto video vysvetľuje protokol subkultivácie buniek HL-60.
Očakávame, že tento článok vám poskytne základné informácie o kultivácii a udržiavaní buniek HL-60. Okrem toho môže rozšíriť vaše vedomosti o výhodách použitia týchto leukemických buniek vo výskume. Ak plánujete použiť túto bunkovú líniu, objednajte si ju u nás.
Bunková línia HL-60: Najdôležitejšie otázky a odpovede pre výskumníkov
Bunka HL-60 je bunka promyelocytovej leukémie získaná od pacienta s akútnou promyelocytovou leukémiou. Táto bunka sa vo veľkej miere využíva vo výskume na štúdium diferenciácie myeloidných buniek a expresie onkogénov.
Kyselina retinová indukuje diferenciáciu v bunkovej línii HL-60, čím podnecuje bunky k dozrievaniu do podoby buniek podobných granulocytom. Tento proces má kľúčový význam pre štúdium mechanizmov, ktoré sú základom myeloidnej diferenciácie.
Sérum je kľúčovou zložkou kultivačného média pre hematopoetické bunky, ktoré poskytuje dôležité rastové faktory a živiny potrebné na proliferáciu a udržanie buniek HL-60 v kultúre.
Áno, bunková línia HL-60 je schopná chemotaxie, čo je pohyb buniek v reakcii na chemické podnety. Vďaka tomu je táto línia vhodná na testovanie chemotaxie a na štúdium migrácie buniek.
Bunka HL60, ktorá vykazuje expresiu bunkových onkogénov, slúži ako modelový systém na skúmanie regulácie expresie onkogénov a ich úlohy pri vzniku leukémie.
Bunka HL-60 má neoceniteľný význam v štúdiách bunkovej biológie, najmä pri skúmaní bunkového cyklu, procesov bunkovej diferenciácie a molekulárnych javov, ktoré vedú k leukémii.
Súbory leukemických bunkových línií umožňujú porovnávacie štúdie rôznych leukemických bunkových línií, vrátane ich genetickej výbavy, mutačných profilov, reakcie na lieky a molekulárnych dráh podieľajúcich sa na vzniku leukémie, ako je napríklad dráha MAPK.
Certifikáty analýzy a pôvodu je zvyčajne možné stiahnuť alebo vyžiadať od dodávateľa či repozitára, ktorý poskytuje bunkovú líniu HL-60, čím sa zaručí, že výskumníci dostanú pre svoje štúdie overené bunky bez kontaminácie.
Bunky bunky HL-60 je možné diferencovať tak, aby nadobudli vlastnosti podobné primárnym neutrofilom, vrátane schopnosti vytvárať extracelulárne pasce, čo umožňuje výskumníkom využívať ich ako náhradný model na štúdium správania a funkcie neutrofilov.
Bunky HL-60 sa používajú ako in vitro model na štúdium akútnej promyelocytovej leukémie, biológie myeloidných buniek a vplyvu rôznych zlúčenín na diferenciáciu a proliferáciu. Využívajú sa tiež v experimentoch zameraných na skúmanie bunkových reakcií, ako je chemotaxia, expresia onkogénov a vplyv mutácií na bunkové procesy.
Skratka „HL-60“ znamená „Human Leukemia 60“. Označuje 60. bunkovú líniu, ktorá bola v čase jej vytvorenia izolovaná od pacientov s leukémiou. Skratka „HL“ poukazuje na to, že ide o bunky ľudskej leukémie.
Doba zdvojnásobenia buniek HL-60 je za optimálnych podmienok rastu približne 36 až 48 hodín. Môže sa však líšiť v závislosti od kultivačných podmienok a počtu pasáží buniek.
Keď sa bunky HL-60 ošetria forbol-12-myristát-13-acetátom (PMA), zvyčajne sa diferencujú na bunky podobné makrofágom alebo monocytom. Táto diferenciácia je súčasťou výskumu monocytárnych diferenciačných dráh a pochopenia mechanizmov diferenciácie myeloidných buniek.
Referencie
- Fleck, R., S. Romero-Steiner a M. Nahm, Použitie buneckej línie HL-60 na meranie opsonickej kapacity pneumokokových protilátok. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): s. 19-27.
- Fernando, I.S. a kol., Apoptotické a antiproliferatívne účinky Stigmast-5-en-3-olu z Dendronephthya gigantea na ľudské leukemické bunky HL-60 a ľudské bunky rakoviny prsníka MCF-7. Toxicology in Vitro, 2018. 52: s. 297-305.
- Almajali, B., et al., Tymochinón potláča bunkovú proliferáciu a zvyšuje apoptózu buniek leukémie HL60 prostredníctvom reexpresie negatívnych regulátorov JAK/STAT. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): s. 879.
- Ruiz-Alcaraz, A.J., et al., Analýza protizápalového potenciálu bioaktívnych zlúčenín rodu Brassica v modeli ľudských makrofágových buniek odvodených z buniek HL-60. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: s. 112804.
- Wang, D., et al., ERK sa podieľa na diferenciácii a funkcii buniek podobných neutrofilom HL-60 indukovaných dimetylsulfoxidom, ktoré napodobňujú zápalové neutrofily. International Immunopharmacology, 2020. 84: s. 106510.
- Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Protileukemická aktivita bioaktívnych zlúčenín pochádzajúcich z Brassica v myeloidných leukemických bunkách HL-60. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): s. 13400.