Linha celular MG-63: Um Guia Detalhado para as Células MG-63 na Investigação do Osteossarcoma
As células MG-63 são células de osteossarcoma humano semelhantes a fibroblastos que oferecem uma vasta gama de aplicações de investigação no domínio biomédico. Estas podem incluir o estudo de processos relacionados com o osso, como o desenvolvimento, a diferenciação, etc. Além disso, a linha celular MG-63 serve como modelo in vitro adequado para estudar a viabilidade, a proliferação e a adesão das células ósseas.
Caraterísticas gerais e origem da linha celular MG-63
Esta secção do artigo abordará a origem e as caraterísticas gerais da linha celular MG-63. Ficará a saber: O que é a linha celular MG-63? Qual é a origem da linha celular MG63? Qual é a morfologia das células MG-63? Qual é o tamanho da célula MG-63?
- A MG-63 é um tipo de linha celular de osteoblastos proveniente do osso de um doente do sexo masculino de 14 anos com osteossarcoma (caucasiano). A. Billiau e colegas depositaram esta linha celular em 1977.
- A linha celular MG-63 possui uma morfologia semelhante à das células fibroblásticas.
- As células de osteossarcoma humano (MG-63) apresentam hipo-triploidia. O número cromossómico modal para estas células é 66, o que ocorre em aproximadamente 44% da população celular. Também foram registadas ploidias mais elevadas em quase 2% da população celular. Além disso, os cromossomas marcadores 18-19 são abundantes em todas as células.
Informações de cultura sobre a linha celular MG-63
Informações importantes sobre os requisitos de cultura de linhas celulares podem facilitar o seu trabalho. Esta secção do artigo enumera todos os pontos-chave críticos para a cultura e manutenção das células MG-63. Aqui ficará a saber: Qual é o tempo de duplicação das células MG-63? Que meios de cultura são utilizados para as células MG-63? Qual é a densidade de sementeira das células MG-63?
Pontos-chave para a cultura de células MG-63
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Tempo de duplicação |
O tempo de duplicação da população de células MG-63 varia entre 28-38 horas, dependendo das condições de cultura. |
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Propriedades de Crescimento |
A MG-63 é uma linha celular aderente. |
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Densidade de sementeira |
recomenda-se uma densidadecelular de 1 x104 células/cm2 para as células MG-63. As células aderentes são lavadas com 1 x tampão fosfato salino (PBS) sem magnésio e cálcio. Estas células são então incubadas com solução de dissociação (Accutase), adicionadas com meio fresco e centrifugadas. O pellet de células recolhido é ressuspenso em meio fresco e dispensado no novo frasco para crescimento. |
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Meio de crescimento |
Os meios DMEM ou Ham's F12 são utilizados para a cultura de células MG-63. Estes meios podem ser aumentados com 5% de soro fetal bovino (FBS), 3,0 g/L de glucose, 2,5 mM de L-glutamina e 1,2 g/L de NaHCO3 para um crescimento celular ótimo. Os meios devem ser substituídos 2-3 vezes por semana. |
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Condições de crescimento |
É necessária uma incubadora humidificada a uma temperatura de 37°C e um fornecimento de 5% de CO2 para cultivar células MG-63. |
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Armazenamento |
Estas células semelhantes a osteoblastos podem ser armazenadas na fase de vapor do azoto líquido ou a uma temperatura inferior a -150°C para manter a viabilidade celular. |
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Processo de congelação e meio |
Os meios CM-1 ou CM-ACF são utilizados para a congelação de células MG-63. Recomenda-se geralmente um processo de congelação lento para evitar o choque das células e proteger a sua viabilidade. |
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Processo de descongelação |
As células congeladas são incubadas durante 40 a 60 segundos num banho de água pré-aquecido (37 graus Celsius). As células são ressuspendidas em meio de cultura fresco e vertidas para um novo frasco. Após 24 horas de incubação, o meio é substituído para remover os componentes do meio de congelação. |
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Nível de biossegurança |
Para o manuseamento e manutenção das culturas MG-63 são necessárias condições laboratoriais de nível de biossegurança um. |
Linha celular MG-63: Vantagens e Desvantagens
A MG-63 é uma linha celular de osteoblastos muito utilizada. Tem várias vantagens e desvantagens associadas. Neste artigo, mencionamos alguns dos principais prós e contras da linha celular MG-63.
Vantagens
As vantagens das células MG-63 são
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Caraterísticas semelhantes às dos osteoblastos
A linha celular MG-63 apresenta caraterísticas semelhantes às dos osteoblastos, o que a torna adequada para o estudo de processos e doenças relacionados com os ossos. Também pode ser utilizada para investigar a adesão, proliferação e viabilidade das células em superfícies de titânio [1].
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Facilidade de transfecção
As células MG-63 são amplamente utilizadas em estudos de transfecção, permitindo a investigação da expressão e função de genes e de processos celulares.
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Produção de interferão de alto nível
As células MG-63 são capazes de produzir interferão de alto nível. Podem produzir 3,7 vezes mais interferão por cm² do que os fibroblastos diplóides quando induzidas com cicloheximida, ácido polinossínico-ácido policitidílico e actinomicina [2].
Desvantagens
As desvantagens associadas às células B MG-63 são
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Heterogeneidade
As células MG-63 apresentam heterogeneidade na população celular, o que pode afetar a reprodutibilidade.
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Linhagem de células tumorais
A MG-63 é uma linha celular cancerígena e pode não representar totalmente o comportamento e a fisiologia normais das células, o que limita a sua aplicação em determinadas experiências laboratoriais.
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Aplicações das células MG-63
As células MG-63 são um excelente instrumento de investigação. Oferecem muitas aplicações promissoras no domínio da investigação. Algumas das principais aplicações de investigação das células MG-63 são aqui enumeradas.
- Estudo de processos/doenças relacionados com os ossos: As células MG-63 são células semelhantes a osteoblastos (formadoras de ossos). Por conseguinte, estas células são amplamente utilizadas para estudar doenças ósseas e processos celulares, incluindo o desenvolvimento, a diferenciação e a mineralização. Além disso, as células são amplamente utilizadas para o rastreio de fármacos terapêuticos para promover a cicatrização óssea. A investigação utilizou células MG-63 para estudar o potencial terapêutico de nanopartículas de óxido de zinco de Scutellaria baicalensis sintetizadas em verde na proliferação, mineralização e diferenciação de células ósseas [3].
- Investigação do cancro: As células MG-63 são amplamente utilizadas na investigação do cancro. Vários estudos utilizaram estas células de osteossarcoma para compreender as vias de sinalização do cancro e avaliar o potencial citotóxico e terapêutico dos medicamentos. Um estudo realizado em 2019 explorou as propriedades antitumorais de um composto natural, a tomentosina, utilizando células MG-63. Os resultados mostraram que a Tomentosina exibe efeitos anticancerígenos ao desencadear a produção intracelular de espécies reativas de oxigénio (ROS) [4].
Publicações de Investigação com Células MG-63
Seguem-se algumas publicações de investigação sobre a MG-63, a linha de células semelhantes a osteoblastos.
Este artigo foi publicado na revista Pathology - Research and Practice em 2020. Esta investigação utilizou células MG-63 para estudar os mecanismos moleculares envolvidos na resistência a fármacos em células cancerígenas de osteossarcoma (MG-63). Os resultados revelaram que o miRNA-192 pode ser um alvo útil para superar a resistência ao medicamento metotrexato no osteossarcoma.
Esta pesquisa foi publicada no Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2020). O estudo relatou o potencial anticancerígeno de nanopartículas de óxido de zinco sintetizadas em verde (ZnONPs) de Rehmanniae Radix contra células de câncer ósseo (MG-63).
Este artigo de investigação foi publicado em 2021 na revista Materials Science and Engineering. Este estudo propôs as propriedades de cicatrização óssea de nanopartículas de óxido de zinco biossintetizadas da planta Scutellaria baicalensis usando a linha de células MG-63.
Este estudo foi publicado na revista Onco Targets and Therapy em 2021. A pesquisa propôs as propriedades antitumorais do composto de curcumina contra células de osteossarcoma. O composto exerceu estes efeitos terapêuticos ao inativar a via de sinalização do cancro p-JAK2/p-STAT3.
Esta pesquisa foi publicada em 2018 no International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science. O estudo descobriu que a vitamina D3 tratada com energia de campo biológico influencia positivamente a proliferação, maturação e diferenciação das células ósseas e melhora os parâmetros de saúde óssea.
Recursos para a linha de células MG-63: Protocolos, vídeos e mais
Estão disponíveis vários recursos sobre a linha celular MG-63 que elucidam os seus protocolos de cultura e transfecção de células.
- Transfecção de células MG-63: Este vídeo explica de forma exaustiva o protocolo de transfecção para as células MG-63.
- Passagem de células aderentes: Este vídeo orienta a subcultura ou a passagem de linhas de células aderentes. Ajudá-lo-á a aprender protocolos básicos de cultura de células.
A seguinte ligação fornece-lhe o protocolo de cultura para células MG-63.
- Cultura de células MG-63: Este sítio Web fornece um protocolo fácil e detalhado para subcultura ou divisão da linha de células MG-63.
Perguntas frequentes sobre as células MG-63
Referências
- Wandiyanto, J.V., et al., O destino das células MG-63 semelhantes a osteoblastos em superfícies de titânio nanoestruturadas bactericidas pré-infectadas. Materiais (Basileia), 2019. 12(10).
- Billiau, A., et al., Interferão humano: produção em massa em uma linha celular recém-estabelecida, MG-63. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): p. 11-5.
- Tang, Y., et al., Diferenciação osteogénica e potencial de mineralização de nanopartículas de óxido de zinco de Scutellaria baicalensis em células MG-63 semelhantes a osteoblastos humanos. Ciência e Engenharia de Materiais: C, 2021. 119: p. 111656.
- Lee, CM, et al., Tomentosin exibe efeito anticarcinogênico em células MG-63 de osteossarcoma humano por meio da indução de espécies reativas de oxigênio intracelular. Revista internacional de ciências moleculares, 2019. 20(6): p. 1508.