Odhalenie buniek THP-1: Priekopnícky výskum v oblasti leukémie
Bunka THP-1, známa ako Tohoku Hospital Pediatrics-1, je spontánne imortalizovaná kultúra ľudských monocytárnych leukemických buniek. Slúži ako univerzálny model pri štúdiu biológie monocytov, aktivít makrofágov a ich úlohy v rakovine a imunoterapii. Ľudská leukemická bunková línia THP-1 odzrkadľuje fyziologické a funkčné vlastnosti monocytov periférnej krvi, čo z nej robí neoceniteľný zdroj pre skúmanie diferencičných antigénov monocytov a širších aspektov fyziológie monocytov. Tento článok poskytuje základný prehľad o bunkovej línii THP-1.
- Rastové médium
- Pozri stránku produktu
- Doba zdvojnásobenia
- Pozrite si stránku produktu
- Typ rastu
- Adherentný
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- BSL-1
- Dostupné od
- Cytion — Objednajte si THP-1
- Všeobecné informácie a pôvod buneckej línie THP-1
- Kultivácia ľudskej leukemickej buneckej línie THP-1
- Objavte našu kolekciu bunkových línií THP-1
- Preskúmavanie biológie makrofágov pomocou buneckej línie THP-1: pohľad na diferenciáciu, funkciu a imunologickú dynamiku
- Výskumné aplikácie buniek THP-1
- Publikácie zdôrazňujúce význam buniek THP-1 vo vedeckom výskume
- Zdroje informácií o bunkovej línii THP-1
- Často kladené otázky týkajúce sa buneckej línie THP-1
- Referencie
- Často kladené otázky
Všeobecné informácie a pôvod buneckej línie THP-1
Pre tých, ktorí začínajú pracovať s bunkovou líniou THP-1, je nevyhnutné porozumieť jej základným charakteristikám. Budeme sa venovať jej definícii, pôvodu, morfológii, veľkosti a genómovým vlastnostiam.
Bunková línia THP-1: THP-1 je ľudská monocytárna leukemická bunková línia odvodená z periférnej krvi 1-ročného pacienta, u ktorého bola v roku 1980 diagnostikovaná akútna monocytárna leukémia (podtyp M5).
Morfológia: Bunky THP-1 majú okrúhly tvar, sú veľké a majú jednotnú morfológiu.
Veľkosť buniek: Tieto bunky sú relatívne veľké, s priemerným priemerom presahujúcim 21 µm.
Genóm a ploidita: THP-1 je takmer diploidná bunková línia, pričom analýza karyotypu odhalila diploidný počet chromozómov (n = 46).
Kultivácia ľudskej leukemickej buneckej línie THP-1
Dostatočná znalosť charakteristík buneckej línie zjednodušuje proces jej kultivácie. Táto časť poskytuje kľúčové informácie o kultivácii a udržiavaní buneckej línie THP-1, vrátane doby zdvojnásobenia, kultivačných médií, adhéznych vlastností, hustoty výsevu, podmienok rastu, skladovania a procesov zmrazovania a rozmrazovania.
Doba zdvojnásobenia: Doba zdvojnásobenia buniek THP-1 je približne 35 hodín, hoci sa môže pohybovať v rozmedzí od 19 do 50 hodín v závislosti od kultivačných podmienok.
Adhézia: Bunky THP-1 rastú v suspenzii, ale za určitých podmienok sa môžu diferencovať na adhezívne bunky podobné makrofágom.
Hustota výsevu: Ideálna hustota výsevu sa pohybuje v rozmedzí od 1,0 × 10⁵ do 1,5 × 10⁶ životaschopných buniek/ml. Túto hustotu dosiahnete zriedením buniek z vypestovanej kultúry na požadovanú hustotu.
Rastové médium: Odporúčaným médiom je RPMI 1640 doplnené o 10 % FBS, 1 mM pyruvát sodný a 2,5 mM L-glutamín.
Podmienky kultivácie: Bunky by sa mali kultivovať vo zvlhčenom inkubátore s prívodom 5 % CO₂ pri teplote 37 °C.
Skladovanie: Na dlhodobé uchovanie by sa bunky mali skladovať pri teplote nižšej ako -150 °C, aby sa zachovala ich životaschopnosť.
Postup zmrazovania: Na pomalé zmrazovanie použite kultivačné médiá CM-1 alebo CM-ACF, pričom teplota klesá o 1 °C za minútu.
Postup rozmrazovania: Rýchlo premiešavajte 40–60 sekúnd vo vodnom kúpeli s teplotou 37 °C obsahujúcom antimikrobiálne činidlo, potom preneste do fliaš s rastovým médiom.
Úroveň biologickej bezpečnosti: S bunkami THP-1 by sa malo pracovať v laboratóriách s úrovňou biologickej bezpečnosti 1.
Tento prehľadný a vedecky presný popis poskytuje základné informácie o bunkovej línii THP-1, čím pomáha výskumníkom pri práci s týmto cenným výskumným nástrojom.
Skúmanie biológie makrofágov pomocou bunkovej línie THP-1: pohľad na diferenciáciu, funkciu a imunologickú dynamiku
Bunky THP-1 ako model na analýzu diferenciácie a funkcie makrofágov
V súvislosti s bunkami THP-1 nadobúda diferenciácia a funkcie makrofágov jedinečný význam. Bunky THP-1 sú ľudská monocytová línia z leukémie, ktorá sa bežne používa ako model na štúdium biológie monocytov a makrofágov in vitro. Pri ošetrení forbol-12-myristát-13-acetátom (PMA) sa dokážu diferencovať na bunky podobné makrofágom, čím napodobňujú prechod, ktorým prechádzajú periférne monocyty, aby sa v tele stali makrofágmi. Po diferenciácii sa makrofágy odvodené z buniek THP-1 môžu prostredníctvom špecifických podnetov polarizovať buď na makrofágy typu M1, alebo M2, čo odzrkadľuje prozápalový stav spojený s typom M1 alebo protizápalový stav spojený s typom M2 a stav regenerácie tkaniva.
Tieto diferencované makrofágy THP-1 si zachovávajú kľúčové funkcie, ako sú fagocytóza, prezentácia antigénov a produkcia cytokínov, čo z nich robí neoceniteľný in vitro systém na skúmanie molekulárnych a bunkových mechanizmov, ktoré sú základom reakcií makrofágov na rôzne signály. Štúdie využívajúce bunky THP-1 poskytli poznatky o aktivitách makrofágov, vrátane reakcií na infekčné agens, interakcií s rakovinovými bunkami a úlohy makrofágov v imunoregulácii a zápale. Bunky THP-1 slúžia tiež ako výkonný nástroj na skríning potenciálnych terapeutických zlúčenín, ktoré môžu modulovať aktivitu makrofágov, a na skúmanie imunologických aspektov zapojenia makrofágov do patogenézy a riešenia ochorení.
Skúmanie polarizácie a aktivít makrofágov pomocou THP-1
Bunky THP-1 zohrávajú kľúčovú úlohu pri štúdiu polarizácie ľudských makrofágov, čo je proces zásadný pre pochopenie imunitných reakcií v zdraví aj pri ochoreniach. Diferenciáciou buniek THP-1 na makrofágy typu M0, M1 a M2 môžu výskumníci skúmať klasickú aktiváciu makrofágov (M1) spojenú s prozápalovými reakciami a polarizáciu makrofágov typu M2, ktorá súvisí s protizápalovými alebo hojivými procesmi. Tento model polarizácie makrofágov umožňuje hlbšie pochopiť funkcie makrofágov v rôznych kontextoch, vrátane vývoja nádorov a reakcie rakovinových buniek na liečbu.
THP-1 vo výskume rakoviny: od apoptózy po chemorezistenciu
Bunka THP-1 zohráva kľúčovú úlohu pri štúdiu apoptózy rakovinových buniek a mechanizmov, ktoré sú základom reakcií nádorových buniek na liečbu. Testy využívajúce bunky THP-1, ako napríklad ADCP testy zamerané na špecifické rakovinové bunky, pomáhajú objasniť interakcie medzi makrofágmi a nádorovými bunkami, vrátane buniek HepG2. Okrem toho skúmanie aktivity kaspáz v bunkách THP-1 prispieva k nášmu pochopeniu apoptózy, ktorá je kľúčovým procesom v progresi a liečbe rakoviny. Vplyv chemoterapeutických látok, ako je etopozid, na bunky THP-1 poskytuje pohľad na úlohu týchto buniek v chemorezistencii, čím sa ešte viac zdôrazňuje ich význam vo výskume rakoviny.
Bunky THP-1 a imunoterapia: cielenie a reakcia
V oblasti imunoterapie sa bunky THP-1 používajú na modelovanie interakcie medzi imunitnými bunkami a rakovinou, pričom sa skúma, ako možno využiť makrofágy na cielené pôsobenie na rakovinové bunky, ako sú napríklad bunky Raji. Štúdium expresie mRNA a proteínov v bunkách THP-1 pomáha pochopiť zložité signálne dráhy zapojené do imunitnej odpovede a potenciál pre terapeutickú intervenciu. Tento výskum je kľúčový pre vývoj stratégií na manipuláciu s aktivitami makrofágov s cieľom dosiahnuť lepšie výsledky imunoterapie.
Bunka THP-1 sa vďaka svojej schopnosti napodobňovať periférne monocyty a prechádzať polarizáciou na makrofágy stala základným kameňom vo výskume ľudskej leukémie, biológie makrofágov a ich vplyvu na rakovinu a imunoterapiu. Jej univerzálnosť a relevantnosť v rôznych testoch z nej robia nevyhnutný nástroj na prehĺbenie nášho chápania úlohy imunitného systému v zdraví a chorobe.
Objavte našu kolekciu bunkových línií THP-1
Výskumné využitie buniek THP-1
Predtým, ako začnete pracovať s akoukoľvek bunkovou líniou, mali by ste sa oboznámiť s jej výskumnými aplikáciami a pochopiť, ako tieto bunky využiť vo vašom výskume. Tu uvádzame niekoľko významných výskumných aplikácií bunkovej línie THP-1.
Bunka THP-1 sa široko využíva v imunologickom výskume, pretože sa dokáže diferencovať na rôzne imunitné bunky. Tu sú niektoré príklady štúdií, v ktorých sa využili bunky THP-1:
- V štúdii z roku 2018 sa bunky THP-1 použili na deriváciu makrofágov a na skúmanie zápalových dráh a súvisiacich mechanizmov. Výskumníci zistili, že proteín nazývaný apolipoproteín A-1 viažuci proteín (AIBP) môže zastaviť zápalové dráhy tým, že sa viaže na apoA-1 a stabilizuje transportér A1 viažuci ATP (ABCA1) [3].
- V inej štúdii sa bunky THP-1 použili na vytvorenie buniek podobných monocytom a na skúmanie účinkov neuroprotektívnej kyseliny dokosahexaenovej (DHA) na tieto bunky v kontexte Alzheimerovej choroby. Štúdia skúmala potenciálne mechanizmy, ktoré sú základom interakcie proteínu amyloid beta (Aβ) [4].
- Makrofágy odvodené z buneckej línie THP-1 boli použité v ďalšej štúdii na skúmanie potenciálu exozómov vylučovaných bunkami adenokarcinómu pankreatických vývodov (PDAC) pri podporovaní nádorového rastu [5].
Publikácie zdôrazňujúce význam buniek THP-1 vo vedeckom výskume
Existuje množstvo štúdií o bunkách THP-1. Tu uvádzame niekoľko relevantných príkladov:
- Proteín viažuci apolipoproteín A-1 inhibuje zápalové signálne dráhy tým, že sa viaže na apolipoproteín A-1 v makrofágoch THP-1. Táto štúdia bola uverejnená v časopise Circulation v roku 2018. V rámci tohto výskumu boli makrofágy odvodené z buneckej línie THP-1 ošetrené lipopolysacharidom s cieľom indukovať zápalové dráhy. Štúdia navrhla, že proteín viažuci apolipoproteín A-1 zabraňuje zápalovým kaskádam viazaním sa na proteín apolipoproteín A-1.
- Kyselina DHA zmierňuje Aβ-indukovanú nekroptózu prostredníctvom signálnej dráhy RIPK1/RIPK3 v monocytoch THP-1. Tento výskum navrhol, že kyselina dokosahexaenová (DHA) inhibuje nekroptózu indukovanú amyloidným beta proteínom v monocytoch odvodených z THP-1 v kontexte Alzheimerovej choroby
- Účinky exozómov buniek rakoviny pankreasu podporujúce rast nádoru na makrofágy odvodené z buniek THP-1: V tejto publikácii Linton a kolegovia pozorovali účinok exozómov vylučovaných bunkami duktálneho adenokarcinómu pankreasu, ktorý podporuje rast nádoru, na makrofágy pochádzajúce z buniek línie THP-1.
- Vplyv triedenia odpadu na mikrobióm životného prostredia, životaschopnosť buniek THP-1 a zápalové reakcie: Táto štúdia využila makrofágy odvodené z buneckej línie THP-1 a skúmala vplyv mikrobiómu prítomného v odvetví triedenia odpadu na sekréciu prozápalových cytokínov týmito bunkami.
- Štandardizované protokoly diferenciácie buniek THP-1 na makrofágy s odlišnými fenotypmi M (IFNγ+ LPS), M (IL-4) a M (IL-10): Táto štúdia opisuje protokoly na indukciu diferenciácie buniek THP-1 a vytvorenie makrofágov s konkrétnymi fenotypmi.
- Proaterogénna proteoglykanáza ADAMTS-1 je v makrofágoch odvodených z buniek THP-1 potláčaná kyselinou laurovou prostredníctvom signálnych dráh PI3K a JNK. Tento článok bol uverejnený v časopise Molecular Biology Reports v roku 2019. Táto štúdia skúmala terapeutický potenciál kyseliny laurovej na makrofágoch odvodených z buniek THP-1. Výsledky ukázali, že kyselina laurová stabilizuje aterosklerotický plát a inhibuje trombózu moduláciou expresie ADAMS-1 (proaterogénnej proteoglykanázy).
Zdroje informácií o bunkovej línii THP-1
V tejto časti sa budeme venovať všetkým dostupným online zdrojom týkajúcim sa buniek THP-1. Tieto zdroje vám výrazne pomôžu pri osvojovaní si protokolov kultivácie, diferenciácie a transfekcie.
Protokoly kultivácie buniek
Tu je niekoľko zdrojov, ktoré vysvetľujú protokoly kultivácie a manipulácie s bunkami THP-1.
- Protokol kultivácie a diferenciácie: Tento dokument obsahuje podrobné a komplexné informácie o kultivačných médiách, subkultivácii, zmrazovaní a rozmrazovaní, ako aj o protokoloch diferenciácie týchto buniek.
- Subkultivácia buniek THP-1: Tento dokument obsahuje protokol subkultivácie buniek THP-1.
Protokoly transfekcie
- Transfekcia buniek THP-1: Tento odkaz sa týka transfekcie buniek THP-1 plazmidovou DNA.
- Tento dokument opisuje protokol transfekcie buniek THP-1.
Videá týkajúce sa buniek THP-1
THP-1 je široko kultivovaná bunková línia. K dispozícii je mnoho videí, ktoré vysvetľujú manipuláciu a kultiváciu tejto bunkovej línie:
- Kultivácia buniek THP-1: Toto video sa venuje kultivácii buniek THP-1.
- Transfekcia buniek THP-1: Toto video ukazuje protokol pre vysoko efektívnu transfekciu buniek THP-1.
Dúfame, že tento článok obsahuje relevantné informácie o kultivácii, diferenciácii, výhodách a výskumných aplikáciách buniek THP-1. Ak plánujete vo svojom výskume využiť tento in vitro bunkový model akútnej myeloidnej leukémie, zvážte objednávku u nás.
Často kladené otázky týkajúce sa buneckej línie THP-1
Referencie
- Chanput, W., J.J. Mes a H.J. Wichers, Bunková línia THP-1: in vitro bunkový model pre prístup k imunomodulácii. International immunopharmacology, 2014. 23(1): s. 37–45.
- Chanput, W., V. Peters a H. Wichers, Bunky THP-1 a U937. Vplyv bioaktívnych látok v potravinách na zdravie: modely in vitro a ex vivo, 2015: s. 147–159.
- Zhang, M. a kol., Proteín viažuci sa na apolipoproteín A-1 inhibuje zápalové signálne dráhy viazaním sa na apolipoproteín A-1 v makrofágoch THP-1. Circulation Journal, 2018. 82(5): s. 1396–1404.
- Yuan, S., et al., DHA zmierňuje Aβ-indukovanú nekroptózu prostredníctvom signálnej dráhy RIPK1/RIPK3 v monocytoch THP-1. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2020. 126: s. 110102.
- Linton, S.S., a kol., Účinky exozómov buniek rakoviny pankreasu podporujúce rast nádoru na makrofágy odvodené z THP-1. PLoS One, 2018. 13(11): s. e0206759.