Linha celular MX-1

A MX-1 é uma linha celular de adenocarcinoma da mama humano derivada de um modelo de xenoenxerto de cancro da mama em ratos atímicos. As células do adenocarcinoma da mama humano foram estabelecidas a partir do tumor da mama de uma mulher caucasiana de 29 anos. As células MX1 são células de cancro da mama triplo-negativas (TNBC) que são amplamente utilizadas para investigação sobre resistência a medicamentos, sinalização celular, mecanismo de resposta a medicamentos, etc.

Origem e informações gerais sobre as células MX-1

Antes de trabalhar com esta linha celular, é necessário conhecer as suas caraterísticas. Vamos rever quase todas as informações gerais sobre a linha celular MX-1.

A linha celular imortal MX-1 é uma linha celular tumorigénica estabelecida a partir de um xenoenxerto tumoral. As células MX-1 são consideradas um tipo de cancro da mama triplo-negativo (TNBC) [1]. Além disso, estas células são negativas para o recetor de estrogénio e para o p53, uma vez que não expressam estes genes.

Células MX-1 - Um sistema modelo para o cancro da mama triplo-negativo

As condições de cultura da linha celular MX-1 não são exigentes. Estas células podem ser facilmente propagadas e utilizadas em vários laboratórios de investigação para estudos de transfecção. O método de transfecção transiente estuda habitualmente os mecanismos celulares subjacentes e os padrões de expressão genética nesta linha celular [2, 3].

Esta linha celular é um sistema modelo sólido para os carcinomas da mama. Pode ser utilizada para compreender os mecanismos moleculares subjacentes à progressão da doença e para selecionar e desenvolver medicamentos para combater a doença. Mais especificamente, a linha celular de adenocarcinoma da mama humano MX-1 pode ser uma alternativa às células TNBC, uma vez que é negativa para o recetor de estrogénio [4].

Linha celular MX-1: Informações sobre a cultura

• Tempo de duplicação: O tempo de duplicação da população de células INS-1 é de aproximadamente 44 horas.
• Aderentes ou em suspensão: As células INS-1 crescem tanto em suspensão como em forma aderente.
• Rácio de subcultura: As células INS-1 são subcultivadas num rácio de divisão de 1:3. Resumidamente, as células em suspensão são recolhidas. As células aderentes são lavadas com PBS e incubadas com a solução de Accutase. Após o descolamento, as células são adicionadas com meio fresco. Em seguida, as células suspensas e aderentes são centrifugadas e recolhidas. As células são cuidadosamente ressuspendidas e distribuídas nos novos frascos para crescimento.
• Meio de crescimento: O meio RPMI 1640 é utilizado para a cultura da linha celular de insulinoma de rato INS-1. O meio é suplementado com 10% de soro fetal bovino inactivado pelo calor, 2,1 mM de glutamina estável, 10 mM de HEPES, 2,0 g/L de NaHCO3 e 1 mM de piruvato de sódio.
• Condições de crescimento: As células INS-1 são mantidas numa incubadora humidificada a uma temperatura de 37°C e com um fornecimento contínuo de 5% de CO2.
• Armazenamento: As células beta INS-1 podem ser armazenadas a longo prazo na fase de vapor do azoto líquido ou a uma temperatura inferior a -150°C num congelador elétrico.
• Processo de congelação e meio: Os meios CM-1 ou CM-ACF são utilizados para congelar as células INS-1 através de um processo de congelação lento. Permite apenas uma queda de temperatura de 1°C por minuto para proteger a viabilidade das células.
• Processo de descongelação: As células INS-1 congeladas são descongeladas num banho de água pré-ajustado a uma temperatura de 37 graus Celsius durante 40 a 60 segundos. Após a descongelação, as células são adicionadas com meios frescos e diretamente vertidas para um novo frasco para crescimento. Após 24 horas, o meio é substituído para eliminar os componentes do meio de congelação.
• Nível de biossegurança: É necessário um laboratório de nível de biossegurança 1 para cultivar células de insulinoma de rato INS-1.

Células MX-1: Aplicações na investigação

Esta linha celular de adenocarcinoma da mama humano MX-1 é normalmente utilizada em estudos sobre o cancro da mama em vez de células como MDA-MB-231 ou MCF-7. Seguem-se algumas aplicações especiais desta linha celular na investigação do cancro.

Mecanismos de resistência aos medicamentos

As células MX-1 são utilizadas para estudar os factores moleculares que medeiam o desenvolvimento da resistência aos medicamentos contra o cancro da mama. Os estudos têm utilizado amplamente as células MX-1 para estabelecer modelos de resistência aos medicamentos. Um estudo publicado em 2021 relatou a utilização de células MX-1 para gerar uma linha celular de cancro da mama resistente à doxorrubicina. O modelo celular desenvolvido validou o transportador ABC ABCB1 e o envolvimento da transição epitelial-mesenquimal (EMT) na aquisição de quimiorresistência [5].

Expressão dos genes/via de sinalização celular

A linha celular MX-1 pode ser transfectada transitoriamente para elucidar os padrões de expressão dos genes e as vias de sinalização celular. Os estudos utilizaram as células MX-1 para a transfecção de shRNA (short hairpin RNA) e de RNA não codificante para explorar o seu efeito na proliferação e crescimento das células do cancro da mama. Além disso, são elucidadas as vias de sinalização genética associadas [2, 6].

Rastreio de potenciais inibidores

As células MX-1 podem ser utilizadas para o rastreio de potenciais medicamentos contra o cancro da mama, uma vez que imitam o microambiente das células cancerosas. Um estudo de investigação demonstrou a atividade terapêutica da Vinorelbina, uma toxina dos microtúbulos, que desencadeou a morte celular e a poliploidia nas células MX-1 [4].

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Recursos da linha celular MX-1: Protocolos, vídeos e mais

Existem poucos recursos disponíveis relativamente aos métodos de cultura e transfecção, mas reunimos o máximo de informação possível para si.

Protocolos de cultura de células

As células MX-1 são utilizadas em muitos estudos de análise de transfecção transiente. Aqui, listamos alguns recursos para o ajudar com os protocolos de transfecção.

• Transfecção de células MX-1: Esta publicação descreve o protocolo de transfecção com siRNA em células MX-1 para o desenvolvimento de um modelo de nocaute genético.
• Transfecção de células de mamíferos: Este artigo contém todas as informações essenciais sobre os métodos de transfecção utilizados em linhas celulares de mamíferos.

Esperamos que este artigo lhe tenha proporcionado conhecimentos valiosos sobre a linha celular MX-1 e que tenha adquirido uma melhor compreensão de como cultivar, manter e utilizar estas células na sua investigação. Se estiver interessado em trabalhar com a linha celular MX-1, não hesite em encomendar-nos para dar início ao seu percurso de investigação!

Perguntas frequentes sobre a linha celular de carcinoma da mama MX-1

Referências

1. Stefanski, C.D. e J.R. Prosperi, Combating CHK1 resistance in triple negative breast cancer: A inibição do EGFR como potencial terapia combinatória. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): p. 229.
2. Vasiyani, H., et al., O análogo de cGAMP, c-di-AMP, ativa a via de morte celular mediada por STING em células de câncer de mama negativas para receptores de estrogênio. Apoptosis, 2021. 26: p. 293-306.
3. Xiang, S., et al., Análise proteómica do inibidor da proteína semelhanteà proteína-2 da apoptosena proliferação de células de cancro da mama. Relatórios de Medicina Molecular, 2022. 25(3): p. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa, e J. Magae, Vinorelbine, uma Toxina de Microtúbulos, Induz Apoptose e Poliploidia em MX-1, uma Linha Celular de Cancro da Mama Triplo-Negativo Humano. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): p. 447-451.
5. Kubiliute, R., et al., O ativador não genotóxico ABCB1 tetrafenilfosfônio pode contribuir para a resistência à doxorrubicina na linha celular de câncer de mama MX-1. Relatórios científicos, 2021. 11(1): p. 1-11.
6. Jiang, R., et al., Análise mixómica do cancro da mama: O RNA longo não codificante linc01561 atua como ceRNA envolvido na progressão do câncer de mama. O Jornal Internacional de Bioquímica e Biologia Celular, 2018. 102: p. 1-9.