Publicado: 2023 | Última revisão: maio de 2026
Linha celular HCT116: Um pilar na investigação do cancro colorretal
A linha celular HCT116 serve como pedra angular na exploração do cancro colorretal, oferecendo informações inestimáveis sobre a patogénese da doença e potenciais vias terapêuticas. Reconhecida pela sua utilidade na investigação do cancro e em avaliações farmacológicas, a HCT116 facilita estudos fundamentais sobre o comportamento tumoral e a eficácia dos medicamentos.
- Meio de crescimento
O meio McCoys 5a, suplementado com 3,0 g/L de L-glicose, 1,5 mM de L-glutamina, 3,0 g/L de NaHCO3 e 10% de soro fetal bovino, é ideal para o cultivo de células HCT116. É aconselhável renovar o meio 1 a 2 vezes por semana. - Tempo de duplicação
O tempo de duplicação das células cancerígenas HCT116 varia entre 25 e 35 horas. - Tipo de crescimento
A linha celular de cancro do cólon HCT116 é aderente, com as células a crescerem em monocamadas. - Nível de biossegurança
BSL-1 - Disponível na
Cytion — Encomendar HCT116
- Origens e características fundamentais das células HCT116
- Perguntas frequentes sobre as células HCT116
- Manuseamento das células HCT116
- Referências
- Vantagens da linha celular HCT116
- Avance nas suas descobertas com a nossa linha celular HCT116 autenticada
- Aplicações de investigação da linha celular HCT116
- Células HCT116: Publicações de investigação
- Recursos para células HCT116
- Perguntas frequentes
Origens e características fundamentais das células HCT116
Compreender as origens e as características básicas das células HCT116, tais como as suas características morfológicas, composição genética e dimensões celulares, é essencial para os investigadores que se dedicam a estudos utilizando esta linha celular.
Proveniência e panorama genético: Originárias do cólon de um homem caucasiano de 48 anos diagnosticado com cancro colorretal, as células HCT116 destacam-se por uma mutação no códon 13 (G13D) do gene KRAS, parte da via de sinalização RAS/RAF/MEK/ERK. Esta mutação específica é fundamental na transformação oncogénica destas células, sublinhando a sua relevância na investigação do cancro.
Morfologia e características de crescimento: Apresentando uma morfologia de tipo epitelial, as células HCT116 crescem tipicamente em culturas de monocamada, mas também podem formar esferóides com diâmetros de 150-400 µm. Esta adaptabilidade nos padrões de crescimento sublinha a sua versatilidade em várias configurações experimentais.
Perfil cromossómico: A composição cromossómica das células HCT116 é quase diploide, com aproximadamente 70% da população celular a possuir 45 cromossomas. Notavelmente, existe uma amplificação recorrente nos braços longos dos cromossomas 8, 10, 16 e 17, enquanto o cromossoma Y está ausente, o que contribui para a sua assinatura genómica única.
Análise comparativa: Linhas celulares HCT116 vs. HT29
Ao comparar a HCT116 com a HT29, outra linha celular de carcinoma colorretal humano, surgem diferenças distintas no seu potencial oncogénico e nas suas capacidades de diferenciação:
Agressividade oncogênica e diferenciação: as células HCT116 caracterizam-se pela sua elevada agressividade oncogênica e potencial de diferenciação limitado, tornando-as um modelo para o estudo de fenótipos tumorais agressivos. Em contrapartida, as células HT29 exibem a capacidade de se diferenciarem em linhagens semelhantes a enterócitos e produtoras de mucina, proporcionando um modelo contrastante que imita diversos aspetos da biologia do cancro colorretal.
Esta compreensão comparativa das linhas celulares HCT116 e HT29 enriquece o conjunto de ferramentas à disposição dos investigadores, permitindo investigações mais matizadas sobre a natureza multifacetada do cancro colorretal.
Manuseamento das células HCT116
Tempo de duplicação:
O tempo de duplicação das células cancerígenas HCT116 varia entre 25 e 35 horas.
Adesivas ou em suspensão:
A linha celular de cancro do cólon HCT116 é aderente, com as células a crescerem em monocamadas.
Densidade de sementeira:
Recomenda-se uma densidade de sementeira de 2 x 104 células/cm² para a cultura celular HCT116. Para a subcultura, as células devem ser desprendidas utilizando solução de Accutase após uma lavagem com PBS 1x. Após a centrifugação, o sedimento celular é ressuspenso em meio de crescimento fresco e transferido para um novo frasco.
Meio de crescimento:
O meio McCoys 5a, suplementado com 3,0 g/L de L-glicose, 1,5 mM de L-glutamina, 3,0 g/L de NaHCO3 e 10% de soro fetal bovino, é ideal para o cultivo de células HCT116. É aconselhável renovar o meio 1 a 2 vezes por semana.
Condições de crescimento (temperatura, CO₂):
O cultivo ocorre numa incubadora humidificada a 37 °C com uma atmosfera de 5% de CO2.
Armazenamento:
As células HCT116 podem ser armazenadas a temperaturas inferiores a -150 °C, tanto na fase vapor como na fase líquida do azoto líquido.
Processo de congelação e meio:
Utilize o meio CM-1 ou CM-ACF para a criopreservação. Recomenda-se um método de congelamento a taxa controlada, permitindo uma diminuição gradual da temperatura de 1 °C por minuto, o que ajuda a manter a viabilidade celular.
Processo de descongelamento:
Descongele as células HCT116 num banho-maria a 37 °C. Após adicionar o meio de crescimento, centrifugue para remover os resíduos do meio de congelamento. Resuspende o sedimento celular em meio fresco e cultive em frascos novos.
Nível de biossegurança:
Nível 1
Vantagens da linha celular HCT116
Esta secção aprofunda a linha celular HCT116, destacando o seu papel fundamental na investigação do cancro, particularmente no estudo do cancro colorretal, e discutindo as suas vantagens inerentes.
A linha celular HCT116 destaca-se na investigação do cancro devido a várias vantagens fundamentais:
Modelo de cancro colorretal: Serve como um modelo in vitro amplamente reconhecido para o cancro colorretal, o terceiro tipo de cancro mais comum a nível global. A sua relevância na simulação do cancro colorretal humano torna-a inestimável para a compreensão da biologia do cancro e para o teste de estratégias terapêuticas.
Homogeneidade: Notavelmente, cerca de 70% das células HCT116 apresentam perfis genéticos consistentes, oferecendo uma população relativamente homogénea. Esta uniformidade é crucial para estudos focados na expressão genética, vias de sinalização celular e avaliação da eficácia de tratamentos farmacológicos, uma vez que garante consistência e fiabilidade nos resultados experimentais.
Eficiência de transfecção: Uma das características distintivas das células HCT116 é a sua elevada receptividade à transfecção, especialmente com vetores virais. Esta característica é particularmente benéfica na investigação em terapia genética, permitindo a introdução de material genético com eficiência e precisão, facilitando assim manipulações genéticas avançadas e estudos funcionais.
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Aplicações da linha celular HCT116 na investigação
A linha celular HCT116 tem uma vasta gama de aplicações na investigação do cancro. Algumas aplicações de destaque são:
Biologia do cancro
A linha celular de cancro do cólon HCT116 é utilizada para estudar a progressão e o desenvolvimento do cancro do cólon. Além disso, ajuda a esclarecer os mecanismos subjacentes e as vias de sinalização envolvidas na proliferação, migração e invasão do cancro. Um estudo utilizou células HCT116 para estudar genes envolvidos no desenvolvimento da resistência aos medicamentos. Os investigadores sobreexpressaram o gene MDR1 em células de cancro do cólon e observaram a expressão de isoformas de NOX (óxido de NADPH) e de Nrf2. O estudo revelou que a regulação positiva de NOX2 e Nrf2 causa quimiorresistência nas células cancerígenas; assim, estes genes podem ser alvo de intervenção para superar o desenvolvimento de resistência durante a terapia oncológica [1]. Da mesma forma, uma investigação realizada em 2021 relatou que a via de sinalização NF-κB está envolvida na regulação da proliferação e migração do cancro do cólon. Assim, pode ser alvo de intervenção para desenvolver terapêuticas novas e eficazes contra o carcinoma colorretal [2].
No domínio da oncologia, é fundamental compreender os processos complexos do ciclo celular, da proliferação e crescimento, e da apoptose. Estas funções biológicas são cruciais no estudo de linhas celulares humanas, particularmente aquelas derivadas de células malignas, tais como células de cancro do cólon humano e modelos de cancro do pâncreas. As linhas celulares HCT116 e SW620, por exemplo, são fundamentais para explorar os mecanismos subjacentes ao cancro do cólon e do pâncreas, respetivamente. Através de técnicas como a citometria de fluxo e ensaios clonogénicos, os investigadores podem elucidar os perfis de expressão genética e o comportamento de células independentes dentro dos tumores, esclarecendo como o cancro comunica dentro da matriz extracelular.
O papel da apoptose na progressão do cancro
A apoptose, ou morte celular programada, desempenha um papel crítico na manutenção da homeostase celular e é uma área-chave de estudo na investigação do cancro. A distinção entre a apoptose não relacionada e a apoptose especificamente induzida no contexto do cancro, como a morte de células cancerígenas do cólon, é crucial. Este processo não se resume apenas à eliminação de células, mas envolve uma interação complexa de sinais que podem afetar o crescimento tumoral e a metástase. Ao examinar a apoptose e a morte celular em conjunto com supressores de metástase e a atividade supressora de tumores, os cientistas podem obter insights sobre as vias que regulam a progressão do cancro e o potencial metastático.
Metástase e Marcadores Moleculares no Cancro
A metástase continua a ser um dos aspetos mais formidáveis do cancro, sendo a metástase hematogênica uma preocupação significativa na disseminação de células malignas. A exploração da metástase envolve o estudo do movimento e das capacidades de invasão das células cancerosas, ou locomoção celular, e de como as células interagem com o seu entorno, incluindo a matriz extracelular. Marcadores moleculares como a expressão de CD133 e o recetor do fator de crescimento epidérmico são fundamentais para identificar e compreender o comportamento das células de carcinoma do cólon positivo e de outros tipos de cancro. A via SIRT6, por exemplo, surgiu como uma área de interesse devido ao seu potencial papel na modulação do crescimento tumoral e do cancro do cólon metastático.
Toxicologia/desenvolvimento de medicamentos
A linha celular HCT116 é utilizada como modelo de triagem para novos medicamentos contra o cancro. Foram realizados vários estudos para avaliar a eficácia e a toxicidade de medicamentos anticancerígenos, incluindo produtos naturais e nanopartículas sintetizadas quimicamente. Assim, a investigação avaliou a citotoxicidade de nanopartículas de prata sintetizadas a partir de extratos de uma erva medicinal, a Caesalpinia pulcherrima, em células HCT116 [3]. Num estudo, os investigadores utilizaram a linha celular cancerígena HCT116 para avaliar o potencial anticancerígeno do extrato aquoso de chá de cacau. Descobriram que o extrato de chá de cacau reduz a proliferação do cancro do cólon e induz a morte celular [4]. Outro estudo utilizou células cancerígenas HCT116 e descobriu que os extratos de batata-do-ar, Dioscorea bulbifera, exibem atividade pró-apoptótica em células de carcinoma colorretal através da ativação da cascata de sinalização JNK e da supressão do gene ERK1/2 [5].
Os efeitos da metformina nas células cancerígenas, particularmente no contexto do cancro do cólon e do pâncreas, exemplificam como a compreensão das funções biológicas das células cancerígenas pode conduzir a potenciais estratégias terapêuticas. A investigação sobre a sobrevivência clonogénica, ou a capacidade de formar clones, das células cancerígenas após o tratamento com agentes como a metformina ou que visam vias específicas, tais como o recetor do fator de crescimento epidérmico, pode fornecer informações valiosas sobre tratamentos eficazes contra o cancro. Além disso, a utilização de clones HCT116 e de populações de células HCT116 nestes estudos permite uma compreensão matizada de como as células cancerígenas respondem a diferentes intervenções terapêuticas, abrindo caminho para abordagens mais personalizadas no tratamento do cancro.
Células HCT116: Publicações de investigação
Esta secção irá abordar algumas publicações recentes significativas e mais citadas que apresentam a linha celular HCT116.
Este estudo foi publicado no Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2017). Os investigadores utilizaram as linhas celulares de cancro do cólon HCT116 e de cancro do pulmão A549 para avaliar os efeitos citotóxicos das nanopartículas de óxido de estanho sintetizadas a partir de sementes de Piper nigrum.
Esta investigação publicada na revista Cancer Letters (2018) propõe que o lncRNA SNHG15 promove a migração das células cancerígenas do cólon em linhas celulares de cancro colorretal, incluindo a HCT116.
A superexpressão do RNA não codificante longo TUG1 promove a progressão do cancro do cólon
Este artigo foi publicado na revista Medical Science Monitor em 2016. O estudo descobriu que o LncRNA oncogénico TUG1 promove a proliferação e a migração das células cancerígenas do cólon HCT116.
Esta investigação, publicada na revista Biochemical Pharmacology (2018), propõe que o desenvolvimento de resistência aos medicamentos aumenta os níveis de enzimas produtoras de H2S nas células cancerígenas do cólon HCT116.
Este artigo de investigação publicado no International Journal of Environmental Health Research (2023) propõe que o extrato de Inula viscosa L. exerce um efeito anticancerígeno nas células de cancro colorretal HCT116 através da regulação de microRNAs.
Recursos sobre as células HCT116
Abaixo encontram-se alguns recursos sobre as células HCT116.
- Transfecção de HCT116: Este vídeo é um guia passo a passo para a transfecção de células cancerígenas HCT116.
- Cultivo da linha celular HCT116: Este vídeo mostra o protocolo de subcultivo para a linha celular de cancro do cólon HCT116.
- Subcultura da linha celular HCT116: Este site contém muita informação útil sobre o meio de cultura HCT116. Além disso, fornece procedimentos para congelamento, descongelamento e subcultura de células.
Perguntas frequentes sobre as células HCT116
Referências
- Waghela, B.N., F.U. Vaidya e C. Pathak: A regulação positiva de NOX-2 e Nrf-2 promove a resistência ao 5-fluorouracilo em células de carcinoma do cólon humano (HCT-116). Biochemistry (Moscovo), 2021, 86, p. 262-274.
- Yang, M., et al., A astragalina inibe a proliferação e a migração das células HCT116 do cancro do cólon humano através da regulação da via de sinalização NF-κB. Frontiers in Pharmacology, 2021, 12: p. 639256.
- Deepika, S., C.I. Selvaraj e S.M. Roopan, Triagem das bioatividades de Caesalpinia pulcherrima L. swartz e da citotoxicidade de nanopartículas de prata sintetizadas a partir do extrato na linha celular HCT116. Materials Science and Engineering, C, 2020, 106, p. 110279.
- Gao, X., et al., O chá de cacau (Camellia ptilophylla) induz a apoptose dependente das mitocôndrias nas células HCT116 através da geração de ROS e da via de sinalização PI3K/Akt. Food Research International, 2020, 129, p. 108854.
- Hidayat, A.F.A., et al., A Dioscorea bulbifera induziu a apoptose através da inibição das vias de sinalização ERK 1/2 e da ativação das vias de sinalização JNK em células de carcinoma colorretal humano HCT116. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2018. 104: p. 806-816.
