Bunky B16-F10 - skúmanie bunkovej línie melanómu B16-F10 vo výskume metastáz

BunkyB16-F10 predstavujú melanómovú bunkovú líniu získanú z myší C57BL/6J. Široko sa používajú vo výskume rakoviny kože. Výskumníci používajú tieto bunky na štúdium vývoja a progresie nádorov a terapeutických zásahov. Tento článok sa zaoberá základnými aspektmi melanómových buniek B16-F10. Zahŕňa najmä:

Pôvod a všeobecné charakteristiky bunkovej línie B16-F10
Informácie o kultivácii buniek B16-F10
Bunky B16-F10: Výhody a nevýhody
Výskumné aplikácie buniek B16-F10
Publikácie, v ktorých je uvedená línia buniek B16-F10
Zdroje pre bunkovú líniu B16-F10: Protokoly, videá a ďalšie zdroje

1. Pôvod a všeobecné charakteristiky bunkovej línie B16-F10

Táto časť vám poskytne informácie o pôvode a charakteristických vlastnostiach nádorových buniek melanómu B16F10. Pomôže vám efektívne používať túto bunkovú líniu vo vašej výskumnej práci. Dozviete sa najmä: Čo sú bunky B16-F10? Z čoho je B16F10 odvodená? Aká je morfológia bunkovej línie B16F12? Aká je veľkosť buniek B16F10?

B16-F10 je subklon nádorovej bunkovej línie B16 odvodenej z kožného tkaniva myší C57BL/6J. V tomto prípade boli melanómové bunky B16F10 vyvinuté po intravenóznej injekcii línie B16 do imunokompromitovaných alebo syngenetických myší. Tieto bunky boli vybrané pre ich potenciál tvoriť metastázujúce pľúcne kolónie in vivo a potom sa vytvorili po desiatich cykloch tvorby pľúcnych kolónií in vitro [1]. Vyvinul ju Fidler a jeho kolegovia v roku 1976.
Bunkové línie B16-F10 majú epitelový a vretenovitý vzhľad.
Približná veľkosť buniek B16-F10 je 15,4 ± 1,4 μm [2].

Bunky B16-F1 a B16-F10

Bunky B16-F1 a B16-F10 boli odvodené z materskej bunkovej línie B16. Obe vznikli v rovnakom a majú takmer podobné vlastnosti. Hlavným rozdielom je však ich metastatická schopnosť. Bunky B16-F10 majú vysoký, zatiaľ čo B16-F1 nízky metastatický potenciál [3].

Silne zväčšený prierez nádoru malígneho melanómu pod mikroskopom.

2.informácie o kultivácii buniek B16-F10

Pred manipuláciou s bunkovou líniou a jej kultiváciou musíte poznať jej zdvojovací čas, rastové médiá, podmienky a protokoly kultivácie buniek. V tejto časti sa bude diskutovať o: Aký je čas zdvojenia buniek b16-f10? Ako sa kultivujú bunky B16F10? Aké sú médiá pre bunky B16-F10? Aké podmienky kultivácie sa odporúčajú pre bunky B16-F10?

Kľúčové body pre kultiváciu buniek B16-F10

Čas zdvojnásobenia:	Čas zdvojenia buniek B16-F10 je približne 20,1 hodiny. V závislosti od podmienok kultivácie sa môže pohybovať od 17 do 21 hodín.
Adherentné alebo v suspenzii:	B16-F10 je adherentná bunková línia. Bunky rastú rýchlo a vytvárajú monovrstvy.
Pomer rozdelenia:	Bunky B16-F10 sa subkultivujú v pomere 1:2 až 1:4. Bunky sa premyjú fyziologickým roztokom fosfátového pufra (1x) a potom sa inkubujú s pasážovacím roztokom Accutase 8 až 10 minút pri teplote okolia. Bunky sa doplnia čerstvým médiom a odstredia sa. Zozbieraný bunkový pelet sa opäť resuspenduje a bunky sa rozmiestnia do novej banky obsahujúcej čerstvé kultivačné médium podľa pomeru rozdelenia.
Rastové médium:	Bunky B16-F10 sa kultivujú v médiu DMEM. Médium je doplnené 10 % FBS, 4 mM L-glutamínom, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L glukózy a 1,0 mM pyruvátom sodným pre ideálny rast buniek. Médium by sa malo vymieňať 2 až 3-krát týždenne.
Podmienky rastu:	Bunky B16-F10 sa pestujú vo zvlhčenom inkubátore pri teplote 37 °C s prívodom 5 % CO2.
Skladovanie:	Zmrazené bunky sa skladujú pri teplote nižšej ako -150 °C v elektrickej mrazničke s veľmi nízkou teplotou alebo v parnej fáze tekutého dusíka, aby sa zachovala životaschopnosť buniek.
Proces zmrazovania a médium:	Bunky B16-F10 sa na skladovanie zmrazujú v médiu CM-1 alebo CM-ACF. Na tento účel sa odporúča pomalý proces zmrazovania, ktorý umožňuje pokles teploty len o 1 °C za minútu, aby sa zabránilo akémukoľvek šoku buniek.
Proces rozmrazovania:	Zmrazené bunky B16-F10 sa rozmrazujú v prednastavenom vodnom kúpeli s teplotou 37 °C počas 40 až 60 sekúnd. Potom sa bunky pridajú do čerstvého média a odstredia sa, aby sa odstránili zložky zmrazovacieho média. Zozbierané bunky sa resuspendujú v rastovom médiu a nalejú sa do fliaš na kultiváciu.
Úroveň biologickej bezpečnosti:	Na manipuláciu s bunkovou líniou B16-F10 a jej udržiavanie sa vyžaduje laboratórium s úrovňou biologickej bezpečnosti 1.

Polokonfluentné bunky B16-F10 pri 20-násobnom a 10-násobnom zväčšení.

3.bunky B16-F10: Výhody a nevýhody

Podobne ako iné bunkové línie, aj B16-F10 vykazuje určité výhody a nevýhody. V tejto časti sú opísané niektoré významné výhody a nevýhody tejto bunkovej línie melanómu kože.

Výhody

Bunková línia B16-F10 sa široko používa vo výskume rakoviny. Výhody buniek B16-F10 sú:

Metastatický potenciál	Bunky kožného melanómu B16F10 vykazujú vysoký metastatický potenciál, vďaka čomu sú cenné na štúdium metastáz rakoviny a základných mechanizmov.
Model nádoru in vitro	Bunky B16-F10 slúžia ako in vitro model na štúdium progresie a rastu rakoviny, čo pomáha výskumníkom pochopiť bunkové a molekulárne mechanizmy, ktoré sú príčinou rakoviny.

Nevýhody

Nevýhody spojené s bunkovou líniou B16-F10 sú:

Bunková línia odvodená od myši

B16-F10 je bunková línia odvodená od myší, čo obmedzuje jej použiteľnosť na štúdie špecifické pre človeka. Výskumné zistenia z týchto buniek sa nemusia vždy skutočne prejaviť v ľudskej biológii.

4.výskumné aplikácie buniek B16-F10

Bunková línia B16-F10 sa vo veľkej miere používa vo výskume rakoviny. Tu sa uvádza niekoľko sľubných aplikácií tejto bunkovej línie.

Výskum rakoviny: Bunková línia B16-F10 je cenným modelom na štúdium procesov rakovinových buniek vrátane proliferácie, invázie, migrácie a bunkovej smrti alebo apoptózy. Okrem toho pomáha výskumníkom získať prehľad o molekulárnych mechanizmoch a dráhach, ktoré riadia tieto bunkové procesy. V štúdii uskutočnenej v roku 2018 sa skúmala úloha CCR5 (C-C chemokínový receptor typu päť) pri prechode epitelových buniek melanómu na mezenchymálne bunky a pri metastázovaní. Výsledky odhalili, že nedostatok CCR5 obmedzuje rast a metastázovanie nádorov, zatiaľ čo vysoká expresia vedie k zvýšenému rastu a metastázovaniu buniek B16-F10. V ďalšom výskume sa uvádza, že CCR5 reguluje expresiu TGFβ1, ktorý reguluje signalizáciu PI3K/AKT/GSK3β na podporu prechodu epitelu na mezenchým a migrácie buniek [4].
Testovanie a vývoj liekov: Nádorové bunky melanómu B16F10 sú veľmi agresívne, a preto sú vhodné na testovanie potenciálnych protinádorových liekov a liečby. Výskumníci využívajú tieto bunky a hodnotia účinok rôznych zlúčenín na rast, proliferáciu a metastázovanie buniek, čo napomáha vývoju liekov. Štúdia, ktorú v roku 2018 uskutočnila Valentina Nanni s kolegami, skúmala terapeutické účinky hydroalkoholového extraktu z kvetov Spartium junceum . Štúdia navrhla, že extrakt z kvetov bol účinný pri indukcii senescencie v bunkách B16-F10, čo vedie k potlačeniu rastu buniek a melanogenézy, a tak môže vyvíjať potenciálne protinádorové aktivity [5].

430,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní plus náklady na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 305157

5.publikácie s obsahom bunkovej línie B16-F10

Tu sú uvedené niektoré významné výskumné publikácie, v ktorých je použitá melanómová bunková línia B16-F10:

Antimelanogénny účinok etanolového extraktu ciroku dvojfarebného na IBMX indukovanú melanogenézu v bunkách melanómu B16/F10

Táto štúdia bola uverejnená v časopise Nutrients (2020). Navrhla, že etanolový extrakt z ciroku dvojfarebného má antimelanogénny účinok v bunkách melanómu kože B16F10.

Kalcitriol inhibuje proliferáciu a potenciálne indukuje apoptózu v bunkách B16-F10

Výskum publikovaný v časopise Medical Science Monitor Basic Research (2022) navrhol, že liečivo kalcitriol má protinádorové účinky v bunkách melanómu B16-F10 tým, že inhibuje proliferáciu a indukuje apoptózu.

Prooxidačný účinok kardolov sa podieľa na ich cytotoxickej aktivite voči bunkám myšieho melanómu B16-F10

Tento článok je uverejnený v časopise Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). Zistenia odhalili, že kardoly, rezorcinolové lipidy, pôsobia intenzívne cytotoxicky na bunkovú líniu B16-F10.

Extrakt z exokarpu ginka dvojlaločného inhibuje metastázovanie melanómu B16-F10 so zapojením signálnej dráhy PI3K/akt/NF-κB/MMP-9

V štúdii uverejnenej v časopise Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) sa skúmal antimetastatický potenciál extraktu z exokarpu Ginkgo biloba s použitím buniek B16-F10.

Tymochinón indukuje apoptózu v melanómovej bunke B16-F10 prostredníctvom inhibície p-STAT3 a inhibuje rast nádoru v myšom vnútromaternicovom melanóme ..

Tento výskum v časopise World Neurosurgery (2018) navrhol, že tymochinón môže byť účinnou terapiou proti intracerebrálnym metastatickým léziám, pretože potláča rast buniek B16-F10 a indukuje apoptózu.

6.zdroje pre bunkovú líniu B16-F10: Riešenia: protokoly, videá a ďalšie zdroje

Endotelové bunky B16F10 sa široko používajú vo výskume rakoviny kože. Tu je niekoľko online zdrojov vysvetľujúcich jej kultiváciu a transfekčné protokoly:

B16F10 melanómové bunky transfekcia: Tento videonávod vám pomôže naučiť sa protokol transfekcie buniek B16-F10.
Transfekcia buniek B16-F10: Tento dokument vysvetľuje protokol in vitro transfekcie DNA pre bunky melanómu kože B16F10.

Nasledujúci odkaz obsahuje protokol bunkovej kultúry pre bunky B16-F10:

B16-F10 subkultivácia: Táto webová stránka obsahuje užitočné informácie o nádorových bunkách melanómu B16F10. Obsahuje rastové médiá, zdvojovací čas, podmienky kultivácie a protokol pre subkultiváciu buniek a manipuláciu s kryokonzervovanými a proliferačnými kultúrami.

Odkazy

Poste, G., a i., Porovnanie metastatických vlastností klonov melanómu B16 izolovaných z kultivovaných bunkových línií, subkutánnych nádorov a jednotlivých pľúcnych metastáz. Cancer Research, 1982. 42(7): p. 2770-2778.
Nakamura, M., D. Ono a S. Sugita, Mechanophenotyping of B16 Melanoma Cell Variants for the Assessment of the Efficacy of (-)-Epigallocatechin Gallate Treatment Using a Tapered Microfluidic Device (Mechanofenotypizácia variantov buniek melanómu B16 na hodnotenie účinnosti liečby (-)-epigalokatechín galátom pomocou zúženého mikrofluidického zariadenia). Mikrostroje, 2019. 10(3): p. 207.
Danciu, C., et al. správanie štyroch rôznych podlínií buniek myšieho melanómu B16: C57BL/6J kože. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): p. 73-80.
Liu, J., et al., High expression of CCR5 in melanoma enhances epithelial-mesenchymal transition and metastasis via TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): p. 481-493.
Nanni, V., et al. hydroalkoholový extrakt z kvetov Spartium junceum L. inhibuje rast a melanogenézu v bunkách B16-F10 indukovaním senescencie. Phytomedicine, 2018. 46: p. 1-10.