Linha celular Neuro-2a

A Neuro-2a é uma linha de células neurais de rato amplamente utilizada na investigação neurocientífica. Estas células são principalmente utilizadas para estudar o desenvolvimento neural, a diferenciação, a neurotoxicidade, as vias de sinalização celular e o crescimento axonal. Além disso, são utilizadas para o desenvolvimento e o rastreio de medicamentos.

Este artigo centra-se em aspectos importantes das células de neuroblastoma Neuro-2a que o podem ajudar antes de começar a trabalhar com elas. Abordará principalmente

Atributos gerais e origem das células Neuro-2a
Informações sobre a cultura da linha celular Neuro-2a
Vantagens e desvantagens da linha celular Neuro-2a
Aplicações de investigação da linha celular Neuro-2a
Publicações de investigação sobre células Neuro-2a
Recursos para células Neuro-2a: Protocolos, vídeos e muito mais

1. Caraterísticas gerais e origem das células Neuro-2a

Esta parte do artigo abordará os antecedentes e as caraterísticas básicas da linha celular Neuro-2a que é essencial conhecer antes de trabalhar com ela. Aqui, ficará a saber: O que é a linha celular Neuro-2a? Qual é a origem da linha celular Neuro-2a? O que é a diferenciação das células Neuro-2a? Qual é o tamanho de uma célula Neuro-2a? Qual é a morfologia das células Neuro-2a?

As células Neuro-2a tiveram origem num tumor espontâneo (neuroblastoma) de um rato albino (estirpe A). A linha celular foi criada por R.J. Klebe e F.H. Ruddle.
As células do neuroblastoma Neuro-2a apresentam uma morfologia neuronal e de células estaminais ameboides.
O tamanho das células Neuro-2a é de 12 micrómetros de altura [1].
O número de cromossomas das células Neuro-2a pode variar entre 59 e 193, com um número modal de 95. O cariótipo destas células de neuroblastoma é instável, variando entre 94 e 98 cromossomas.

Sinalização neuronal ilustrada: representação em 3D da libertação de neurotransmissores na fenda sináptica pelo neurónio pré-sináptico, desencadeada pelo influxo de Ca2+, levando à ativação de canais iónicos e ao influxo de Na+ no neurónio pós-sináptico.

2. Informações sobre a cultura da linha celular Neuro-2a

As células Neuro-2a são amplamente utilizadas em laboratórios de investigação em neurociências. Antes de trabalhar com estas células, deve aprender as informações imperativas sobre cultura de células mencionadas abaixo. Isto pode ajudá-lo a lidar facilmente com elas. Ficará a saber: O que é um meio de cultura de células Neuro-2a? Como se fazem culturas de células Neuro-2a? Qual é o tempo de duplicação das células Neuro-2a? Qual é a densidade de sementeira das células Neuro-2a? Qual é o protocolo de cultura de células Neuro-2a? Qual é o meio de cultura das células Neuro-2a?

Pontos-chave para a cultura de células Neuro-2a

Tempo de duplicação:	O tempo de duplicação das células Neuro-2a é de aproximadamente 70 horas.
Aderente ou em suspensão:	A Neuro-2a é uma linha celular aderente.
Densidade de sementeira:	A densidade de sementeira de células optimizada para a linha de células Neuro-2a é de 1 x¹⁰⁴ ^células/cm2. Para a sementeira, as células são lavadas com tampão fosfato salino isento de magnésio e cálcio (1x). Posteriormente, é adicionada uma solução de passagem (Accutase) e as células são incubadas durante 8 a 10 minutos à temperatura ambiente. Após a dissociação das células, é adicionado um novo meio e as células são centrifugadas. O pellet de células colhido é cuidadosamente ressuspendido e as células são vertidas para um recipiente de cultura para crescimento.
Meio de cultura:	O meio EMEM é utilizado para a cultura de células Neuro-2a. Contém 10% de FBS, 2 mM de L-Glutamina, 1,5 g/L de NaHCO3, EBSS, 1 mM de piruvato de sódio e NEAA para um crescimento celular ideal. O meio deve ser substituído 1 a 2 vezes por semana.
Condições de crescimento:	As culturas de Neuro-2a são mantidas numa incubadora humidificada a 37°C ligada a um fornecimento de 5% de CO2.
Armazenamento:	As células devem ser armazenadas a uma temperatura inferior a -150 °C num congelador elétrico de temperatura ultra baixa ou na fase de vapor do azoto líquido a longo prazo.
Processo de congelação e meio:	Os meios CM-1 ou CM-ACF são utilizados para congelar células Neuro-2a. As células são congeladas através de um processo de congelação lento que permite apenas uma queda de 1 °C por minuto. Isto protege as células do choque e mantém a sua viabilidade.
Processo de descongelação:	Para descongelar culturas congeladas, o frasco é colocado num banho de água a 37 °C durante 40 a 60 segundos, até restar apenas um pequeno aglomerado de gelo. Em seguida, adiciona-se o meio de cultura e as células são submetidas a centrifugação. Este passo ajuda a remover os componentes do meio de congelação. O pellet de células é então ressuspenso e as células são transferidas para um novo frasco cheio de meios de cultura. Em seguida, as células são colocadas numa incubadora a 37 °C durante um mínimo de 24 horas.
Nível de biossegurança:	Os laboratórios de nível de biossegurança 1 são obrigatórios para manusear e manter culturas de Neuro-2a.

Imagem microscópica de uma passagem inicial de células de neuroblastoma Neuro 2a aderentes, representando a sua morfologia com uma ampliação de 10x e 20x.

3. Vantagens e desvantagens da linha de células Neuro-2a

As células Neuro-2a possuem algumas vantagens e desvantagens que as distinguem de outras linhas de células neuronais. Apresentam-se de seguida algumas vantagens e desvantagens notáveis destas células.

Vantagens

As vantagens da linha celular de neuroblastoma murino Neuro-2a são

Fácil de manter
A linha de células Neuro-2a não está associada a procedimentos de cultura de células complexos ou intrincados. São fáceis de cultivar e manter em laboratórios de investigação.
Modelo de células neuronais in vitro
A Neuro-2a é um modelo conveniente de células neuronais amplamente utilizado por investigadores em estudos de desenvolvimento e diferenciação de neurónios.

Desvantagens

As desvantagens das células Neuro-2a são as seguintes

Origem murina
A Neuro-2a é de origem murina e os investigadores devem ter cuidado ao extrapolar os resultados de estudos baseados em murinos para a saúde e doença humanas, uma vez que a biologia dos ratos e dos seres humanos pode diferir significativamente.

4. Aplicações de investigação da linha celular Neuro-2a

As células Neuro-2a oferecem muitas aplicações no domínio da investigação em neurociências. Algumas utilizações prometedoras desta linha celular são aqui discutidas:

Desenvolvimento neuronal: A Neuro-2a é um modelo de células neuronais in vitro amplamente utilizado para estudar o desenvolvimento neuronal e processos relacionados, como a diferenciação, o crescimento axonal e a formação de sinapses. Um estudo realizado em 2020 utilizou células Neuro-2a para explorar o papel do microRNA-124 na diferenciação de células neuronais induzida pelo ácido retinóico [2]. Outro estudo investigou a expressão do recetor gamma do ácido retinóico (RARG) e do miRNA-124 na linha celular de neuroblastoma (N2A) da Neuro-2a. Este estudo propôs que o RARG é visado pelo miR-124 e suprime o crescimento da neurite [3].
Neurotoxicidade: A Neuro-2a também é utilizada para avaliar os efeitos tóxicos de medicamentos, produtos químicos ou factores ambientais nas células neurais. Por exemplo, um estudo realizado por Zhihong Yin e colaboradores investigou a neurotoxicidade do bisfenol A (BPA), um químico ambiental, utilizando células Neuro-2a. Observaram que o BPA reprime a diferenciação e a proliferação das células neuronais, perturbando a sua integridade celular e sináptica [4].
Rastreio de medicamentos: As células Neuro-2a são também utilizadas para avaliar as actividades terapêuticas de vários fármacos, compostos e produtos naturais. Por exemplo, um estudo utilizou células Neuro-2a e estudou o potencial anti-oxidativo do extrato da planta Gingko biloba. Além disso, a investigação propôs que este extrato provoca uma diminuição da agregação de Aβ e pode ser um tratamento potencial para a doença de Alzheimer [5].

430,00 €*

Conteúdo: 1.5 milliliter

Preços sem impostos mais custos de envio

cryovial

Número do produto: 400394

5. Publicações de investigação com células Neuro-2a

Aqui estão alguns artigos de investigação interessantes sobre a linha de células Neuro-2a.

As alcamidas semelhantes à piperina da Piper nigrum induzem o promotor BDNF e promovem o crescimento de neurites nas células Neuro-2a

Este estudo publicado no Journal of Natural Medicines, 2018, investigou os efeitos terapêuticos das alcamidas isoladas da pimenta branca (P. nigrum) nas células neuronais Neuro-2a.

A regulação negativa de Nkx2. 1 está envolvida na anormalidade cerebral induzida pelo excesso de ácido retinóico

Esta investigação na Ata Biochimica et Biophysica Sinica, 2020 propôs que o gene Nkx2.1 desempenha um papel importante no desenvolvimento do cérebro do rato, regulando a cascata de sinalização Shh.

A exposição ao bisfenol A induz neurotoxicidade associada à disfunção sináptica e do citoesqueleto em células neuro-2a

Este artigo foi publicado na revista Toxicology and Industrial Health (2023) e propôs que um químico ambiental, o bisfenol A, desencadeia neurotoxicidade em células neuro-2a e perturba a sua disfunção sináptica e citoesquelética.

A modulação pela hexarelina das vias MAPK e PI3K/Akt em células Neuro-2A inibe a toxicidade apoptótica induzida pelo peróxido de hidrogénio

Este artigo em Pharmaceuticals (2021) propôs que um medicamento, a hexarelina, modula a cascata PI3K/AKT e MAPK em células de neuroblastoma (Neuro-2a) e inibe a apoptose das células neuro-2a induzida por peróxido de hidrogénio.

O extrato etanólico do fruto de Emblica officinalis suprime a neuroinflamação na microglia e promove o crescimento de neurites em células Neuro2a

Este artigo de investigação na Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2021) propôs que o extrato de fruto de Emblica officinalis suprime a neuroinflamação nas células Neuro-2a e, por conseguinte, pode ser benéfico para as doenças neuroinflamatórias.

6. Recursos para células Neuro-2a: Protocolos, vídeos e muito mais

Seguem-se os recursos online disponíveis sobre as células Neuro-2a. Incluem cultura de células Neuro-2a e protocolo de transfecção.

Protocolo de transfecção de Neuro-2a: A Neuro-2a é um hospedeiro de transfecção adequado. Esta ligação orienta-o relativamente ao protocolo de transfecção da linha celular. A eficiência da transfecção da Neuro-2a varia de reagente para reagente.

A seguinte ligação contém o protocolo de cultura de células Neuro-2a.

Protocolo de cultura de células Neuro-2a: Esta ligação ajudá-lo-á a conhecer o protocolo de subcultura de células Neuro-2a.
Células Neuro-2a: O sítio Web contém conhecimentos abrangentes sobre meios de cultura de células Neuro-2a, densidade de sementeira e protocolos para subcultura e manuseamento de culturas criopreservadas e proliferativas.

Referências

Lulevich, V., et al., Single-cell mechanics provides a sensitive and quantitative means for probing amyloid-beta peptide and neuronal cell interactions. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): p. 13872-7.
You, Q., et al., Papel do miR-124 na regulação da diferenciação celular Neuro-2A induzida pelo ácido retinóico. Neural Regen Res, 2020. 15(6): p. 1133-1139.
Su, X., et al., O recetor de ácido retinóico gama é direcionado pelo microRNA-124 e inibe o crescimento da neurite. Neuropharmacology, 2020. 163: p. 107657.
Yin, Z., et al., A exposição ao bisfenol-A induziu neurotoxicidade e associada à sinapse e citoesqueleto em células Neuro-2a. Toxicologia in Vitro, 2020. 67: p. 104911.
Chen, L., et al., O extrato de Gingko biloba (EGb) inibe o estresse oxidativo em células neuro 2A que superexpressam APPsw. BioMed research international, 2019. 2019.