Bunky AGS - skúmanie buniek AGS adenokarcinómu žalúdka v štúdiách rakoviny

BunkyAGS predstavujú bunkovú líniu ľudského adenokarcinómu žalúdka, ktorá sa široko používa v biomedicínskom výskume. Využíva sa najmä na štúdium biológie rakoviny žalúdka vrátane rastu, vývoja, progresie a terapeutických zásahov. Okrem toho sa používa na skúmanie interakcií medzi hostiteľom a patogénom.

Tento článok sa zaoberá základmi žalúdočných epitelových buniek AGS. Konkrétne sa bude zaoberať:

Všeobecná charakteristika a pôvod AGS buniek
Informácie o kultivácii bunkovej línie AGS
Bunkovú líniu AGS: Výhody a obmedzenia
Aplikácie buniek AGS
Výskumné publikácie o bunkovej línii AGS
Zdroje pre bunkovú líniu AGS: Protokoly, videá a ďalšie zdroje AGS

1.všeobecná charakteristika a pôvod buniek AGS

Predtým, ako začnete pracovať s bunkovou líniou AGS, je potrebné poznať jej pôvod a všeobecné vlastnosti. Táto časť sa zaoberá nasledujúcimi témami: Čo sú bunky AGS? Aký je pôvod buniek AGS? Aká je morfológia rakovinovej bunkovej línie AGS?

Bunková línia AGS bola odvodená z tkaniva žalúdka 54-ročnej kaukazskej ženy s adenokarcinómom žalúdka. Bola izolovaná v roku 1979 [1].
Bunky AGS majú morfológiu podobnú epitelu.
Žalúdočné epitelové bunky AGS sú hyperdiploidné. Modálne číslo chromozómov pre AGS bunky je 49, ktoré sa vyskytuje v takmer 60 % buniek. Polyploidia sa tiež vyskytuje približne v 3,6 % buniek.

Karcinóm žalúdka v priereze pod mikroskopom.

2.informácie o kultivácii bunkovej línie AGS

Na správne zaobchádzanie s bunkovou líniou a jej manažment je potrebné poznať základné pojmy kultivácie. Najmä by ste sa mali naučiť: Čo je to čas zdvojenia buniek AGS? Čo je to bunkové médium AGS? Ako sa subkultivujú bunky AGS? Ktoré zmrazovacie médiá sa používajú pre žalúdočné epitelové bunky AGS?

Kľúčové body pre kultiváciu AGS buniek

Čas zdvojnásobenia:	Čas zdvojenia buniek AGS sa pohybuje v rozmedzí 24 až 48 hodín.
Adherentné alebo v suspenzii:	AGS bunky sú adherentné. Rastú do monovrstvy.
Hustota výsevu:	Hustota výsevu buniek AGS je 1 x¹⁰⁴ ^buniek/cm2. Bunky pri tejto hustote vytvoria splývajúcu monovrstvu za 3 až 5 dní. Po odstránení starého média sa bunky opláchnu 1 x PBS a inkubujú sa s disociačným roztokom Accutase. Oddelené bunky sa resuspendovali v kultivačnom médiu a odstredili. Pelet buniek sa opäť resuspendoval a po spočítaní buniek AGS sa dávkujú do novej banky na rast.
Rastové médium:	Na kultiváciu buniek AGS sa používa médium DMEM obsahujúce 10 % FBS, 4 mM L-glutamín, 4,5 g/l glukózy, 1,5 g/l NaHCO3 a 1,0 mM pyruvát sodný. Médium by sa malo vymieňať 2 až 3-krát týždenne.
Rastové podmienky:	AGS bunky sa uchovávajú vo zvlhčenom inkubátore (pri teplote 37 °C) s prívodom 5 % CO2.
Skladovanie:	Zmrazené bunky AGS sa dlhšie uchovávajú v elektrických mrazničkách pri teplote nižšej ako -150 °C alebo v parnej fáze tekutého dusíka.
Proces zmrazovania a médium:	Na zmrazenie buniek AGS sa používa médium CM-1 alebo CM-ACF. Zmrazovanie buniek sa vykonáva pomalým zmrazovacím procesom, ktorý umožňuje pokles teploty len o 1 °C za minútu a chráni životaschopnosť buniek.
Proces rozmrazovania:	Zmrazené žalúdočné epitelové bunky sa rýchlo miešajú vo vodnom kúpeli s teplotou 37 °C počas 40 až 60 sekúnd. Rozmrazené bunky sa resuspendujú v čerstvom kultivačnom médiu a prelejú sa do nových fliaš na rast. Po 24-hodinovej inkubácii sa médium obnoví, aby sa odstránili zložky zmrazovacieho média. Na rozdiel od toho sa rozmrazené bunky odstredia a odstránia sa zložky zmrazovacieho média. Potom sa zozbierané bunky opäť resuspendujú a dávkujú do banky obsahujúcej kultivačné médium.
Úroveň biologickej bezpečnosti:	Na kultiváciu buniek AGS je nevyhnutné laboratórne prostredie úrovne biologickej bezpečnosti 2.

Bunky AGS pri 20-násobnom zväčšení.

3.bunková línia AGS: Výhody a obmedzenia

V tejto časti článku sa dozviete o niektorých kľúčových výhodách a obmedzeniach spojených s bunkami AGS.

Výhody

Hlavné výhody žalúdočných epitelových buniek AGS sú:

Jednoduchá kultivácia	Bunkovú líniu karcinómu žalúdka AGS možno ľahko udržiavať v laboratóriách bunkových kultúr. Nemá žiadne zložité a náročné požiadavky na kultiváciu buniek. Okrem toho vykazuje dobré rastové vlastnosti, čo z nej robí ideálnu voľbu na štúdium biológie rakoviny žalúdka.
Význam pre rakovinu žalúdka	Bunky AGS boli odvodené z ľudského adenokarcinómu žalúdka, vďaka čomu sa široko používajú na štúdium biológie karcinómu žalúdka a terapeutických zásahov.

Obmedzenia

Obmedzenie spojené s bunkovou líniou AGS je:

Bunkový model in vitro

Bunky AGS sa kultivujú v laboratóriách biomedicínskeho výskumu v umelých podmienkach. Preto nemusia plne kopírovať mikroprostredie rakoviny žalúdka in vivo a ďalšie bunkové a molekulárne interakcie.

4.aplikácie buniek AGS

Bunky AGS sa používajú špeciálne na štúdium biológie rakoviny žalúdka. Majú mnoho ďalších sľubných aplikácií v biomedicínskej oblasti. Niektoré zo zaujímavých výskumných aplikácií AGS buniek sú:

Štúdium rakoviny žalúdka: AGS bunky sú vynikajúcim výskumným nástrojom na skúmanie bunkových a molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom rastu, metastázovania a invázie rakoviny žalúdka. Výskumníci používajú žalúdočné epiteliálne AGS bunky aj na štúdium rôznych bunkových procesov, genetických mutácií a signálnych dráh pri vývoji rakoviny žalúdka. V štúdii Oncology Reports (2019) sa zistilo, že mikroRNA-183-5p.1 podporuje proliferáciu, migráciu a inváziu nádorových buniek inhibíciou signalizačnej kaskády Bcl 2/P53. Okrem toho tiež znižuje reguláciu génu TPM1, aby sa tieto účinky prejavili. MikroRNA aj TPM1 sa teda navrhujú ako účinné molekulárne ciele na vývoj cielenej terapie proti rakovine žalúdka [2].
Skríning liekov: AGS bunky sa bežne používajú na skríning nových a účinných liekov proti rakovine žalúdka. Výskumníci hodnotia cytotoxicitu a účinnosť potenciálnych liečiv pomocou bunkovej línie AGS. Vykonali sa aj štúdie zamerané na identifikáciu nových molekulárnych cieľov a vývoj nových cielených terapií na boj proti karcinómom žalúdka. Vo výskume uskutočnenom v roku 2021 sa využívali bunky rakoviny žalúdka AGS a skúmal sa terapeutický účinok lieku paklitaxel. Zistenia odhalili, že paklitaxel vyvoláva mitotickú katastrofu, ktorá je integrálnym mechanizmom apoptózy alebo bunkovej smrti v bunkách AGS. Okrem toho podporoval aj autofágiu v bunkách rakoviny žalúdka [3].
Interakcie medzi hostiteľom a patogénom: Na rakovinovej bunkovej línii AGS sa študujú aj interakcie medzi hostiteľom a patogénom. To pomáha výskumníkom pochopiť bunkové mechanizmy a reakcie spojené s infekciou. Napríklad v štúdii uskutočnenej v roku 2020 sa pozorovalo, že malé nekódujúce RNA prítomné vo vezikulách vonkajšej membrány Helicobacter pylori znižujú sekréciu interleukínu 8 v ľudských AGS bunkách [4].

430,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní plus náklady na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 300408

5.výskumné publikácie o bunkovej línii AGS

V tejto časti článku sa budeme venovať niekoľkým zaujímavým a najčastejšie citovaným výskumným publikáciám, v ktorých sa objavujú bunky AGS.

Salidrozid indukuje apoptózu a ochrannú autofágiu v bunkách ľudskej rakoviny žalúdka AGS prostredníctvom dráhy PI3K/Akt/mTOR

Táto štúdia v časopise Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) navrhuje, aby salidrozid, prírodná zlúčenina, indukoval ochrannú autofágiu a bunkovú smrť v epiteliálnych bunkách žalúdka AGS prostredníctvom modulácie signálnej dráhy PI3K/AKT/mTOR.

Polysacharid Astragalus zvýšil protinádorové účinky apatinibu v bunkách AGS rakoviny žalúdka inhibíciou signálnej dráhy AKT

Táto štúdia bola uverejnená v časopise Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). Skúmali sa v nej synergické protinádorové účinky polysacharidu astragalus a liečiva apatinib v bunkách AGS. Výsledky štúdie odhalili, že astragalus zvyšuje protinádorové účinky apatinibu prostredníctvom potlačenia signalizácie AKT.

Kurkzedoalid prispieva k cytotoxicite odnoží Curcuma zedoaria proti bunkám ľudského karcinómu žalúdka AGS prostredníctvom indukcie apoptózy

Tento výskum v časopise Journal of Ethnopharmacology (2018) navrhol, že kurkuzedoalid, prírodná zlúčenina z rastliny Curcuma zedoaria Roscoe, prispieva k jej cytotoxickému potenciálu voči bunkám AGS.

Nadmerná expresia FOXA1 inhibuje proliferáciu a EMT buniek ľudského karcinómu žalúdka AGS

V tejto publikácii v časopise Gene (2018) sa navrhuje, že upregulácia FOXA1 potláča proliferáciu buniek adenokarcinómu žalúdka AGS a prechod z epitelu na mezenchým (EMT) a inváziu.

sncRNA balené vezikulami vonkajšej membrány Helicobacter pylori oslabujú sekréciu IL-8 v ľudských bunkách

Tento výskumný článok bol uverejnený v časopise International Journal of Medical Microbiology v roku 2020. V tejto štúdii boli na štúdium interakcií medzi hostiteľom a patogénom použité bunky AGS. Zistenia odhalili, že Helicobacter pylori obsahuje vo svojich vezikulách vonkajšej membrány niektoré nekódujúce RNA, ktoré ovplyvňujú hladiny IL-8 v bunkách AGS.

6.zdroje pre bunkovú líniu AGS: Protokoly, videá a ďalšie zdroje pre AGS AGS

Nižšie je uvedených niekoľko zdrojov, ktoré obsahujú bunky AGS.

Protokol transfekcie buniek AGS: Toto video je postupným sprievodcom pri osvojovaní si protokolu transfekcie žalúdočných epitelových buniek AGS.

Nasledujúci odkaz obsahuje protokol o kultivácii buniek AGS.

Protokol o kultivácii buniek AGS: Táto webová stránka obsahuje užitočné informácie o médiách a protokoloch kultivácie buniek AGS. V krátkosti poskytuje protokol na subkultiváciu žalúdočných epitelových AGS buniek a manipuláciu s proliferujúcimi a kryokonzervovanými AGS kultúrami.
Subkultivácia AGS buniek: Táto stránka podrobne vysvetľuje postup subkultivácie buniek AGS.

Odkazy

Phuc, B.H., et al. porovnávacia genomika dvoch vietnamských kmeňov Helicobacter pylori, CHC155 od pacienta s karcinómom žalúdka bez kardie a VN1291 od pacienta s duodenálnym vredom. Scientific Reports, 2023. 13(1): p. 8869.
Lin, J., et al., miRNA-183-5p. 1 podporuje migráciu a inváziu buniek rakoviny žalúdka AGS cielením na TPM1 Corrigendum in/10.3892/or. 2020.7902. Oncology reports, 2019. 42(6): p. 2371-2381.
Khing, T.M., a i., Vplyv paklitaxelu na apoptózu, autofágiu a mitotickú katastrofu v bunkách AGS. Scientific Reports, 2021. 11(1): p. 23490.
Zhang, H., et al., sncRNA zabalené vezikulami vonkajšej membrány Helicobacter pylori oslabujú sekréciu IL-8 v ľudských bunkách. International Journal of Medical Microbiology, 2020. 310(1): p. 151356.