Bunky BEAS-2B – Bunky BEAS-2B vo výskume respiračných ochorení: Komplexný sprievodca
BEAS-2B je imortalizovaná a netumorigénna ľudská epitelová bunková línia pľúc. Je to široko používaný in vitro model na štúdium reakcie pľúcnych buniek na rôzne karcinogény a toxické látky. Okrem toho je to cenný výskumný nástroj na štúdium rôznych respiračných infekcií a ochorení, ako je COVID-19 a karcinómy pľúc.
- Rastové médium
- Na kultiváciu pľúcnej bunky BEAS-2B sa používa médium BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium) obsahujúce 10 % fetálneho bovinného séra. Médium by sa malo vymieňať každé 2 až 3 dni.
- Doba zdvojnásobenia
- Doba zdvojnásobenia populácie BEAS-2B je približne 26 hodín.
- Typ rastu
- BEAS-2B je epitelová adhezívna bunková línia.
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- BSL-1
- K dispozícii od
- Cytion — Objednajte si BEAS-2B
V tomto článku budeme diskutovať takmer všetky aspekty pľúcnej bunky BEAS-2B, vrátane jej pôvodu, informácií o kultivácii buniek, výhod, nevýhod a aplikácií vo výskume. Konkrétne sa budeme venovať:
- Pôvod a všeobecné charakteristiky buniek BEAS-2B
- Bunka BEAS-2B: Informácie o kultivácii
- Výhody a nevýhody buniek BEAS-2B
- Využitie bunkovej línie BEAS-2B vo výskume
- Bunky BEAS-2B: Vedecké publikácie
- Protokoly kultivácie buniek
1. Pôvod a všeobecné charakteristiky buniek BEAS-2B
Prvá vec, na ktorú sa pri bunkovej línii zameriavate, je jej pôvod a všeobecné charakteristiky. V tomto článku sa dozviete o hlavných vlastnostiach a pôvode ľudských bronchiálnych epitelových buniek BEAS-2B. Dozviete sa: Čo je bunková línia pľúc BEAS-2B? Aký typ buniek je Beas 2B? Aký je pôvod buniek BEAS-2B?
- BEAS-2B, bunková línia bronchiálneho epitelu, bola vyvinutá z nerakovinového ľudského pľúcneho tkaniva v roku 1988 skupinou Curtisa C. Harrisa [1].
- Bunky BEAS-2B majú morfológiu podobnú epitelu.
HBEpC vs. BEAS-2B
HBEpC sú primárne bunky ľudského bronchiálneho epitelu. Podobne ako BEAS-2B sú to normálne ľudské bronchiálne epitelové bunky. V porovnaní s imortalizovanými bunkami BEAS-2B majú však obmedzenú životnosť. Obe bunkové línie sa dajú použiť na štúdium pľúcnej biológie, toxikológie a modelovania chorôb.
Bunka BEAS-2B: Informácie o kultivácii
Informácie o kultivácii buniek z danej bunky vám môžu uľahčiť prácu s ňou. V tejto časti článku sa dozviete všetky základné informácie o kultivácii pľúcnej bunky BEAS-2B. Zistíte najmä: Aký je čas zdvojnásobenia buniek BEAS-2B? Čo je médium BEAS-2B? Je bunková línia BEAS-2B adhezívna? Ako sa kultivujú bunky BEAS-2B?
Kľúčové body pre kultiváciu buniek BEAS-2B
Doba zdvojnásobenia:
Doba zdvojnásobenia populácie BEAS-2B je približne 26 hodín.
Adherentná alebo v suspenzii:
BEAS-2B je epitelová adhezívna bunková línia.
Hustota buniek:
Odporúčaná hustota buniek pre bunkovú líniu BEAS-2B je 1 až 2 × 104 buniek/cm2. Adherentné bunky BEAS-2B sa prepláchnu fosfátovým pufrom a inkubujú sa s Accutase pri izbovej teplote niekoľko minút. Po disociácii buniek sa pridá čerstvé médium a bunky sa zozbierajú centrifugáciou. Zozbierané bunky sa opatrne resuspendujú a nalia sú do novej fľaše na rast.
Rastové médium:
Na kultiváciu pľúcnej bunky BEAS-2B sa používa médium BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium) obsahujúce 10 % fetálneho bovinného séra. Médium by sa malo vymieňať každé 2 až 3 dni.
Podmienky rastu:
Kultúra BEAS-2B sa udržiava pri teplote 37 °C vo zvlhčenom inkubátore s nepretržitým prívodom 5 % CO2.
Skladovanie:
Mrazené fľaštičky s bunkami BEAS-2B možno skladovať vo fáze pary tekutého dusíka alebo v elektrickom mrazničke pri teplote nižšej ako -150 °C.
Proces zmrazovania a médium:
Na zmrazenie pľúcnej bunky BEAS-2B sa používajú zmrazovacie médiá CM-1 alebo CM-ACF. Bunky sa zmrazujú tak, že sa teplota znižuje len o 1 °C za minútu, aby sa zachovala životaschopnosť buniek. Tento typ metódy sa nazýva pomalé zmrazenie.
Proces rozmrazovania:
Zmrazené alebo kryokonzervované kultúry BEAS-2B sa rozmrazujú vo vodnom kúpeli s teplotou 37 °C obsahujúcom antimikrobiálne činidlo po dobu 40 až 60 sekúnd. Následne sa do buniek pridá médium a môžu sa priamo kultivovať v nových fľašiach alebo sa môžu odstrediť, aby sa odstránili zložky mraziaceho média. Potom sa zozbierané bunky resuspendujú a kultivujú. V prvom prípade sa mraziace médium odstráni po 24 hodinách.
Úroveň biologickej bezpečnosti:
Na manipuláciu s kultúrami BEAS-2B sú potrebné laboratóriá s úrovňou biologickej bezpečnosti 1.
Výhody a nevýhody buniek BEAS-2B
Rovnako ako iné bunkové línie, aj bunky BEAS-2B majú svoje výhody a nevýhody. Niektoré z nich sú uvedené nižšie.
Výhody
Medzi výhody buneckej línie BEAS-2B patria:
Imortalizovaná bunková línia
Ľudská bronchiálna epitelová bunková línia BEAS-2B bola imortalizovaná. Preto pokračuje v raste bez toho, aby vstúpila do fázy senescencie. Táto charakteristika buniek BEAS-2B eliminuje potrebu opakovaného získavania primárnych ľudských pľúcnych epitelových buniek s kratšou životnosťou.
Ľahká kultivácia
Kultúry BEAS-2B sa ľahko udržiavajú. Bunky bez problémov rastú a rozmnožujú sa za štandardných kultivačných podmienok. Neexistujú žiadne náročné alebo zložité požiadavky na kultiváciu buniek.
Ľudský pôvod
Bunka BEAS-2B má ľudský pôvod a relevanciu. Je teda ideálnym in vitro modelom na štúdium reakcií, správania a procesov epitelových buniek ľudských dýchacích ciest.
Nevýhody
Nevýhody spojené s pľúcnou bunkovou líniou BEAS-2B sú:
Transformované ľudské pľúcne epitelové bunky
Bunky BEAS-2B sú transformované vírusom Ad12-SV40 2B, čo môže zmeniť ich správanie a reakcie v porovnaní s pôvodnými bronchiálnymi epitelovými bunkami pochádzajúcimi z ľudského pľúcneho tkaniva.
Aplikácie bunkovej línie BEAS-2B vo výskume
Bunka BEAS-2B ponúka viacero možností využitia v biomedicínskom výskume. Niektoré bežné využitia buniek BEAS-2B sú:
- Toxikológia: Bunky BEAS-2B sa často používajú na skúmanie genotoxicity a cytotoxicity rôznych toxínov, environmentálnych znečisťujúcich látok a chemikálií. Výskumníci využívajú túto bronchiálnu epitelovú bunkovú líniu na hodnotenie škodlivých účinkov týchto látok na zdravie pľúc. Okrem toho študujú aj základné molekulárne mechanizmy. Napríklad štúdia vykonaná v roku 2021 hodnotila toxicitu kadmia v bunkovej línii BEAS-2B. Výsledky výskumu odhalili, že kadmium indukovalo bunkovú smrť a poškodenie mitochondrií v pľúcnej bunkovej línii BEAS-2B prostredníctvom modulácie signálnej dráhy MAPK [2]. Iná štúdia použila bunkovú líniu BEAS-2B na hodnotenie toxicity nanočastíc oxidu zinočnatého v podmienkach oxidačného stresu [3].
- Modelovanie respiračných ochorení: Bunková línia BEAS-2B je skvelým výskumným nástrojom a in vitro modelom na štúdium respiračných ochorení, ako je chronická obštrukčná pľúcna choroba (COPD), astma, rakovina pľúc a vírusové infekcie, ako je SARS-CoV-2. Výskumníci majú tendenciu vyvolávať stavy súvisiace s ochorením v bunkovej línii BEAS-2B a študovať základné bunkové a molekulárne mechanizmy. To pomáha identifikovať potenciálne ciele liekov a vyvíjať personalizované terapie. Výskum vykonaný v roku 2022 použil bunkovú líniu BEAS-2B a študoval úlohu estrogénu a jeho receptorov pri infekcii SARS-CoV-2. Zistenia odhalili, že vyššia expresia estrogénového receptora GPER1 znižuje vírusovú záťaž BEAS-2B SARS-CoV-2. Preto sa môže podieľať na vírusovej infekcii alebo replikácii SARS-CoV-2 [4].
5. Bunky BEAS-2B: Vedecké publikácie
Nižšie sú uvedené niektoré zaujímavé a najčastejšie citované výskumné štúdie zaoberajúce sa bunkami BEAS-2B.
Toxicita grafenu v normálnych ľudských pľúcnych bunkách (BEAS-2B)
Táto štúdia bola uverejnená v roku 2011 v časopise Journal of Biomedical Nanotechnology. Výskum naznačil, že oxid grafitu indukuje apoptózu a cytotoxicitu v normálnej línii bronchiálnych epitelových buniek (BEAS-2B).
Tento výskumný článok bol uverejnený v časopise Journal of Microbiology and Biotechnology (2014). Táto štúdia skúmala terapeutický potenciál naringenínu, flavonoidu, v bunkovej línii BEAS-2B. Zistenia naznačujú, že naringenín chráni pľúcne bunky BEAS-2B pred toxicitou vyvolanou paraquatom alebo oxidačným poškodením.
Táto štúdia bola uverejnená v časopise Inhalation Toxicology (2011). V nej výskumníci hodnotili toxický účinok magnetických nanočastíc s amorfnými povlakmi z oxidu kremičitého na bunkovú líniu BEAS-2B in vitro.
Tento článok v časopise Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) navrhuje, že kyselina ursodeoxycholová môže brániť abnormálnej migrácii epitelových buniek dýchacích ciest a zabrániť poškodeniu spôsobenému interakciou proteínu spike SARS-CoV-2 a ACE-2. Môže tak pomôcť obnoviť bazálnu vrstvu epitelu.
Vplyv radónu na apoptózu indukovanú miR-34a v ľudských bronchiálnych epitelových bunkách BEAS-2B
Táto štúdia bola uverejnená v roku 2019 v časopise Journal of Toxicology and Environmental Health. Výsledky výskumu uvádzajú, že chronická expozícia radónu môže podporovať karcinogenézu v ľudských bronchiálnych epitelových bunkách (BEAS-2B) aktiváciou mikroRNA-34a.
Protokol kultivácie buniek
Protokol kultivácie buniek BEAS-2B je uvedený tu.
- Subkultivácia BEAS-2B: Tento dokument vám pomôže zoznámiť sa s médiami BEAS-2B a postupmi subkultivácie.
- Bunka BEAS-2B: Táto webová stránka obsahuje všetky základné informácie, ktoré potrebujete na začatie práce s bunkovou líniou BEAS-2B, vrátane jej médií a protokolov na manipuláciu s proliferujúcimi a kryokonzervovanými kultúrami.
Referencie
- Han, X., et al., Ľudské pľúcne epitelové bunky BEAS-2B vykazujú charakteristiky mezenchýmových kmeňových buniek. PLoS One, 2020. 15(1): s. e0227174.
- Cao, X., et al., Kadmium indukovalo apoptózu buniek BEAS-2B a poškodenie mitochondrií prostredníctvom signálnej dráhy MAPK. Chemosphere, 2021. 263: s. 128346.
- Heng, B.C., et al., Toxicita nanočastíc oxidu zinočnatého (ZnO) na ľudské bronchiálne epitelové bunky (BEAS-2B) je zvýraznená oxidačným stresom. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): s. 1762-1766.
- Costa, A.J., et al., Nadmerná expresia estrogénového receptora GPER1 a liečba G1 znižuje infekciu SARS-CoV-2 v bronchiálnych bunkách BEAS-2B. Molecular and Cellular Endocrinology, 2022. 558: s. 111775.