Bunka BxPC-3
BxPC-3 je bunková línia rakoviny pankreasu pochádzajúca z ľudského organizmu. Široko sa využíva v štúdiách rakoviny. Výskumníci tieto bunky využívajú hlavne na štúdium biológie rakoviny pankreasu, identifikáciu terapeutických cieľov a vývoj protinádorových liekov.
- Rastové médium
- Na kultiváciu buniek línie BxPC-3 sa používa médium RPMI 1640. Na dosiahnutie ideálneho rastu buniek sa dopĺňa 10 % fetálnym bovinným sérom, 2,1 mM stabilným glutamínom a 2,0 g/l NaHCO3. Médium by sa malo vymieňať 2 až 3 krát týždenne.
- Doba zdvojnásobenia
- Doba zdvojnásobenia buniek BxPC-3 sa pohybuje v rozmedzí 48 až 60 hodín.
- Typ rastu
- BxPC-3 je adhezívna bunková línia.
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- BSL-3
- K dispozícii od
- Cytion — Objednajte si BxPC-3
Tento článok obsahuje dôležité informácie o bunkovej línii BxPC-3, ktoré vám môžu výrazne pomôcť pri práci s ňou. Hlavne sa bude zaoberať:
- Všeobecné informácie a pôvod buneckej línie BxPC-3
- Kultivácia buniek BxPC-3
- Bunková línia BxPC-3: Výhody a obmedzenia
- Využitie buniek BxPC-3 vo výskume
- Vedecké publikácie o bunkách BxPC-3
- Zdroje pre bunkovú líniu BxPC-3: protokoly, videá a ďalšie
Všeobecné informácie a pôvod buneckej línie BxPC-3
Poznanie pôvodu buneckej línie je kľúčové pre jej využitie vo výskume. Znalosť jej charakteristík, vrátane morfológie, veľkosti buniek a ploidie, uľahčuje a zjednodušuje jej použitie. V tomto článku sa dozviete o pôvode a všeobecných vlastnostiach buniek BxPC-3: Čo sú bunky BxPC-3? Čo je bunková línia BxPC-3? Aký je pôvod bunkovej línie BxPC-3? Aká je morfológia buniek BxPC-3?
- BxPC-3, bunky karcinómu pankreasu človeka, boli izolované v roku 1986 od 61-ročnej európskej ženy s adenokarcinómom pankreasu. Tieto bunky boli potvrdené ako tumorigenické aj po tom, čo pacientka podstúpila niekoľko sérií rádioterapie a chemoterapie. Vytvorená bunková línia je teda neoceniteľným modelom na štúdium vývoja a progresie rakoviny.
- Bunky BxPC-3 majú morfológiu podobnú epitelovým bunkám.
- Modálny počet chromozómov pre BxPC-3 je 59. Tieto bunky majú homozygotnú deléciu na chromozóme 18q, ktorý kóduje proteín SMAD4/DPC4. Okrem toho bunkovej línii chýba mutácia BxPC-3 kras, bežná u nádorov pankreasu. V týchto bunkách rakoviny pankreasu sa tiež nachádza delécia BxPC-3 braf.
Aký je rozdiel medzi BxPC3 a PANC-1?
Bunky BxPC-3 PADC (duktálny adenokarcinóm pankreasu) a PANC-1 sú primárne bunkové línie rakoviny pankreasu s epiteliálnou morfológiou. Prvé z nich majú viac epiteliálnych vlastností, zatiaľ čo druhé vykazujú viac mezenchýmových atribútov [1].
Kultivácia buniek BxPC-3
Bunka BxPC-3 je široko používaná v laboratóriách zaoberajúcich sa výskumom rakoviny. Pre efektívne kultivovanie tejto bunky rakoviny pankreasu je potrebné poznať nasledujúce kľúčové body. Dozviete sa: Aký je čas zdvojnásobenia buniek BxPC-3? Ako kultivovať bunky BxPC-3?
Kľúčové body kultivácie buniek BxPC-3
Doba zdvojnásobenia populácie:
Doba zdvojnásobenia buniek BxPC-3 sa pohybuje v rozmedzí 48 až 60 hodín.
Adherentné alebo v suspenzii:
BxPC-3 je adhezívna bunková línia.
Pomer rozdelenia:
Bunky BxPC-3 sa subkultivujú v pomere 1:2 až 1:4. Bunky sa premyjú 1 x PBS a inkubujú s pasážovým roztokom nazývaným accutase. Po 8–10 minútach sa k bunkám pridá čerstvé médium a bunky sa odstreďujú. Peleta sa opäť resuspenduje v médiu a bunky sa prelejú do novej kultivačnej nádoby na rast.
Rastové médium:
Na kultiváciu buniek línie BxPC-3 sa používa médium RPMI 1640. Je doplnené 10 % fetálnym bovinným sérom, 2,1 mM stabilným glutamínom a 2,0 g/l NaHCO3, aby sa dosiahol ideálny rast buniek. Kultivačné médium by sa malo vymieňať 2 až 3 krát týždenne.
Podmienky rastu:
Bunky kultúry BxPC-3 sa udržiavajú v zvlhčenom inkubátore pri teplote 37 °C pripojenom k zdroju 5 % CO2.
Skladovanie:
Mrazené bunky sa zvyčajne skladujú pri teplote nižšej ako -150 °C alebo vo fáze pary tekutého dusíka, aby sa zachovala životaschopnosť buniek.
Proces zmrazovania a médium:
Na zmrazenie bunkových kultúr BxPC-3 sa môže použiť CM-1 alebo CM-ACF. Používa sa proces pomalého zmrazovania, ktorý umožňuje pokles teploty iba o 1 °C, aby sa predišlo šoku buniek.
Proces rozmrazovania:
Zmrazené bunky BxPC-3 sa rozmrazujú v prednastavenom vodnom kúpeli pri teplote 37 °C po dobu 40 až 60 sekúnd. Po tom, čo zostane malá hrudka ľadu, sa do buniek pridá čerstvé kultivačné médium a centrifuguje sa, aby sa odstránili prvky mraziaceho média. Potom sa bunky resuspendujú a nanesú do fľaše na rast.
Úroveň biologickej bezpečnosti:
Bunky BxPC-3 sa kultivujú v laboratóriách s úrovňou biologickej bezpečnosti 1.
Bunka BxPC-3: Výhody a obmedzenia
BxPC-3 je dobre známa bunková línia pankreatického adenokarcinómu, ktorá má viacero výhod a obmedzení. Kľúčové výhody a nevýhody tejto bunkovej línie sú uvedené nižšie.
Výhody
Hlavné výhody buniek BxPC-3 sú:
-
In vitro model rakoviny pankreasu
Bunky BxPC-3, získané od pacientov s adenokarcinómom pankreasu, vykazujú relevantné charakteristiky, vďaka čomu sú vhodným modelom na štúdium správania rakoviny pankreasu in vitro.
-
Tumorigenická bunková línia
Bunky BxPC-3 majú tumorigenické vlastnosti a môžu vytvárať nádory, ak sa injikujú nahým alebo imunokompromitovaným myšiam. Tieto nádory sa veľmi podobajú primárnym nádorom adenokarcinómu pankreasu, čo robí xenotransplantačný model BxPC-3 ideálnym na štúdium rastu a progresie rakoviny.
Obmedzenia
Obmedzenia spojené s bunkovou líniou BxPC-3 sú:
-
Krížová kontaminácia
Bunka BxPC-3, rovnako ako akákoľvek iná, so sebou nesie riziko krížovej kontaminácie. Výskumníci by mali pri manipulácii s týmito bunkami postupovať opatrne a dodržiavať prísne protokoly na prevenciu kontaminácie.
-
Pomalá rýchlosť rastu
Bunky BxPC-3 vykazujú relatívne pomalú rýchlosť proliferácie, pričom doba zdvojnásobenia sa pohybuje v rozmedzí 48 až 60 hodín. Táto charakteristika môže vyžadovať dlhšie inkubačné obdobia pre špecifické experimenty, čo môže spôsobiť oneskorenia v priebehu výskumu.
Využitie buniek BxPC-3 vo výskume
Bunky BxPC-3 ponúkajú mnoho možností využitia vo výskume rakoviny. Najbežnejšie aplikácie sú:
- Výskum rakoviny pankreasu: Bunky BxPC-3 napodobňujú adenokarcinóm pankreasu, a preto sa používajú na skúmanie genetických a molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom vývoja a rastu nádoru. Okrem toho výskumníci pomocou týchto buniek objavujú nové biomarkery a terapeutické ciele. Okrem toho bunky BxPC-3 výrazne exprimujú angiogénne faktory, t. j. interleukín-8 (IL-8), prostaglandín E2 (PGE2) a vaskulárny endoteliálny rastový faktor (VEGF), vďaka čomu sú vhodné na štúdium angiogenézy. Angiogenéza je kľúčový proces spojený s rastom rakoviny a metastázami. Štúdia publikovaná v roku 2022 skúmala, že nadmerná expresia laminínu-5 gama-2 (LAMC2) v BxPC3 PDAC (duktálny adenokarcinóm pankreasu) zvyšuje jeho tumorigenézu prostredníctvom regulácie signálnej dráhy BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/mTOR [2].
- Objav a vývoj liekov: Bunková línia BxPC-3 slúži ako neoceniteľný model na testovanie protinádorových liekov. Výskumníci skúmajú cytotoxické, antimetastatické a apoptotické účinky potenciálnych liekov na BxPC3 PDAC. Štúdia, ktorú v roku 2020 vykonali Alexandria Turner a kolegovia, skúmala apoptotické vlastnosti extraktov z plodov Elaeocarpus reticulatus v bunkách rakoviny pankreasu BxPC-3 [3]. Podobne bol v roku 2020 vykonaný výskum, ktorý určil protinádorový potenciál metanolového extraktu z rastliny nazývanej Oxialis obtriangulata v bunkách BxPC-3. Okrem toho výskumníci tiež študovali mechanistickú cestu buniek, prostredníctvom ktorej rastlinný extrakt vykazoval terapeutické účinky [4].
5. Vedecké publikácie o bunkách BxPC-3
V tejto časti sú uvedené niektoré z najcitovanejších a najzaujímavejších publikácií venovaných bunkovej línii BxPC-3.
Licokumarón indukuje smrť buniek pankreatického adenokarcinómu BxPC-3 inhibíciou DYRK1A
Táto publikácia v časopise Chemico-Biological Interactions (2020) skúmala apoptotické účinky prírodného produktu, licokumarónu, na bunky pankreatického karcinómu BxPC-3.
Tento výskumný článok bol uverejnený v časopise Anticancer Research (2022). Štúdia navrhla, že hydroxychlorochín spôsobuje smrť buniek BxPC3 inhibíciou génu BCL-XL.
Tento výskum bol uverejnený v roku 2020 v časopise Journal of Cellular Biochemistry. Štúdia uvádza, že prírodná zlúčenina salidrosid vykazuje protinádorové účinky v bunkách BxPC-3 reguláciou signálnej kaskády HIF-1α (hypoxiou indukovateľný faktor) a LOXL2.
Tento článok v časopise Biomedicine & Pharmacotherapy naznačuje, že ibrutinib môže byť použitý ako vynikajúci rádiosenzibilizátor u pacientov s rakovinou pankreasu. In vitro štúdia na bunkách BxPC-3 naznačuje, že znižuje fosforyláciu EGFR v BxPC3 a expresiu pAKT a génov nižšie v signálnej dráhe, ktorých expresia je zvýšená rádioterapiou.
Táto štúdia uverejnená v časopise Integrative Cancer Therapies navrhuje, že prírodný produkt chelidonín vykazuje apoptotickú aktivitu v ľudských pankreatických bunkách BxPC-3 prostredníctvom regulácie signálnej dráhy BxPC3 p53 a GADD45a.
Zdroje pre bunkovú líniu BxPC-3: protokoly, videá a ďalšie
Bunka BxPC-3 má mnoho zaujímavých výhod, vďaka ktorým je vhodná na výskumné účely. Mnoho online zdrojov o bunke BxPC-3 spomína jej manipuláciu, údržbu a protokoly transfekcie.
- Transfekcia BxPC3: Toto video je podrobným návodom na naučenie sa protokolu transfekcie pre bunky BxPC-3.
Táto časť článku obsahuje niekoľko odkazov vysvetľujúcich protokoly kultivácie buniek BxPC3.
- Kultivácia buniek BxPC3: Táto webová stránka vám pomôže naučiť sa protokoly pre subkultiváciu a manipuláciu s kryokonzervovanými a proliferatívnymi kultúrami BxPC-3.
Referencie
- Kim, Y., et al., Porovnávacia proteomická charakteristika bunkových línií adenokarcinómu pankreatických vývodov. Mol Cells, 2014. 37(12): s. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Nadmerná expresia laminínu-5 gama-2 podporuje tumorigenézu adenokarcinómu pankreatických vývodov prostredníctvom kaskády EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): s. 362.
- Turner, A., et al., Extrakty z plodov Elaeocarpus reticulatus znižujú životaschopnosť a indukujú apoptózu v bunkách rakoviny pankreasu in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: s. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Protinádorový potenciál Oxialis obtriangulata v bunkách rakoviny pankreasu prostredníctvom regulácie dráhy sprostredkovanej ERK/Src/STAT3. Molecules, 2020. 25(10): s. 2301.