Bunky U87MG – Výskum glioblastómu s využitím buniek U87MG a jeho vplyv na štúdium rakoviny mozgu
U-87 MG, primárna ľudská bunková línia glioblastómu, sa široko využíva v biologickom výskume. Tieto bunky sa používajú najmä v neurovedách a imuno-onkológii.
- Rastové médium
- Bunky línie U-87 MG sa kultivujú v médiu EMEM (Eagle's minimal essential medium) obohatenom o 1,0 g/l L-glukózy, 2,0 mM L-glutamínu, 2,2 g/l NaHCO₃, 1 % NEAA, 1 mM pyruvátu sodného a 10 % roztoku FBS. Rôž by sa malo vymieňať každé 2 až 3 dni.
- Doba zdvojnásobenia
- Bunky U 87 MG majú čas zdvojnásobenia populácie v rozmedzí 18–38 hodín.
- Typ rastu
- U 87 MG je adhezívna bunková línia. Bunky majú podlhovastý tvar a rastú vo forme monovrstiev.
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- BSL-1
- K dispozícii od
- Cytion — Objednajte si U-87 MG
- Všeobecné charakteristiky a pôvod buneckej línie U-87 MG
- Informácie o kultivácii buniek U-87 MG
- Výhody a nevýhody buniek U-87 MG
- Výskumné aplikácie s využitím buniek U-87 MG
- Objednajte si bunkovú líniu U-87 MG ešte dnes
- Bunka U-87 MG: Vedecké publikácie
- Zdroje informácií o bunkách U-87 MG: protokoly, videá a ďalšie materiály
- Pohľad na výskum gliómu U-87 MG: Často kladené otázky
- Referencie
- Často kladené otázky
Všeobecné charakteristiky a pôvod buneckej línie U-87 MG
V tejto časti sa budeme venovať pôvodu a všeobecným charakteristikám buneckej línie U87. Dozviete sa, čo sú bunky U-87 MG, odkiaľ pochádzajú bunky U87, aký je plný názov U-87 MG, akú veľkosť majú bunky U87 a aká je morfológia buneckej línie U87.
- Bunková línia U87 je bunková línia glioblastómu, astrocytómu. Bola založená v roku 1966 na Univerzite v Uppsale. Bunky boli získané od 44-ročného muža kaukazského pôvodu trpiaceho glioblastómom. Táto bunková línia sa oficiálne nazýva U 87 MG, čo je skratka pre Uppsala 87 Malignant Glioma.
- Bunky U 87 MG majú morfológiu podobnú epitelovým bunkám.
- Veľkosť buniek U 87 MG sa pohybuje v rozmedzí 12 až 14 µm v priemere.
- Táto ľudská glioblastómová bunková línia je hypodiploidná a približne 48 % buniek má modálny počet chromozómov 44. V 5,9 % buniek sa však vyskytujú aj vyššie ploidie.
Informácie o kultivácii buniek U-87 MG
Pred začatím práce s bunkami U 87 MG by ste sa mali oboznámiť s nasledujúcimi kľúčovými bodmi týkajúcimi sa kultivácie týchto glioblastómových buniek. Predovšetkým by ste mali vedieť: Aká je doba zdvojnásobenia populácie buniek U 87 MG? Aké kultivačné médium sa používa na kultiváciu buniek U87? Aká je hustota výsevu buniek línie U-87 MG?
Kľúčové body kultivácie buniek U-87 MG
Doba zdvojnásobenia populácie:
Bunky U 87 MG majú čas zdvojnásobenia populácie v rozmedzí 18–38 hodín.
Adherentné alebo v suspenzii:
U 87 MG je adhezívna bunková línia. Bunky majú podlhovastý tvar a rastú ako monovrstvy.
Hustota výsevu:
Odporúča sa vysadiť bunkovú líniu glioblastómu U 87 MG pri hustote 1 × 10⁴ buniek/cm². Adherentné bunky U87 sa premyjú 1× PBS a inkubujú s roztokom Accutase. Následne sa disociované bunky odstreďujú a zozbierajú. Bunky sa opatrne resuspendujú a pridajú do nových fliaš obsahujúcich rastové médium.
Rastové médium:
Bunky línie U 87 MG sa kultivujú v EMEM (Eagleovo minimálne esenciálne médium) obohatenom o 1,0 g/l L-glukózy, 2,0 mM L-glutamínu, 2,2 g/l NaHCO₃, 1 % NEAA, 1 mM pyruvátu sodného a 10 % roztoku FBS. Médium by sa malo obnovovať každé 2 až 3 dni.
Podmienky rastu:
Bunky U-87 MG vyžadujú na optimálny rast zvlhčený inkubátor s prívodom 5 % CO₂ a teplotou 37 °C.
Skladovanie:
Bunky U87 sa uchovávajú buď v parnej fáze tekutého dusíka, alebo pri teplote nižšej ako -150 °C, aby sa zachovala maximálna životaschopnosť buniek glioblastómu.
Proces zmrazenia a médium:
Na zmrazenie buniek U 87 MG sú vhodné zmrazovacie médiá CM-1 alebo CM-ACF. Odporúča sa pomalý proces zmrazenia, pretože zabraňuje šoku buniek a chráni ich životaschopnosť.
Proces rozmrazovania:
Zmrazené fľaštičky s bunkovou líniou U-87 MG sa rozmrazujú vo vodnom kúpeli pri teplote 37 °C. Do buniek sa pridá rastové médium, bunky sa resuspendujú a prenesú do nových fliaš na kultiváciu. Na rozdiel od toho je možné bunky U87 odcentrifugovať, aby sa odstránilo zmrazovacie médium, a potom ich kultivovať.
Úroveň biologickej bezpečnosti:
Na manipuláciu s bunkovými kultúrami U 87 MG je vyžadovaná úroveň biologickej bezpečnosti 1.
Výhody a nevýhody buniek U-87 MG
Keď premýšľame o bunkovej línii, ako prvé nám napadne: Aké sú výhody použitia buniek U-87 MG? Aké sú nevýhody buniek U-87 MG?
Výhody
Buněčné línie U-87 MG sa široko využívajú vo výskume. Medzi výhody spojené s touto bunkovou líniou patria:
Výhody
- Ľahké pestovanie: Bunky U-87 MG sa ľahko udržiavajú v kultúre. Nemajú náročné ani zložité požiadavky na kultiváciu buniek.
- Homogenita: U-87 MG je homogénna bunková línia. Väčšina buniek v populácii má rovnakú genetickú výbavu, a preto zdieľajú podobné charakteristiky. Tieto bunky sa využívajú na štúdium bunkových procesov, skríning liekov a testovanie.
- Dobre charakterizovaná: Táto bunková línia glioblastómu je dobre charakterizovaná z hľadiska rastových vlastností, morfológie a génovej expresie, čo z nej robí cenný výskumný nástroj.
Nevýhody
- Obmedzená použiteľnosť: U-87 MG je bunková línia glioblastómu, takže jej použitie je primárne obmedzené na štúdium glioblastómov a súvisiacich molekulárnych mechanizmov. Nemusí byť vhodná na skúmanie iných typov rakoviny.
Výskumné aplikácie s využitím buniek U-87 MG
Bunka glioblastómu U87MG sa vo veľkej miere využíva v štúdiách rakoviny, najmä vo výskume glioblastómu. Niektoré z výskumných aplikácií buniek U 87 MG sú:
- Výskum biológie rakoviny: Bunka U87 sa používa na štúdium rastu a vývoja rakoviny, základných molekulárnych mechanizmov, signálnych dráh a mikroprostredia nádoru. V štúdii uverejnenej v roku 2020 sa použil in vitro model glioblastómu, bunková línia U-87 MG, na skúmanie génu BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) ako terapeutického cieľa. Zistenia ukázali, že gén BMAL1 inhibuje proliferáciu, migráciu a inváziu buniek glioblastómu potláčaním expresie génov cyklínu B1, metaloproteinázy-9 a fosfo-AKT [1]. Ďalší výskum realizovaný v roku 2019 využil bunkovú líniu U87 a zistil, že znížená expresia transkripčného faktora LITAF (lipopolysacharidom indukovaný faktor nekrózy nádorov alfa) môže zvýšiť rádiocitlivosť gliómových buniek prostredníctvom zvýšenej regulácie dráhy FOXO-1. LITAF je tiež známy ako gén 7 indukovaný p53 (PIG7) [2].
- Objavovanie a vývoj liekov: Bunky U-87 MG možno použiť na účely skríningu a testovania liekov, čo umožňuje výskumníkom identifikovať nové potenciálne protinádorové lieky a posúdiť ich účinnosť a toxicitu. V rámci výskumu sa použila bunková línia glioblastómu U 87 MG na hodnotenie protinádorového a antioxidačného potenciálu extraktu z rastliny Inula helenium (L.) [3]. Podobne aj iná publikácia spomínala použitie bunkovej línie U87 na testovanie cytotoxického a apoptotického účinku rastlinných extraktov [4]. Okrem toho sa v štúdii zverejnenej v roku 2018 skúmal cytotoxický účinok seskviterpénových alkaloidov extrahovaných z rastlín rodu Nuphar na citlivé a liekovo rezistentné bunkové línie U 87 MG [5].
Objednajte si ešte dnes bunkovú líniu gliómu U87 MG
Bunka U-87 MG: Vedecké publikácie
Tu sú niektoré významné vedecké publikácie zaoberajúce sa bunkovou líniou U 87 MG.
Tento článok uverejnený v časopise Neuroreport v roku 2018 navrhuje, že hypoxia by mohla zvýšiť migráciu a inváziu buniek ľudského glioblastómu reguláciou signálnej dráhy PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Táto štúdia bola uverejnená v časopise Frontiers in Pharmacology v roku 2020. Výsledky výskumu uvádzajú, že flavonoid eriodiktol má protinádorové účinky na bunkovú líniu U87 a potláča proliferáciu buniek a metastázovanie. Táto zlúčenina sprostredkúva svoje protinádorové vlastnosti moduláciou signálnej dráhy PI3K/Akt/NF-κB.
Tento výskum uverejnený v časopise „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine“ (2018) naznačuje, že čínska bylinná zmes nazývaná pilulka Xihuang môže indukovať apoptózu v bunkách U87 pôsobením na kaskádu Akt/mTOR/FOXO1 aktivovanú ROS.
LITAF zvyšuje rádiocitlivosť ľudských gliómových buniek prostredníctvom dráhy FoxO1
Táto vedecká štúdia bola uverejnená v časopise „Cellular and Molecular Neurobiology“ v roku 2019. Štúdia navrhla, že transkripčný faktor LITAF potláča expresiu a zvyšuje rádiocitlivosť gliómových buniek reguláciou signálnej dráhy FOXO-1.
Tento článok bol uverejnený v časopise Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Výskumníci použili bunky U87MG na skúmanie cytotoxického účinku nanočastíc PLGA s obsahom kurkumínu.
Zdroje týkajúce sa buniek U-87 MG: protokoly, videá a ďalšie materiály
Bunka glioblastómu U87MG sa používa v mnohých laboratóriách zaoberajúcich sa výskumom rakoviny. Niekoľko zdrojov týkajúcich sa tejto bunky sú:
- Transfekcia buniek U87: Tento dokument popisuje protokol transfekcie buniek U87MG.
- Transfekcia buniek U 87 MG: Toto video je návod, ktorý krok za krokom vysvetľuje protokol transfekcie buniek U87.
Zdroje týkajúce sa protokolu kultivácie buniek U87 sú uvedené nižšie:
- Bunky U87 MG: Tento odkaz obsahuje základné informácie o bunkovej línii U87 MG. Zahŕňa stručné protokoly na delenie, zmrazenie a rozmrazenie buniek.
Poznatky o výskume MG gliómu U87: Často kladené otázky
Gliómové bunkové línie, ako sú glioblastómové bunky U87, sú kultivované bunky odvodené z ľudských gliómov, ktoré sa vo veľkej miere používajú vo výskume rakoviny na štúdium biológie, genetiky a reakcií na lieky. Slúžia ako modely na pochopenie správania nádorov a testovanie terapeutických stratégií.
Izogénna bunková línia sa vzťahuje na bunky odvodené z jednej bunky, čím sa zabezpečí genetická jednotnosť. Vo výskume gliómov poskytujú izogénne línie konzistentný model na štúdium genetických zmien a ich vplyvu na rast nádoru a odpoveď na liečbu.
Profil DNA gliómových bunkových línií je rozhodujúci pre identifikáciu genetických zmien, pochopenie evolúcie nádoru a vývoj cielenej terapie. Pomáha pri klasifikácii nádorov na základe genetických markerov, ako sú mutácie IDH1.
Sérum v médiách bunkových kultúr poskytuje gliómovým bunkám základné rastové faktory, hormóny a živiny. Jeho zloženie však môže ovplyvniť reprodukovateľnosť experimentu, preto sa čoraz častejšie používajú podmienky bez séra alebo s definovaným sérom.
Cytotoxicita buniek gliómových bunkových línií sa hodnotí pomocou testov, ako je prietoková cytometria, ktorá meria zdravie, životaschopnosť a smrť buniek po liečbe liekmi alebo imunitnými bunkami, ako sú prirodzené zabíjačské bunky (NK).
Cytotoxicita NK buniek zohráva kľúčovú úlohu vo výskume liečby gliómov, pretože NK bunky dokážu rozpoznať a zabiť nádorové bunky bez predchádzajúcej senzibilizácie. Štúdium interakcií NK buniek s gliomovými bunkami pomáha vyvíjať stratégie na zlepšenie odstraňovania nádorov sprostredkovaného NK bunkami.
Nádor pôvodu poskytuje kontext o pôvodnom biologickom prostredí a vlastnostiach nádoru. Ich pochopenie pomáha pri korelácii zistení zo štúdií bunkových línií so skutočným správaním nádoru a prognózou pacienta.
Elektrónová mikroskopia umožňuje podrobnú vizualizáciu bunkových a subcelulárnych štruktúr v gliómových bunkových líniách, čo je nevyhnutné na skúmanie morfológie buniek, stavu organel a zmien po liečbe.
Ligand NKG2D je exprimovaný na nádorových bunkách a viaže sa na receptor NKG2D na NK bunkách, čím spúšťa cytotoxickú odpoveď. Štúdium tejto interakcie pomáha pochopiť a potenciálne posilniť imunitné reakcie proti gliómu.
3D modely bunkových kultúr presnejšie napodobňujú nádorové mikroprostredie, čím poskytujú lepší prehľad o raste, migrácii a odolnosti gliómov voči liekom. Táto technika je kľúčová pre relevantnejšie translačné onkologické štúdie.
Referencie
- Gwon, D.H. a kol., BMAL1 potláča proliferáciu, migráciu a inváziu buniek U87MG prostredníctvom downregulácie cyklínu B1, fosfo-AKT a metaloproteinázy-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF zvyšuje rádiocitlivosť ľudských gliómových buniek prostredníctvom dráhy FoxO1. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): s. 871–882.
- Koc, K., et al., Antioxidantné a protinádorové účinky extraktu z Inula helenium (L.) na ľudskú bunkovú líniu glioblastómu U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): s. 658–661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh a A. Ghasempour, Cytotoxicita a indukcia apoptózy v bunkách rakoviny prsníka, kožného karcinómu a glioblastómu pomocou rastlinných extraktov. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): s. 5131–5142.
- Fukaya, M. a kol., Cytotoxicita seskviterpénových alkaloidov z rastlín rodu Nuphar voči citlivým a liekovo rezistentným bunkovým líniám. Food Funct, 2018. 9(12): s. 6279–6286.