Publicado: 2023 | Última revisão: maio de 2026

Guia Completo das Melhores Práticas em Bancos de Células

Visão geral da gestão de culturas celulares

A gestão eficaz das culturas celulares é essencial para manter a sua integridade para aplicações de investigação e terapêuticas. A cultura contínua ou prolongada de linhas celulares pode levar a várias complicações, tais como:

• Contaminação microbiana: As culturas abertas são vulneráveis a várias infeções microbianas que podem alterar o comportamento e a viabilidade das células.
• Alteração de características: Características celulares fundamentais, como a expressão de antigénios ou a produção de anticorpos, podem perder-se com o tempo.
• Variação genética: Pode ocorrer instabilidade genómica em linhas celulares conhecidas pelos seus cariótipos instáveis, levando a resultados experimentais pouco fiáveis.
• Limitação da esperança de vida: Certos tipos de células têm um número limitado de divisões antes de entrarem em senescência e deixarem de proliferar.
• Risco de contaminação cruzada: A cultura prolongada aumenta o risco de uma linha celular contaminar outra, resultando em dados errados.
• Intensidade de recursos: As culturas de longo prazo exigem mais consumíveis e mais mão de obra, inflacionando significativamente os custos.

Abordagem estratégica para o banco de células

Um sistema de banco de células é uma abordagem estratégica para mitigar os riscos acima mencionados. O sistema recomendado é o sistema de Banco de Células Mestre, que envolve as seguintes etapas:

1. Quarentena inicial: As culturas celulares recém-adquiridas devem ser isoladas e tratadas sob condições de quarentena rigorosas para prevenir a contaminação laboratorial.
2. Estabelecimento do Stock de Referência: Após a expansão inicial da cultura, um pequeno número de ampolas (3-5) deve ser criopreservado como um Stock de Referência para reserva de emergência.
3. Formação do Banco de Células Mestre: Expandir as culturas a partir de uma ampola do Stock de Reserva para estabelecer um Banco de Células Mestre, composto por um número maior de ampolas (10-20 ou mais, com base na utilização prevista).
4. Controlo de qualidade rigoroso: Uma subamostra do Banco de Células Mestre é submetida a testes de controlo de qualidade exaustivos, que incluem a avaliação da viabilidade celular, a confirmação da ausência de contaminantes microbianos e, potencialmente, a realização de testes virais e de autenticidade.
5. Desenvolvimento do Banco de Células de Trabalho: Uma parte do Banco de Células Mestre é então utilizada para criar um Banco de Células de Trabalho, que constitui a fonte principal para a investigação e aplicação ativas.

Protocolos detalhados de controlo de qualidade

O controlo de qualidade é uma parte crucial da manutenção de um banco de células. Abrange:

• Testes de viabilidade e contagem: Garantir que as células estão vivas e presentes em número suficiente.
• Rastreio Microbiano: Testes regulares para detetar bactérias, fungos e micoplasmas, a fim de evitar que as culturas celulares sejam comprometidas.
• Procedimentos de autenticação: Confirmar a identidade das linhas celulares através de métodos como a análise de perfis de ADN.

Recomendações de armazenamento e utilização

As condições adequadas de armazenamento são as seguintes:

• Instalações de armazenamento dedicadas: Utilizar instalações especificamente concebidas para o armazenamento de bancos de células, tais como tanques de nitrogénio líquido ou congeladores elétricos, para evitar a contaminação cruzada e garantir a viabilidade a longo prazo.

Consistência e garantia de qualidade:

• Material celular consistente: Um sistema de banco de células garante que todos os materiais utilizados nas experiências provêm de uma fonte consistente.
• Números de passagem controlados: Ao utilizar células dentro de um intervalo controlado de números de passagem, a variabilidade experimental é minimizada.
• Prática de cultura «just-in-time»: Cultivar células apenas quando necessário ajuda a preservar as características originais da linha celular e reduz os custos associados à manutenção de culturas contínuas.