Bunky DLD-1: Aplikácie a poznatky o bunkách DLD-1 vo výskume kolorektálneho karcinómu

DLD-1 je bunková línia ľudského kolorektálneho karcinómu, ktorá sa bežne používa vo výskume rakoviny. Je cenným nástrojom na skúmanie rôznych aspektov rakoviny hrubého čreva vrátane vývoja nádoru, progresie, základných molekulárnych mechanizmov a reakcie na terapeutické látky. DLD-1 je preto výnimočná pri pochopení ochorenia a vývoji potenciálnych liečebných stratégií.

Tento článok poskytne dôležité informácie o bunkovej línii DLD-1, ktoré by ste mali vedieť pred prácou s ňou. Bude sa týkať:

Všeobecnú charakteristiku a pôvod buniek DLD-1
Informácie o kultivácii bunkovej línie DLD-1
Bunková línia DLD-1: Výhody a obmedzenia
Výskumné aplikácie bunkovej línie DLD-1
Výskumné publikácie o bunkách DLD-1
Zdroje pre bunkovú líniu DLD-1: Protokoly, videá a ďalšie zdroje informácií o DLD-1

1. Všeobecné charakteristiky a pôvod buniek DLD-1

Pred prácou s bunkovou líniou sa výskumník najprv zamyslí nad jej pôvodom a všeobecnými vlastnosťami. Táto časť článku je podrobným úvodom do bunkovej línie DLD-1. Bude sa zaoberať nasledujúcimi často kladenými otázkami: Čo sú bunky DLD-1? Čo je to rakovinová bunková línia DLD-1? Aké sú mutácie bunkovej línie DLD-1? Aká je veľkosť bunky DLD-1? Aká je morfológia buniek DLD-1?

DLD-1, bunková línia rakoviny hrubého čreva, pochádza z hrubého čreva 67-ročného muža s kolorektálnym adenokarcinómom. V rokoch 1977 - 1979 ju izoloval D. L. Dexter s kolegami. Táto bunková línia má rovnaký pôvod ako bunkové línie HCT-8, HCT-15 a HRT-18.
Podobne ako kolorektálny karcinóm, aj bunky DLD-1 majú fenotyp mikrosatelitnej nestability [1].
Mutácie DLD-1 zahŕňajú KRAS, P53, BRAF, BRCA1 a BRCA2. Vzhľadom na stav DLD-1 P53, DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2 a DLD-1 KRAS mutácie sa tieto bunky považujú za ideálne na štúdie rakoviny.
Tieto bunky majú morfológiu podobnú epitelu.
Veľkosť bunkovej línie DLD-1 je približne 15 µm.
Ľudská bunková línia kolorektálneho karcinómu DLD-1 má pseudodiploidný karyotyp. Približne 86 % buniek má modálne číslo chromozómu 46. Avšak polyploidia sa môže vyskytovať aj u 17,1 % bunkovej populácie.

3D zobrazenie CT kolonografie alebo CT hrubého čreva zobrazené na obrazovke na diagnostiku rakoviny hrubého čreva, rakoviny hrubého čreva a kolorektálneho karcinómu.

2.informácie o kultivácii bunkovej línie DLD-1

Pred kultiváciou akejkoľvek bunkovej línie musíte poznať jej základné požiadavky na kultiváciu. Táto časť upozorňuje na dôležité body, ktoré sa musíte naučiť pred začatím práce s bunkovou líniou DLD-1. Patria sem: Čo je to zdvojovací čas DLD-1? Čo je kultivačné médium DLD-1? Aká je hustota výsevu buniek DLD-1? Ako sa kultivujú bunky DLD-1?

Kľúčové body pre kultiváciu buniek DLD-1

Čas zdvojnásobenia:	Čas zdvojenia buniek DLD-1 je približne 15 hodín.
Adherentné alebo v suspenzii:	DLD-1 je adherentná línia ľudských buniek rakoviny hrubého čreva. Bunky rastú do monovrstvy.
Hustota výsevu:	Hustota výsevu buniek DLD-1 je 1 až 2 x¹⁰⁴ ^buniek/cm2. Adherentné bunky sa premyjú 1 x fosfátovým tlmivým roztokom (PBS) a inkubujú sa s pasážovacím roztokom (Accutase) pri teplote okolia. Po inkubácii trvajúcej 8 až 10 minút sa oddelené bunky pridajú do kultivačného média a odstredia sa. Pelet buniek sa potom opatrne resuspenduje a bunky sa prelejú do nových kultivačných nádob obsahujúcich rastové médium.
Rastové médium:	Na kultiváciu buniek DLD-1 sa používa RPMI 1640 s doplnkami média vrátane 10 % fetálneho hovädzieho séra FBS, 2,1 mM stabilného glutamínu a 2,0 g/l NaHCO3. Médium by sa malo vymieňať 2 - 3-krát týždenne.
Rastové podmienky:	DLD-1 kultúry sa udržiavajú vo zvlhčenom inkubátore pri 37 °C s prívodom 5 % CO2.
Skladovanie:	Bunky DLD-1 sa skladujú v parnej fáze tekutého dusíka alebo v elektrickej mrazničke s veľmi nízkou teplotou (pri teplote nižšej ako -150 °C).
Proces zmrazovania a médium:	Na zmrazenie buniek DLD-1 sa môže použiť zmrazovacie médium CM-1 alebo CM-ACF. Vždy sa odporúča pomalý proces zmrazovania, ktorý umožňuje postupné znižovanie teploty o 1 °C, čím sa zabráni šoku buniek a ochráni sa ich životaschopnosť.
Proces rozmrazovania:	Zmrazené bunky sa rozmrazujú vo vodnom kúpeli nastavenom na teplotu 37 °C počas 40 až 60 sekúnd, kým nezostane malý ľadový chumáč. Potom sa bunky pridajú do čerstvého média a odstredia sa. Tento krok je potrebný na odstránenie zložiek zmrazovacieho média z buniek. Odobraté bunky sa resuspendujú v rastovom médiu a dávkujú sa do banky na rast.
Úroveň biologickej bezpečnosti:	Bunková línia DLD-1 sa udržiava v laboratóriách s úrovňou biologickej bezpečnosti 1.

Bunky DLD-1 pozorované pri 10-násobnom a 20-násobnom zväčšení, ktoré odhaľuje ich charakteristickú epitelovú morfológiu.

3.bunková línia DLD-1: Výhody a obmedzenia

V tejto časti článku sa budeme venovať výhodám a obmedzeniam bunkovej línie DLD-1 pre rakovinu hrubého čreva.

Výhody

Hlavné výhody bunkovej línie DLD-1 sú:

Model kolorektálneho karcinómu	Bunky DLD-1 majú mutácie, ktoré sa bežne vyskytujú u pacientov s kolorektálnym karcinómom, napríklad mutáciu KRAS v DLD-1, BRCA v DLD-1 a BRCA2 v DLD-1. Vďaka tomuto významu sú klinicky vhodným bunkovým modelom na štúdium tohto ochorenia.
Nádorová bunková línia	Bunky DLD-1 sú nádorové. Po injekčnom podaní nahým myšiam môžu spôsobiť nádory. Preto výskumníci využívajú tieto bunky na vývoj xenotransplantačných nádorových modelov, ktoré pomáhajú skúmať tvorbu, vývoj a progresiu nádorov in vivo.

Obmedzenia

S bunkami DLD-1 sú spojené tieto obmedzenia:

Heterogenita

Populácie buniek rakoviny hrubého čreva DLD-1 vykazujú genetickú a fenotypovú heterogenitu. To môže ovplyvniť zovšeobecnenie výsledkov výskumu.

4.výskumné aplikácie bunkovej línie DLD-1

Bunková línia DLD-1 ponúka celý rad aplikácií vo výskume rakoviny. Niektoré významné aplikácie sú uvedené v tejto časti.

Štúdium rakoviny: DLD-1 bunky slúžia ako cenný in vitro model na pochopenie molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom rastu, vývoja a progresie kolorektálneho karcinómu. Okrem toho sa používajú na štúdium expresie génov, signálnych dráh a vplyvu špecifických genetických mutácií na správanie rakovinových buniek. Vo výskume uskutočnenom v roku 2022 sa zistilo, že signálna kaskáda PI3K/Akt/YAP reguluje migráciu a inváziu bunkovej línie kolorektálneho karcinómu DLD-1 [2].
Vývoj liekov: Výskumníci využívajú bunkovú líniu DLD-1 na testovanie účinnosti protinádorových liekov a hodnotenie ich potenciálu na liečbu rakoviny hrubého čreva. To pomáha pri vývoji liekov a účinnom boji proti ochoreniu. V štúdii uskutočnenej v roku 2022 sa použila rakovinová bunková línia DLD-1 a skúmala sa protirakovinová aktivita kremíkových ftalokyanínov, chemicky syntetizovaných zlúčenín. Výsledky štúdie naznačili, že tieto zlúčeniny sú silnými protirakovinovými látkami [3]. Zaujímavé je, že ďalší výskum zistil protinádorový potenciál proteínu P8 odvodeného od probiotika s použitím buniek DLD-1 [4].

430,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní plus náklady na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 300220

5.výskumné publikácie o bunkách DLD-1

Táto časť upozorňuje na niekoľko zaujímavých a často citovaných publikácií, ktoré sa týkajú bunkovej línie karcinómu hrubého čreva DLD-1.

Flavonoidný glykozid diosmín indukuje apoptózu a zastavenie bunkového cyklu v bunkovej línii ľudského karcinómu hrubého čreva DLD-1

Táto publikácia sa nachádza v časopise Journal of Biologically Active Products from Nature (2022). V štúdii sa zistilo, že flavonoid diosmín indukuje bunkovú smrť v bunkách DLD-1 a spôsobuje aj zastavenie bunkového cyklu; môže byť teda potenciálnym protirakovinovým činidlom.

Bromelaín účinne potláča Kras-mutantný kolorektálny karcinóm stimuláciou feroptózy

Táto štúdia v časopise Animal Cells and Systems (2018) navrhla, že enzým bromelaín potláča mutáciu KRAS v DLD-1 a má silné cytotoxické účinky.

Bergapten indukuje zastavenie G1 a proapoptotickú kaskádu v bunkách kolorektálneho karcinómu v spojení s osou p53/p21/PTEN

Tento výskumný článok bol uverejnený v roku 2019 v časopise "Environmental Toxicology". V štúdii sa skúmali protinádorové účinky prírodnej zlúčeniny Bergapten s použitím bunkovej línie DLD-1 kolorektálneho karcinómu.

Ekologicky šetrná výroba kompozitu nanokurkumín/nanooxid železa: Zvýšená protinádorová aktivita in vitro proti bunkovým líniám DLD-1

Táto štúdia v časopise Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) zistila, že nanokompozity kurkumín/oxid železa sú vysoko účinné proti bunkám kolorektálneho karcinómu DLD-1.

Epibrassinolid aktivuje AKT na spustenie autofágie s polyamínovým metabolizmom v bunkových líniách rakoviny hrubého čreva SW480 a DLD-1

Tento výskumný článok bol uverejnený v roku 2020 v časopise Turkish Journal of Biology. Štúdia navrhla, že prírodný produkt, epibrassinolidom sprostredkovaná aktivácia AKT v bunkách DLD-1, stimuluje autofágiu súvisiacu s polyamínmi.

6.zdroje pre bunkovú líniu DLD-1: Protokoly, videá a ďalšie zdroje

Nasleduje niekoľko zdrojov o bunkách DLD-1:

DLD-1 transfekcia: Tento videonávod je komplexným sprievodcom protokolom transfekcie DLD-1 in vitro.
Bunky DLD-1: Tento výskumný dokument stručne opisuje požiadavky na kultiváciu buniek DLD-1 vrátane médií a podmienok kultivácie. Okrem toho vám môže pomôcť naučiť sa transfekčný protokol používaný pre bunky DLD-1.

Nasledujúce odkazy obsahujú protokol kultivácie DLD-1, buniek rakoviny hrubého čreva odvodených od človeka.

Bunková línia DLD-1: Táto webová stránka poskytuje základné informácie o bunkovej línii DLD-1. Pomôže vám naučiť sa rôzne protokoly kultivácie buniek DLD-1 vrátane subkultivácie a manipulácie s kryokonzervovanými a proliferujúcimi kultúrami.

Odkazy

Gavrilas, L.I., et al., Pro-apoptotické gény ako nové ciele pre samostatnú a kombinovanú liečbu resveratrolom a kurkumínom pri kolorektálnom karcinóme. Food & function, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
Takeda, T., et al. signalizácia PI3K/Akt/YAP podporuje migráciu a inváziubuniek kolorektálneho karcinómu DLD-1. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
Farajzadeh, N., et al., Anticancer activity of novel silicon phthalocyanines against the colorectal adenocarcinoma cell line (DLD-1) (Protinádorová aktivita nových kremíkových ftalocyanínov proti bunkovej línii kolorektálneho adenokarcinómu (DLD-1) ). New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
An, B.C., et al. protirakovinová úloha probiotického proteínu P8 v bunkovej línii kolorektálneho karcinómu DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): p. 9857.