Meio de cultura celular

As células cultivadas requerem um controlo ambiental meticuloso para um crescimento e manutenção bem sucedidos. Uma abordagem abrangente envolve assegurar a esterilidade, o fornecimento de nutrientes, a estabilidade do pH e o controlo da temperatura.

Condições estéreis e fornecimento de nutrientes

Para evitar a contaminação e garantir a viabilidade das células, é crucial um ambiente estéril. Isto é normalmente conseguido através de técnicas assépticas e equipamento especializado, como capelas de fluxo laminar. Os nutrientes são fornecidos através de meios de cultura, que contêm uma mistura de ingredientes essenciais, incluindo:

  • Sais inorgânicos: Vitais para manter o equilíbrio osmótico e fornecer os iões necessários para as actividades celulares.
  • Hidratos de carbono: Servem como fontes de energia; a glucose é o açúcar mais comummente utilizado.
  • Aminoácidos: Os blocos de construção das proteínas; alguns são essenciais e não podem ser sintetizados pelas células.
  • Vitaminas: Actuam como co-factores em reacções enzimáticas; as vitaminas B são essenciais para o metabolismo celular.
  • Ácidos gordos e lípidos: Componentes essenciais para a integridade e função da membrana celular.
  • Proteínas e péptidos: Em meios isentos de soro, estes substituem os factores de crescimento e as proteínas de ligação normalmente fornecidos pelo soro.
  • Soro: Frequentemente incluído como fonte de factores de crescimento, embora as alternativas sem soro estejam a ganhar popularidade para reduzir a variabilidade e os riscos de contaminação.
  • estabilidade de pH e temperatura: As células requerem normalmente um intervalo de pH de 7,2-7,4 para um crescimento ótimo. Este é regulado por sistemas tampão, que podem ser baseados em CO2/bicarbonato ou obtidos quimicamente utilizando agentes como o HEPES. A temperatura é mantida em torno de 37°C para imitar as condições fisiológicas.

Variantes e otimização dos meios

Ao longo dos anos, foram desenvolvidos vários meios basais para responder a tipos de células específicos:

  • Soluções salinas equilibradas: Formam a base de formulações de meios mais complexas.
  • Os meiosbasais, como o Meio Essencial Mínimo (MEM), são utilizados para culturas primárias e células diplóides.
  • Meios complexos: Como o RPMI 1640, são adequados para uma gama mais alargada de células de mamíferos.
  • Meios isentos de soro: Adaptados para aplicações específicas, reduzindo o risco de contaminação por componentes derivados de animais.

Preparação de meios e controlo de qualidade

Os meios podem ser preparados internamente a partir de ingredientes essenciais ou adquiridos como soluções prontas. O controlo de qualidade implica garantir a ausência de contaminantes e a concentração adequada dos ingredientes. A reconstituição de meios em pó requer água de alta qualidade, e os meios preparados devem ser esterilizados, normalmente por filtração.

Utilização de soro e considerações de segurança

A utilização de soro, particularmente soro fetal bovino (FBS), é comum devido ao seu rico conteúdo de factores de crescimento. No entanto, devido a preocupações com doenças como a BSE, são seguidos testes rigorosos e protocolos de fornecimento para garantir a segurança.

Diretrizes e tendências regulamentares

Os regulamentos orientam os materiais derivados de animais nas culturas, enfatizando a importância do fornecimento e dos testes. A tendência para eliminar esses materiais sempre que possível reflecte-se no desenvolvimento de alternativas de meios sem soro e sem animais.

Em conclusão, os meios de cultura celular desempenham um papel fundamental no crescimento e manutenção das células in vitro. Cada componente é cuidadosamente selecionado e optimizado para imitar o ambiente in vivo, assegurando que as células têm condições de crescimento, sobrevivência e funcionalidade.

DMEM, w: 4,5 g/L Glicose, w: 4 mM L-Glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Piruvato de sódio
O DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) é um meio basal altamente versátil e amplamente utilizado, concebido para suportar o crescimento de uma gama diversificada de células de mamíferos em investigação biológica. Serve como meio ideal para a cultura de fibroblastos primários, neurónios, células gliais, HUVECs, células musculares lisas, bem como linhas celulares populares como HeLa, 293, Cos-7 e PC-12.
O que distingue o DMEM de outros meios é a sua composição única. Contém um impressionante aumento de quatro vezes na concentração de aminoácidos e vitaminas em comparação com o Eagle's Minimal Essential Medium original. Inicialmente desenvolvido com baixo teor de glucose (1 g/L) e piruvato de sódio, o DMEM é frequentemente utilizado com níveis de glucose mais elevados, com ou sem piruvato de sódio. O DMEM não contém proteínas, lípidos ou factores de crescimento, o que torna necessária a sua suplementação. Para obter um crescimento ótimo, uma abordagem comum é suplementar o DMEM com 10% de Soro Fetal Bovino (FBS). Além disso, o DMEM emprega um sistema tampão de bicarbonato de sódio, exigindo um ambiente de 5-10% de CO2 para manter um pH fisiológico.
O Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) é altamente considerado entre os meios definidos para cultura de células e tecidos, satisfazendo as necessidades de crescimento de vários fenótipos de células aderentes. Ultrapassa o Meio de Eagle original, desenvolvido nos anos 50 para cultivar células de galinha, através da formulação suplementar melhorada conhecida como modificação de Dulbecco. Esta modificação aumenta significativamente o conteúdo de aminoácidos e vitaminas selecionados até quatro vezes em comparação com o meio original.
No campo da cultura de células, o DMEM desempenha um papel vital como meio de crescimento para diferentes tipos de células, incluindo células primárias, células estaminais e células transformadas. Os investigadores também utilizam a versão modificada do DMEM para uma vasta gama de aplicações de investigação, como a descoberta de medicamentos, a engenharia de tecidos e o estudo das vias de sinalização celular.

Controlo de Qualidade

Estéril-filtrado


Armazenamento e prazo de validade

Armazenar a +2°C a +8°C, protegido da luz.
Depois de aberto, armazenar a 4°C e utilizar no prazo de 6-8 semanas.


Condições de transporte

Temperatura ambiente


Manutenção

Manter refrigerado a uma temperatura entre +2°C e +8°C, ao abrigo da luz. Evitar a congelação e o aquecimento frequente a +37°C, uma vez que reduz a qualidade do produto.
Não aquecer o meio para além de 37°C nem utilizar fontes de calor não controladas, tais como aparelhos de micro-ondas.
Se apenas uma parte do meio for utilizada, retirar a quantidade necessária e aquecê-la à temperatura ambiente antes de a utilizar.


Composição



Categoria
Componentes
Concentração (mg/L)


Aminoácidos
Glicina
30.00



L-Arginina HCl
84.00



L-Cistina 2 HCl
62.57



L-Glutamina
584.00



L-Histidina HCl H2O
42.00



L-Isoleucina
105.00



L-Leucina
105.00



L-Lisina HCl
146.00



L-Metionina
30.00



L-fenilalanina
66.00



L-Serina
42.00



L-Treonina
95.00



L-Triptofano
16.00



L-tirosina 2 Na 2H2O
103.79



L-Valina
94.00


Vitaminas
Cloreto de colina
4.00



Pantotenato de D-Cálcio
4.00



Ácido fólico
4.00



myo-Inositol
7.20



Nicotinamida
4.00



Piridoxal HCl
4.00



Riboflavina
0.40



Tiamina HCl
4.00


Sais inorgânicos
CaCl2 2 H2O
265.00



Fe(NO3)3 9 H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Outros componentes
D-Glucose
4500.00



Sal de sódio de vermelho de fenol
15.90



Piruvato de sódio
110.00

25,00 €*
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS
Um dos meios sintéticos de cultura de células mais utilizados é o Minimum Essential Medium Eagle (MEM). Desenvolvido por Harry Eagle, este meio foi introduzido pela primeira vez em 1959 e desde então tornou-se uma escolha popular para vários tipos de células cultivadas em monocamadas e linhas celulares aderentes.
O que é que o EMEM contém?
O EMEM é uma versão modificada do meio essencial mínimo de Eagle, contendo a solução salina equilibrada de Earle, aminoácidos não essenciais, L-glutamina, piruvato de sódio e bicarbonato de sódio. É importante notar que este nível de bicarbonato de sódio se destina a ser utilizado em 5% de CO2 no ar. Para manter a sua eficácia, recomenda-se que o meio seja armazenado entre 2°C e 8°C, no escuro, quando não estiver a ser utilizado.
Para que é utilizado o EMEM?
O meio essencial mínimo de Eagle (EMEM) é um meio de cultura celular que pode manter as células em cultura de tecidos. O meio contém concentrações mais elevadas de aminoácidos, permitindo uma aproximação mais exacta da composição proteica das células de mamíferos em cultura. O EMEM pode ser utilizado para cultivar várias células, incluindo fibroblastos, células da linha celular do cancro do fígado humano (HepG2) e células astrocitárias derivadas de progenitores cerebrais fetais humanos (PDA). É normalmente utilizado na presença de soro fetal bovino (FBS), soro de vitelo ou de cavalo.
Em que é que o EMEM é diferente de outros meios de cultura de células?
Embora o EMEM e o meio de Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) partilhem algumas semelhanças, também são diferentes. Ambos os meios carecem de proteínas e contêm os aminoácidos, sais, glucose e vitaminas necessários para fornecer energia a uma célula e mantê-la em cultura de tecidos. No entanto, a formulação DMEM é modificada para conter até quatro vezes mais vitaminas e aminoácidos e duas a quatro vezes mais glucose do que o EMEM. Vale a pena notar que o EMEM também é diferente da formulação original do MEM.


Controlo de qualidade

Estéril-filtrado


Armazenamento e prazo de validade

Armazenar entre +2°C e +8°C, protegido da luz.
Depois de aberto, conservar a 4°C e utilizar no prazo de 6-8 semanas.


Condições de transporte

Temperatura ambiente


Conservação

Manter refrigerado a uma temperatura entre +2°C e +8°C, ao abrigo da luz. Evitar o congelamento e o aquecimento frequente a +37°C, uma vez que reduz a qualidade do produto.
Não aquecer o meio para além de 37°C nem utilizar fontes de calor não controladas, tais como aparelhos de micro-ondas.
Se apenas uma parte do meio for utilizada, retirar a quantidade necessária e aquecê-la à temperatura ambiente antes de a utilizar.



Composição



Categoria
Componentes
Concentração (mg/L)


Aminoácidos
L-Arginina HCl
126.00


L-Cistina 2 HCl
31.30


L-Glutamina
292.00


L-Histidina HCl H2O
42.00


L-Isoleucina
52.00


L-Leucina
52.00


L-Lisina HCl
72.50


L-Metionina
15.00


L-fenilalanina
32.00


L-Treonina
48.00


L-Triptofano
10.00


L-tirosina 2 Na 2 H2O
51.90


L-Valina
46.00


Vitaminas
Cloreto de colina
1.00


Vitaminas
Pantotenato de D-Cálcio
1.00


Ácido fólico
1.00


myo-Inositol
2.00


Nicotinamida
1.00


Piridoxal HCl
1.00


Riboflavina
0.10


Tiamina HCl
1.00


Sais inorgânicos
CaCl2 2 H2O
265.00


Sais inorgânicos
KCl
400.00


MgSO4
97.67


NaCl
6800.00


NaHCO3
2200.00


NaH2PO4
122.00


Outros componentes
D-Glucose
1000.00


Outros componentes
Sal de sódio de vermelho de fenol
11.00

25,00 €*
Meio Ham's F12, com: 1,0 mM de glutamina estável, com: 1,0 mM de piruvato de sódio, com: 1,176 g/L NaHCO3
O Ham's F-12 Medium, também conhecido como Ham's F-12 Nutrient Mix, é um meio basal amplamente utilizado, concebido especificamente para cultura de células. Tem sido amplamente utilizado para o plaqueamento de células individuais, sem soro, de células de ovário de hamster chinês (CHO), células pulmonares e células L de ratinho. Além disso, o Ham's F-12 é o meio de eleição para um Ensaio de Toxicidade Clonal (CTA).
Uma das suas vantagens notáveis é a capacidade de suportar o crescimento celular sem a necessidade de suplementação com soro. Isto elimina a potencial interferência causada pelos componentes do soro, garantindo resultados experimentais consistentes e fiáveis. Ao proporcionar um ambiente de cultura sem soro, o Ham's F-12 Medium oferece aos investigadores um maior controlo sobre as suas investigações.
Outra caraterística fundamental do Ham's F-12 Medium é a sua aptidão para o plaqueamento de células individuais. Isto torna-o uma excelente escolha para uma variedade de linhas celulares, incluindo células CHO, células pulmonares e células L de rato. A composição optimizada de nutrientes do meio facilita a fixação e o crescimento eficientes de células individuais, permitindo o estabelecimento de culturas celulares homogéneas com uma reprodutibilidade melhorada.
Além disso, o meio Ham's F-12 ganhou reconhecimento como o meio preferido para o Ensaio de Toxicidade Clonal (CTA). Este ensaio desempenha um papel fundamental na avaliação dos efeitos citotóxicos das substâncias nas células. Ao utilizar o meio Ham's F-12 no CTA, os investigadores podem avaliar com precisão o impacto de vários compostos ou tratamentos em células individuais, fornecendo informações valiosas sobre perfis toxicológicos.
Controlo de qualidade

pH = 7,2 +/
- 0,02 a 20-25°C.
Cada lote foi testado quanto à esterilidade e ausência de micoplasma e bactérias.

Manutenção

Conservar no frigorífico a uma temperatura entre +2°C e +8°C, ao abrigo da luz. O congelamento e o aquecimento até +37° C minimizam a qualidade do produto.
Não aquecer o meio a mais de 37° C ou utilizar fontes de calor incontroláveis (por exemplo, aparelhos de micro-ondas).
Se apenas uma parte do meio for utilizada, retirar essa quantidade do frasco e aquecê-la à temperatura ambiente.
O prazo de validade de qualquer meio, com exceção do meio básico, é de 8 semanas a partir da data de fabrico.

Composição




Componentes
mg/L


Sais inorgânicos
Cloreto de cálcio x 2H2O
44,00



Sulfato de cobre(II) x 5H2O
0,00



Sulfato de ferro (II) x 7H2O
0,83



Cloreto de magnésio x 6H2O
122,00



Cloreto de potássio
223,65



Cloreto de sódio
7599,00



hidrogenofosfato de di-sódioanidro
142,04



Sulfato de zinco x 7H2O
0,86


Outros componentes
D(+)-Glucose anidra
1801,60



Hipoxantina
4,08



Ácido linoleico
0,08



Ácido DL-α-lipóico
0,21



Vermelho de fenol
1,20



Putrescina x 2HCl
0,16



Piruvato de sódio
110,00



Timidina
0,73



NaHCO3
1176,00


Aminoácidos
L-Alanina
8,91



L-Arginina x HCl
210,70



L-Asparagina x H2O
15,01



Ácido L-aspártico
13,31



L-cisteína x HCl x H2O
35,12



L-Alanil-L-Glutamina
217,30



Ácido L-Glutâmico
14,71



Glicina
7,51



L-Histidina x HCl x H2O
20,96



L-Isoleucina
3,94



L-Leucina
13,12



L-Lisina x HCl
36,54



L-Metionina
4,48



L-fenilalanina
4,96



L-Prolina
34,53



L-Serina
10,51



L-Treonina
11,91



L-Triptofano
2,04



L-tirosina
5,44



L-Valina
11,71


Vitaminas
D(+)-Biotina
0,01



D-Pantotenato de cálcio
0,24



Cloreto de colina
13,96



Ácido fólico
1,32



myo-Inositol
18,02



Nicotinamida
0,04



Piridoxina x HCl
0,06



Riboflavina
0,04



Tiamina x HCl
0,34



Vitamina B12
1,36

25,00 €*
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glicose, w: 2,5 mM L-Glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Piruvato de sódio, w: 1,2 g/L NaHCO3
O DMEM:Ham's F12 é um meio basal amplamente reconhecido e amplamente utilizado na cultura de células para investigação biológica. Serve como uma fonte fundamental de nutrientes para o crescimento de várias linhas celulares de mamíferos, particularmente quando suplementado com Soro Fetal Bovino (FBS).

Esta formulação única combina o Meio Eagle Modificado de Dulbecco (DMEM) e Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) num rácio preciso de 1:1. A adição de L-glutamina melhora ainda mais a sua composição.

O DMEM, derivado do Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), oferece uma maior concentração de aminoácidos e vitaminas em comparação com o seu antecessor. Em contrapartida, o Ham's F-12 baseia-se no meio Ham's F-10, fornecendo um conjunto complementar de componentes essenciais.

Para apoiar um crescimento celular ótimo, é prática comum suplementar o DMEM:Ham's F12 com FBS a uma concentração típica de 5-10%. Esta adição é necessária porque o meio carece de hormonas de crescimento, lípidos e proteínas cruciais para o desenvolvimento celular.

O DMEM:Ham's F12 incorpora um sistema tampão de pH e é frequentemente suplementado com vermelho de fenol, um indicador de pH. As células cultivadas em DMEM:Ham's F12, ou em qualquer meio que utilize o sistema tampão de bicarbonato, requerem um ambiente controlado de CO2 de 5-10% para manter níveis de pH adequados.


Controlo de qualidade

Estéril-filtrado


Armazenamento e prazo de validade

Armazenar entre +2°C e +8°C, protegido da luz.
Depois de aberto, conservar a 4°C e utilizar no prazo de 6-8 semanas.


Condições de transporte

Temperatura ambiente


Manutenção

Manter refrigerado a uma temperatura entre +2°C e +8°C, ao abrigo da luz. Evitar o congelamento e o aquecimento frequente a +37°C, uma vez que reduz a qualidade do produto.
Não aquecer o meio para além de 37°C nem utilizar fontes de calor não controladas, tais como aparelhos de micro-ondas.
Se apenas uma parte do meio for utilizada, retirar a quantidade necessária e aquecê-la à temperatura ambiente antes de a utilizar.


Composição



Categoria
Componentes
Concentração (mg/L)


Aminoácidos
Glicina
18.75


L-Alanina
4.45


L-Arginina HCl
147.50


L-Asparagina H₂O
7.50


Ácido L-aspártico
6.65


L-Cisteína HCl H₂O
17.56


L-Cistina 2 HCl
31.29


Ácido L-Glutâmico
7.35


L-Glutamina
365.00


L-Histidina HCl H₂O
31.48


L-Isoleucina
54.47


L-Leucina
59.05


L-Lisina HCl
91.25


L-Metionina
17.24


L-fenilalanina
35.48


L-Prolina
17.25


L-Serina
26.25


L-Treonina
53.45


L-Triptofano
9.02


Sal dissódico de L-tirosina
48.10


L-Valina
52.85


Vitaminas
D-Biotina
0.0035


Cloreto de colina
8.98


Pantotenato de D-Cálcio
2.24


Ácido fólico
2.66


myo-Inositol
12.60


Nicotinamida
2.02


Piridoxina HCl
0.031


Piridoxal HCl
2.00


Riboflavina
0.219


Tiamina HCl
2.17


Vitamina B12
0.68


Sais inorgânicos
CaCl₂ 2 H₂O
154.50



CuSO₄ 5 H₂O
0.0013



Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05



FeSO₄ 7 H₂O
0.417



KCl
311.80



MgCl₂ 6 H₂O
61.20



MgSO₄
48.84



NaCl
6996.00



NaHCO₃
1200.00



Na₂HPO₄
71.02



NaH₂PO₄
54.30



ZnSO₄ 7 H₂O
0.432


Outros componentes
D-Glucose
3151.00


Hipoxantina
2.40


HEPES
3574.50


Ácido linoleico
0.042


Ácido lipóico
0.105


Sal de sódio de vermelho de fenol
8.63


Putrescina 2 HCl
0.081


Piruvato de sódio
55.00


Timidina
0.365

25,00 €*
Meio Ham's F12K, com: 2,0 mM L-Glutamina, com: 2,0 mM Piruvato de sódio, com: 2,5 g/L NaHCO3
Apresentamos o meio Ham's F-12K (Kaighn's), uma modificação especializada do meio Ham's F-12 concebida para satisfazer os requisitos únicos da investigação biológica. Este meio avançado oferece vantagens distintas, melhorando o cultivo de hepatócitos humanos primários, bem como de células de fígado de rato e galinha, particularmente em condições de soro reduzido.

O meio Ham's F-12K (Kaighn's) é cuidadosamente formulado para otimizar as condições de cultura de células. Apresenta uma composição enriquecida, fornecendo níveis elevados de componentes essenciais, tais como aminoácidos e piruvato de sódio, bem como elementos adicionais, incluindo putrescina, timidina, hipoxantina e zinco. Estas adições permitem aos investigadores suplementar o meio com um mínimo de soro ou componentes definidos para tipos de células específicos, facilitando condições experimentais precisas.

Em particular, o meio Ham's F-12K (Kaighn's) não contém proteínas ou factores de crescimento. Consequentemente, a suplementação com factores de crescimento e Soro Fetal Bovino (FBS) é frequentemente necessária, permitindo aos investigadores adaptar o meio aos requisitos das suas linhas celulares específicas. Para um desempenho ótimo, a concentração de FBS deve ser cuidadosamente optimizada para cada linha celular, assegurando um crescimento e funcionalidade óptimos.

Para manter o pH fisiológico, o meio Ham's F-12K (Kaighn's) emprega um sistema tampão de bicarbonato de sódio (2,5 g/L), necessitando de um ambiente controlado de 5-10% de CO2 durante o cultivo. Isto assegura que o pH do meio se mantém dentro do intervalo ideal para o crescimento e viabilidade das células
Controlo de qualidade

pH = 7,2 +/
- 0,02 a 20-25°C.
Cada lote foi testado quanto à esterilidade e ausência de micoplasma e bactérias.

Manutenção

Manter refrigerado a uma temperatura entre +2°C e +8°C, ao abrigo da luz. O congelamento e o aquecimento até +37°C minimizam a qualidade do produto.
Não aquecer o meio a mais de 37°C ou utilizar fontes de calor incontroláveis (por exemplo, aparelhos de micro-ondas).
Se apenas uma parte do meio for utilizada, retire essa quantidade do frasco e aqueça-a à temperatura ambiente.
O prazo de validade de qualquer meio, exceto o meio básico, é de 8 semanas a partir da data de fabrico.

Composição




Componentes
mg/L


Sais inorgânicos
Cloreto de cálcio x 2H2O
135,24



Sulfato de cobre(II) x 5H2O
0,00



Sulfato de ferro (II) x 7H2O
0,83



Cloreto de magnésio x 6H2O
105,72



Sulfato de magnésio x 7H2O
394,49



Cloreto de potássio
283,29



Di-hidrogenofosfato de potássio
58,52



Cloreto de sódio
7597,20



hidrogenofosfato de di-sódioanidro
115,02



Sulfato de zinco x 7H2O
0,14


Outros componentes
D(+)-Glucose anidra
1260,00



Hipoxantina
4,08



Ácido DL-α-lipóico
0,21



Vermelho de fenol
3,00



Putrescina x 2HCl
0,32



Piruvato de sódio
220,00



NaHCO3
2500,00



Timidina
0,73


Aminoácidos
L-Alanina
17,82



L-Arginina x HCl
421,40



L-Asparagina x H2O
30,02



Ácido L-aspártico
26,62



L-cisteína x HCl x H2O
70,24



L-Glutamina
292,20



Ácido L-Glutâmico
29,42



Glicina
15,01



L-Histidina x HCl x H2O
41,92



L-Isoleucina
7,87



L-Leucina
26,24



L-Lisina x HCl
73,04



L-Metionina
8,95



L-fenilalanina
9,91



L-Prolina
69,06



L-Serina
21,02



L-Treonina
23,82



L-Triptofano
4,08



L-tirosina
10,87



L-Valina
23,42


Vitaminas
D(+)-Biotina
0,07



D-Pantotenato de cálcio
0,48



Cloreto de colina
13,96



Ácido fólico
1,32



myo-Inositol
18,02



Nicotinamida
0,04



Piridoxina x HCl
0,06



Riboflavina
0,04



Tiamina x HCl
0,34



Vitamina B12
1,36

108,00 €*
Meio McCoys 5A (modificado), com: 3,0 g/L Glucose, com: Glutamina estável, com: 2,0 mM Piruvato de sódio, com: 2,2 g/L NaHCO3
O meio 5A da McCoy é um meio altamente recomendado e especializado, concebido para facilitar o crescimento e a replicação de vírus em culturas de células primárias. Ganhou reconhecimento significativo pelo seu desempenho excecional em várias aplicações de investigação biológica. Uma aplicação proeminente do meio McCoy's 5A é a sua utilização na cultura de linhas celulares de carcinoma do cólon humano. Especificamente, tem sido empregado no estudo do receptor acoplado à proteína G rico em repetições de leucina (LGR5) e o seu papel na metástase do cancro do cólon. Este meio tem sido efetivamente empregado no cultivo de várias linhas celulares de carcinoma do cólon, incluindo HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b e TENN, permitindo aos investigadores aprofundar os mecanismos subjacentes à metástase do cancro do cólon. Além da sua aplicação na investigação do cancro, o meio McCoy's 5A provou ser indispensável no estudo dos osteoblastos. Os investigadores que estudam a reatividade iónica da hidroxiapatita deficiente em cálcio em meios de cultura celular padrão têm utilizado este meio para cultivar osteoblastos. Esta aplicação facilitou uma melhor compreensão das interações entre os osteoblastos e a hidroxiapatita deficiente em cálcio, contribuindo para os avanços no campo da investigação óssea. O meio McCoy's 5A foi meticulosamente formulado através da modificação dos aminoácidos encontrados no meio basal Eagle para fornecer suporte ideal às células tumorais do fígado. Esta formulação enriquecida permite a sua adequação a uma gama diversificada de linhas celulares estabelecidas, bem como a células primárias, aumentando ainda mais a sua versatilidade e aplicabilidade em vários contextos de investigação. O meio McCoy's 5A estende os seus efeitos bioquímicos e fisiológicos para além das células tumorais do fígado. Tem sido utilizado com sucesso para apoiar o crescimento em culturas primárias de medula óssea, pele, gengiva, rim, omento, adrenal, pulmão, baço, embrião de rato e outros tipos de células. Esta ampla gama de aplicações atesta a grande utilidade do meio McCoy's 5A no apoio ao crescimento e manutenção de vários tipos de células para uma investigação biológica abrangente. Formulação Este meio McCoy's 5A (modificado) contém 3,0 g/L de glicose, glutamina estável, 2,0 mM de piruvato de sódio e 2,2 g/L de NaHCO3. Controlo de qualidade pH = 7,2 +/
- 0,02 a 20-25 °C.  Cada lote foi testado quanto à esterilidade e ausência de micoplasma e bactérias. Manutenção Manter refrigerado entre +2 °C e +8 °C, ao abrigo da luz. A congelação e o aquecimento até +37 °C minimizam a qualidade do produto.  Não aqueça o meio a mais de 37 °C nem utilize fontes de calor incontroláveis (por exemplo, aparelhos de micro-ondas).  Se apenas uma parte do meio for utilizada, retire essa quantidade do frasco e aqueça-a à temperatura ambiente. O prazo de validade de qualquer meio, exceto o meio básico, é de 6 a 8 semanas a partir da data de abertura. Composição Componentes mg/L Sais inorgânicosCloreto de cálcio x 2H2O132,00 Sulfato de magnésio97,67 Cloreto de potássio400 Cloreto de sódio6.460,00 Hidrogenofosfato dissódico (anidro)504,00 Outros componentesD(+)-Glicose (anidro)3.000,00 Glutationa (reduzida)0,5 Peptona de carne600,00 Sal de sódio do vermelho fenol11 AminoácidosL-alanina13,36 L-arginina x HCl42,14 L-Asparagina x H2O45,03 Ácido L-aspártico19,97 L-Cisteína x HCl x H2O31,75 L-glutamina (estável)219,15 Ácido L-glutâmico22,07 Glicina7,51 L-histidina x HCl x H2O20,96 L-hidroxiprolina19,67 L-isoleucina39,36 L-leucina39,36 L-Lisina x HCl36,54 L-Metionina14,92 L-fenilalanina16,52 L-Prolina17,27 L-Serina26,28 L-treonina17,87 L-triptofano3,06 Sal dissódico de L-tirosina26,10 L-Valina17,57 VitaminasÁcido p-aminobenzóico1,0 Ácido ascórbico0,56 D(+)-Biotina0,20 D-Pantotenato de cálcio0,20 Cloreto de colina5,0 Ácido fólico10,0 Mio-inositol36,00 Nicotinamida0,50 Ácido nicotínico0,5 Cloridrato de piridoxal0,50 Cloridrato de piridoxina0,50 Riboflavina0,20 Cloridrato de tiamina0,20 Vitamina B122,0

30,00 €*
IMDM, w: 4,5 g/L Glicose, w: 4 mM L-Glutamina, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM Piruvato de sódio, w: 3,024 g/L NaHCO3
O meio Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) é um meio de crescimento complexo e enriquecido para cultura de células. O IMDM é uma modificação do DMEM que contém selénio e tem aminoácidos, vitaminas e sais inorgânicos adicionais em comparação com o DMEM. Não possui ferro e requer suplementação com Soro Fetal Bovino (FBS). O IMDM utiliza um sistema tampão de bicarbonato de sódio e requer um ambiente com 5-10% de CO2 para manter o pH fisiológico.
O IMDM é adequado para culturas de células de alta densidade e de rápida proliferação, incluindo células Jurkat, COS-7 e macrófagos. As várias modificações de IMDM disponíveis para uma gama de aplicações de cultura de células podem ser encontradas utilizando a ferramenta de seleção de meios. Os meios líquidos fornecem nutrientes essenciais para todas as aplicações de cultura de células. Cada um dos nossos meios de cultura celular de alta qualidade é fabricado de acordo com a fórmula inicialmente publicada ou com as modificações necessárias para o desempenho consistente e a estabilidade do meio de cultura.
IMDM vs. DMEM
O IMDM contém nitrato de potássio em vez de nitrato férrico e HEPES e piruvato de sódio. Os componentes adicionais no IMDM tornam-no mais adequado para tipos de células especializadas e aplicações específicas do que o DMEM.
IMDM vs. RPMI
O IMDM e o RPMI têm formulações diferentes que podem ser relevantes para a estimulação com PMA/ionomicina. Uma diferença significativa é a concentração de Ca2+. Enquanto o RPMI contém 0,42 mM de Ca2+, o IMDM contém 1,49 mM.
Controlo de qualidade

pH = 7,2 +/
- 0,02 a 20-25°C.
Cada lote foi testado quanto à esterilidade e ausência de micoplasma e bactérias.

Manutenção

Manter refrigerado a uma temperatura entre +2°C e +8°C, ao abrigo da luz. O congelamento e o aquecimento até +37° C minimizam a qualidade do produto.
Não aquecer o meio a mais de 37° C ou utilizar fontes de calor incontroláveis (por exemplo, aparelhos de micro-ondas).
Se apenas uma parte do meio for utilizada, retirar essa quantidade do frasco e aquecê-la à temperatura ambiente.
O prazo de validade de qualquer meio, com exceção do meio básico, é de 8 semanas a partir da data de fabrico.
Composição




Componentes
mg/L


Sais inorgânicos
Cloreto de cálcio x 2 H2O
219,00



Cloreto de potássio
330,00



Nitrato de potássio
0.076



Sulfato de magnésio anidro
97,73



Cloreto de sódio
4,505.00



Dihidrogenofosfato de sódio anidro
109,00



Selenito de sódio
0,02


Outros componentes
D(+)-Glucose anidra
4,500.00



HEPES
5,958.00



Piruvato de sódio
110,00



Vermelho de fenol
15,00


Aminoácidos
L-Alanina
25,00



L-Arginina x HCl
84,00



L-Asparagina x H2O
25,00



Ácido L-aspártico
30,00



L-Cistina x 2HCl
91,24



L-Glutamina
584,00



Ácido L-Glutâmico
75,00



Glicina
30,00



L-Histidina x HCl x H2O
42,00



L-Isoleucina
104,80



L-Leucina
104,80



L-Lisina x HCl
146,20



L-Metionina
30,00



L-fenilalanina
66,00



L-Prolina
40,00



L-Serina
42,00



L-Treonina
95,20



L-Triptofano
16,00



L-Tirosina x 2Na
104,20



L-Valina
93,60


Vitaminas
D(+)-Biotina
0.013



D-Pantotenato de cálcio
4,00



Cloreto de colina
4,00



Ácido fólico
4,00



myo-Inositol
7,20

25,00 €*
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3
O meio RPMI 1640, também conhecido como meio RPMI, é um meio de cultura de células altamente versátil, amplamente utilizado na investigação biológica para cultivar várias células de mamíferos. Desenvolvido por George E. Moore, Robert E. Gerner e H. Addison Franklin em 1966 no famoso Roswell Park Comprehensive Cancer Center, este meio derivou o seu nome da sua origem no Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Inicialmente concebido para suportar o crescimento de células leucémicas humanas em culturas em suspensão e em monocamada, o meio RPMI 1640 evoluiu através de modificações efectuadas por investigadores e fornecedores comerciais para se tornar adequado a uma gama diversificada de células de mamíferos. É excecionalmente compatível com linhas celulares como HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrócitos e carcinomas.
O meio RPMI 1640 distingue-se de outros meios de cultura de células devido à sua composição única. Contém uma quantidade substancial de fosfato, aminoácidos e vitaminas. Nomeadamente, inclui biotina, vitamina B12 e PABA, ausentes no Eagle's Minimal Essential Medium ou no Dulbecco's Modified Eagle Medium. Além disso, o meio RPMI 1640 apresenta concentrações significativamente elevadas de vitaminas inositol e colina. No entanto, não contém proteínas, lípidos ou factores de crescimento. Consequentemente, a suplementação com 10% de Soro Fetal Bovino (FBS) é normalmente necessária para proporcionar condições óptimas para o crescimento celular.
O sistema tampão do meio RPMI 1640 baseia-se no bicarbonato de sódio e necessita de um ambiente com 5-10% de CO2 para manter um pH fisiologicamente adequado. A inclusão do agente redutor glutatião distingue ainda mais este meio dos outros.
Controlo de qualidade

Estéril-filtrado


Armazenamento e prazo de validade

Armazenar entre +2°C e +8°C, protegido da luz.
Depois de aberto, conservar a 4°C e utilizar no prazo de 6-8 semanas.


Condições de transporte

Temperatura ambiente


Manutenção

Manter refrigerado a uma temperatura entre +2°C e +8°C, ao abrigo da luz. Evitar a congelação e o aquecimento frequente a +37°C, uma vez que reduz a qualidade do produto.
Não aquecer o meio para além de 37°C nem utilizar fontes de calor não controladas, tais como aparelhos de micro-ondas.
Se apenas uma parte do meio for utilizada, retirar a quantidade necessária e aquecê-la à temperatura ambiente antes de a utilizar.



Composição




Categoria
Componentes
Concentração (mg/L)


Aminoácidos
Glicina
10.00



L-Alanil-L-Glutamina
434.40



L-Arginina
200.00



L-Asparagina H2O
56.82



Ácido L-aspártico
20.00



L-Cistina 2HCl
65.20



Ácido L-Glutâmico
20.00



L-Histidina HCl H2O
20.27



L-hidroxi-L-prolina
20.00



L-Isoleucina
50.00



L-Leucina
50.00



L-Lisina HCl
40.00



L-Metionina
15.00



L-fenilalanina
15.00



L-Prolina
20.00



L-Serina
30.00



L-Treonina
20.00



L-Triptofano
5.00



L-tirosina 2Na 2H2O
28.83



L-Valina
20.00


Vitaminas
ácido p-amino-benzoico
1.00



D-Biotina
0.20



Cloreto de colina
3.00



D-pantotenato de cálcio
0.25



Ácido fólico
1.00



myo-Inositol
35.00



Nicotinamida
1.00



Piridoxina HCl
1.00



Riboflavina
0.20



Tiamina HCl
1.00



Vitamina B12
0.005


Sais inorgânicos
Ca(NO3)2 4H2O
100.00



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
100.00



NaCl
6000.00



NaHCO3
2000.00



Na2HPO4
800.00


Outros componentes
D-Glucose
2000.00



L-Glutatião reduzido
1.00



Sal de sódio de vermelho de fenol
5.30

25,00 €*

Detectámos que se encontra num país diferente ou que está a utilizar um idioma de navegação diferente do atualmente selecionado. Gostaria de aceitar as definições sugeridas?

Fechar