Bunka T98G
Bunky T98G tvoria ľudskú bunkovú líniu glioblastómu, ktorá sa všeobecne používa v biomedicínskom výskume. Tieto bunky sa využívajú najmä v štúdiách rakoviny mozgu na skúmanie kľúčových buniek a molekulárnych faktorov, ktoré k nej prispievajú. Okrem toho pomáhajú výskumníkom pri skríningu a testovaní nových protinádorových liekov, čo môže napomôcť vývoju liekov.
Všeobecné charakteristiky a pôvod bunkovej línie T98G
Táto časť článku vám pomôže oboznámiť sa so základnými charakteristikami bunkovej línie T98G. Bude obsahovať informácie o pôvode, morfológii, veľkosti a ploidii tejto bunkovej línie. Okrem toho poskytne komplexné odpovede na nasledujúce otázky: Čo sú bunky T98G? Aký typ buniek predstavuje T98G? Odkiaľ pochádza T98G? Aké sú charakteristiky bunkovej línie T98G? Čo je to glioblastómová bunková línia T98G U87?
- Buněčná línia T98G bola založená GH Steinom. Tvorí ju fibroblastové bunky, ktoré boli získané z mozgového tkaniva 61-ročného muža kaukazského pôvodu s glioblastomom multiforme [1].
- Bunky T98G nie sú tumorigenické; pri injekčnom podaní nahým myšiam nespôsobujú nádory. V bunkovej kultúre však pri vhodnom ukotvení majú tendenciu k proliferácii.
- Tieto bunky majú morfológiu podobnú fibroblastom.
- Bunka glioblastómu T98G predstavuje hyperpentaploidiu. Modálny počet chromozómov sa pohybuje v rozmedzí 128 až 132. Vyššie ploidie sa môžu vyskytovať u 1,39 % buneckej populácie.
T98 vs. T98G
Obe sú ľudské bunkové línie glioblastómu a majú podobný pôvod. Jediným rozdielom medzi týmito bunkovými líniami je počet chromozómov. T98G má takmer dvojnásobný počet chromozómov v porovnaní s T98. Preto je T98G známa ako polyploidná varianta T98.
T98G vs. U87
U87 aj T98G sú ľudské bunkové línie glioblastómu používané vo výskume rakoviny mozgu. U87 vykazuje agresívnejší fenotyp v porovnaní s GBM T98G.
2. Informácie o kultivácii buneckej línie T98G
Pred začatím práce s bunkovou líniou je nevyhnutné poznať informácie o jej kultivácii. Pomôžu vám ľahko a pohodlne pracovať s bunkovou líniou v laboratóriu. Mali by ste vedieť: Aká je doba zdvojnásobenia buniek pre bunkovú líniu T98G? Aké kultivačné médium je pre bunky T98G najvhodnejšie? Aké sú rastové charakteristiky buniek T98G? Aká je hustota výsevu buniek T98G? Ako sa bunky T98G zmrazujú?
Kľúčové body kultivácie buniek T98G
Doba zdvojnásobenia:
Približná doba zdvojnásobenia buniek T98G je 40 hodín. Môže sa líšiť v závislosti od podmienok kultivácie.
Adherentné alebo v suspenzii:
Bunky T98G sú adhezívne. Prichytávajú sa k dnu kultivačných nádob a vytvárajú monovrstvy.
Pomer delenia:
Bunky T98G sa subkultivujú v pomere delenia 1:2 až 1:5. Na tento účel sa bunky najskôr premyjú 1 X PBS pufrom a potom sa inkubujú s pasážovacím roztokom (Accutase) počas 8 až 10 minút pri izbovej teplote. Po inkubácii sa uvoľnené bunky pridajú do čerstvého rastového média a odstreďujú sa. Následne sa získaný bunkový pelet opatrne resuspenduje a bunky sa nanesú do kultivačnej fľaše obsahujúcej rastové médium.
Rastové médium:
Na kultiváciu buniek T98G sa používa médium EMEM obsahujúce 10 % fetálneho bovinného séra, 2 mM L-glutamínu, 2,2 g/l NaHCO₃ a EBSS. Médium by sa malo vymieňať 3 až 4-krát týždenne.
Podmienky kultivácie:
Bunky T98G sa kultivujú vo zvlhčenom inkubátore nastavenom na 37 °C a pripojenom k zdroju CO₂.
Skladovanie:
Zmrazené bunky je možné skladovať pri teplote nižšej ako -150 °C alebo v parnej fáze tekutého dusíka, aby sa zachovala životaschopnosť buniek v dlhodobom horizonte.
Proces zmrazenia a médium:
Odporúča sa zmraziť bunky T98G v zmrazovacích médiách CM-1 alebo CM-ACF. Na tento účel sa odporúča pomalý proces zmrazovania, pri ktorom teplota klesá iba o 1 °C za minútu. Tým sa zabráni šoku buniek a zachová sa ich životaschopnosť.
Proces rozmrazovania:
Zmrazené bunky sa jemne rozmrazujú umiestnením do predhriateho vodného kúpeľa s teplotou 37 stupňov Celzia na 40 až 60 sekúnd. Následne sa resuspendujú v čerstvom rastovom médiu a prenesú do novej banky. Po 24 hodinách inkubácie sa médium vymení, aby sa odstránili zložky mraziaceho média.
Úroveň biologickej bezpečnosti:
Kultúry T98G sa udržiavajú v laboratóriu s úrovňou biologickej bezpečnosti 1.
Uverejnené: 2023 | Posledná revízia: máj 2026
- Bunka T98G: Výhody a nevýhody
- Využitie buniek T98G
- 2. Informácie o kultivácii buniek línie T98G
- Kľúčové body pre kultiváciu buniek T98G
- Všeobecné charakteristiky a pôvod buneckej línie T98G
- 5. Vedecké publikácie venované bunkám T98G
- Zdroje týkajúce sa buniek T98G: protokoly, videá a ďalšie materiály
- Často kladené otázky
Bunka T98G: Výhody a nevýhody
T98G je široko používaná bunková línia glioblastómu ľudského pôvodu. Má niekoľko výhod a nevýhod, ktoré ju odlišujú od ostatných. Niekoľko významných z nich je rozoberaných v tejto časti článku.
Výhody
Výhody buniek T98G sú:
-
Dobre charakterizovaná
Dobre etablovaná a dobre charakterizovaná bunková línia. Rozsiahlo študovaná a zdokumentovaná v odbornej literatúre.
-
In vitro model
Reprezentuje charakteristiky glioblastómu, najagresívnejšieho nádoru mozgu. Je cenným nástrojom pre výskum ochorenia, pochopenie biológie a vývoj liečby.
Nevýhody
Nevýhody spojené s bunkami T98G sú:
-
Heterogenita
Genetická heterogenita v populácii buniek T98G môže viesť k nekonzistentnosti experimentálnych výsledkov a sťažiť interpretáciu údajov.
Aplikácie buniek T98G
Bunka T98G je cenným nástrojom používaným vo výskume rakoviny. Tu je uvedených niekoľko hlavných výskumných aplikácií buniek T98G:
- Výskum rakoviny: Bunky T98G sú cenným nástrojom na skúmanie biológie glioblastómov. Tieto bunky sa používajú hlavne na štúdium zložitých molekulárnych dráh, ktoré sú základom vzniku a progresie glioblastómu. Okrem toho sa využívajú na identifikáciu genetických mutácií, ktoré riadia rast nádoru, a iných mechanizmov rakovinových buniek. Yang Chen a kolegovia pracovali s týmito bunkami a zistili, že nadmerná expresia miRNA-21 znižuje hladiny PDCD4 (proteín programovanej bunkovej smrti 4) v bunkách T98G. To vedie k inhibícii apoptózy buniek T98G sprostredkovanej proteínom PDCD4. Štúdia teda naznačuje, že miRNA-21 je potenciálnym cieľom pre vývoj terapií [2]. Podobne ako v tejto štúdii, Fanqiang Kong a jeho kolegovia skúmali úlohu mikroRNA-15a v proliferácii a invázii buniek glioblastómu T98G. Zistili, že miRNA-15a-5p podporuje tieto bunkové procesy tým, že pôsobí na molekulu bunkovej adhézie 1 (CADM1) [3].
- Testovanie liekov a vývoj liečebných postupov: T98G slúži ako vynikajúci in vitro model glioblastómu na skríning nových liekov a poskytuje platformu na hodnotenie účinnosti potenciálnych onkologických terapií. Výskumníci tiež testujú rôzne zlúčeniny a terapie s cieľom identifikovať a objaviť kandidátske lieky s najsľubnejšími protiglioblastómovými vlastnosťami. To vedie k vývoju nových liekov a liečebných stratégií, ktoré prinášajú nádej pacientom s glioblastómom. Jedna z takýchto štúdií skúmala protinádorový potenciál prírodnej zlúčeniny nazývanej corilagin v bunkovej línii T98G GBM rezistentnej na temozolomid. Zistenia štúdie naznačujú, že corilagin v kombinácii s temozolomidom vyvoláva v bunkách vyššiu úroveň antiproliferatívnych a antiapoptotických účinkov [4].
5. Vedecké publikácie zaoberajúce sa bunkami T98G
Nižšie sú uvedené niektoré zaujímavé a často citované vedecké publikácie o T98G, bunkovej línii glioblastómu.
Chemoterapeutický účinok SR9009, agonistu REV-ERB, na ľudské glioblastómové bunky T98G
Táto publikácia v časopise ASN Neuro (2019) skúmala protinádorové účinky agonistu REV-ERB s názvom SR9009 na glioblastómové bunky T98G.
Tento vedecký článok uverejnený v časopise Neurochemical Research (2019) navrhuje, že butyrát sodný a kvercetín synergicky inhibujú ochrannú autofágiu v bunkách T98G a zvyšujú apoptózu buniek.
Táto štúdia uverejnená v časopise Genes (2023) podrobila bunkovú líniu T98G adaptovanú na hypoxiu sekvenovaniu RNA a navrhla IRE1 (enzým 1 vyžadujúci inozitol) ako sľubný terapeutický cieľ.
Tento článok bol uverejnený v časopise Oncology Letters (2017). Štúdia zistila, že miRNA-548c-3p sa zameriava na onkogény T98G (c-Myb), čím inhibuje proliferáciu a migráciu buniek T98G.
Tento článok v časopise Journal of Medicinal Plants Research (2011) navrhuje, že chloroformový extrakt z Dracocephalum tanguticum vykazuje antiproliferatívne účinky na bunky T98G prostredníctvom modulácie génov kaspázy-3, Bax a p21.
Zdroje informácií o bunkách T98G: protokoly, videá a ďalšie materiály
Tu sú uvedené dostupné zdroje obsahujúce protokoly kultivácie a transfekcie buniek T98G.
- Transfekcia buniek T98G: Tento vedecký článok obsahuje protokol transfekcie buniek T98G. Stručne vysvetľuje metódu a potrebné reagencie.
Nasledujúce odkazy vám výrazne pomôžu zoznámiť sa s protokolom kultivácie buniek T98G a uľahčia vám prácu s nimi.
- Bunky T98G: Táto webová stránka obsahuje kľúčové informácie týkajúce sa protokolov kultivácie buniek T98G, vrátane subkultivácie a manipulácie s proliferatívnymi a kryokonzervovanými kultúrami. Okrem toho vám pomôže zoznámiť sa s kultivačnými médiami, podmienkami a dobou zdvojnásobenia buniek.
Referencie
- Haehl, E., Radioresistencia glioblastómu indukovaná endoteliálnymi bunkami. 2021, Universität Tübingen.
- Chen, Y., et al., MikroRNA-21 potláča expresiu tumorového supresora PDCD4 v ľudských glioblastómových bunkách T98G. Cancer letters, 2008. 272(2): s. 197–205.
- Kong, F., et al., MikroRNA‑15a‑5p podporuje proliferáciu a inváziu buniek glioblastómu T98G prostredníctvom pôsobenia na molekulu bunkovej adhézie 1. Oncology Letters, 2021. 21(2): s. 1–1.
- Milani, R., et al., Corilagin indukuje vysoké hladiny apoptózy v bunkovej línii gliómu T98G rezistentnej na temozolomid. Oncol Res, 2018. 26(9): s. 1307–1315.