DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glicose, w: 2,5 mM L-Glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Piruvato de sódio, w: 1,2 g/L NaHCO3
O DMEM:Ham's F12 é um meio basal amplamente reconhecido e extensivamente utilizado em cultura celular para investigação biológica. Serve como fonte fundamental de nutrientes para o crescimento de várias linhas celulares de mamíferos, particularmente quando suplementado com soro fetal bovino (FBS).
Esta formulação única combina o Meio Eagle Modificado de Dulbecco (DMEM) e o Ham's F-12 (Mistura de Nutrientes F-12 de Ham) numa proporção precisa de 1:1. A adição de L-glutamina melhora ainda mais a sua composição.
O DMEM, derivado do Meio Essencial Mínimo de Eagle (EMEM), oferece uma concentração mais elevada de aminoácidos e vitaminas em comparação com o seu antecessor. Em contrapartida, o Ham’s F-12 baseia-se no meio Ham’s F-10, fornecendo um conjunto complementar de componentes essenciais.
Para apoiar o crescimento celular ideal, é prática comum suplementar o DMEM:Ham’s F-12 com soro fetal bovino (FBS) numa concentração típica de 5 a 10%. Esta adição é necessária, uma vez que o meio carece de hormonas de crescimento, lípidos e proteínas cruciais para o desenvolvimento celular.
O DMEM:Ham’s F12 incorpora um sistema tampão de pH e é frequentemente suplementado com vermelho de fenol, um indicador de pH. As células cultivadas em DMEM:Ham’s F12, ou em qualquer meio que utilize o sistema tampão de bicarbonato, requerem um ambiente com CO₂ controlado entre 5 % e 10 % para manter níveis de pH adequados.
Controlo de Qualidade
- Filtrado esterilizado
Armazenamento e prazo de validade
- Armazenar a +2 °C a +8 °C, protegido da luz.
- Após a abertura, conservar a 4 °C e utilizar no prazo de 6 a 8 semanas.
Condições de envio
- Temperatura ambiente
Manutenção
- Manter refrigerado entre +2 °C e +8 °C, ao escuro. Evitar o congelamento e o aquecimento frequente até +37 °C, uma vez que isso reduz a qualidade do produto.
- Não aqueça o meio para além de 37 °C nem utilize fontes de calor não controladas, como aparelhos de micro-ondas.
- Se apenas for utilizada uma parte do meio, retire a quantidade necessária e aqueça-a até à temperatura ambiente antes de a utilizar.
Composição
| Categoria | Componentes | Concentração (mg/L) |
| Aminoácidos | Glicina | 18,75 |
| L-alanina | 4,45 | |
| L-arginina HCl | 147,50 | |
| L-asparagina H₂O | 7,50 | |
| Ácido L-aspártico | 6,65 | |
| L-cisteína HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cistina 2 HCl | 31,29 | |
| Ácido L-glutâmico | 7,35 | |
| L-glutamina | 365,00 | |
| HCl de L-histidina H₂O | 31,48 | |
| L-isoleucina | 54,47 | |
| L-Leucina | 59,05 | |
| L-lisina HCl | 91,25 | |
| L-metionina | 17,24 | |
| L-fenilalanina | 35,48 | |
| L-prolina | 17,25 | |
| L-serina | 26,25 | |
| L-treonina | 53,45 | |
| L-triptofano | 9,02 | |
| L-tirosina 2 Na 2 H₂O | 55,79 | |
| L-valina | 52,85 | |
| Vitaminas | D-biotina | 0,0035 |
| Cloreto de colina | 8,98 | |
| Pantotenato de cálcio D | 2,24 | |
| Ácido fólico | 2,66 | |
| mio-inositol | 12,60 | |
| Nicotinamida | 2,02 | |
| Cloridrato de piridoxina | 0,031 | |
| Cloridrato de piridoxal | 2,00 | |
| Riboflavina | 0,219 | |
| Cloridrato de tiamina | 2,17 | |
| Vitamina B12 | 0,68 | |
| Sais inorgânicos | CaCl₂·2H₂O | 154,50 |
| CuSO₄·5H₂O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃·9 H₂O | 0,05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61,20 | |
| MgSO₄ 7 H₂O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO₃ | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH₂PO₄·2 H₂O | 70,87 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0,432 | |
| Outros componentes | D-glicose | 3151,00 |
| Hipoxantina | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Ácido linoleico | 0,042 | |
| Ácido lipóico | 0,105 | |
| Sal de sódio do vermelho de fenol | 8,63 | |
| Putrescina 2 HCl | 0,081 | |
| Piruvato de sódio | 55,00 | |
| Timidina | 0,365 |