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Publicado: 2023 | Última revisão: maio de 2026

Linha celular HCT116: Um pilar na investigação do cancro colorretal

A linha celular HCT116 serve como pedra angular na exploração do cancro colorretal, oferecendo informações inestimáveis sobre a patogénese da doença e potenciais vias terapêuticas. Reconhecida pela sua utilidade na investigação do cancro e em avaliações farmacológicas, a HCT116 facilita estudos fundamentais sobre o comportamento tumoral e a eficácia dos medicamentos.

📋 Linha celular HCT116 — Factos rápidos
Meio de crescimento
O meio McCoys 5a, suplementado com 3,0 g/L de L-glicose, 1,5 mM de L-glutamina, 3,0 g/L de NaHCO3 e 10% de soro fetal bovino, é ideal para o cultivo de células HCT116. É aconselhável renovar o meio 1 a 2 vezes por semana.
Tempo de duplicação
O tempo de duplicação das células cancerígenas HCT116 varia entre 25 e 35 horas.
Tipo de crescimento
A linha celular de cancro do cólon HCT116 é aderente, com as células a crescerem em monocamadas.
Nível de biossegurança
BSL-1

Origens e características fundamentais das células HCT116

Compreender as origens e as características básicas das células HCT116, tais como as suas características morfológicas, composição genética e dimensões celulares, é essencial para os investigadores que se dedicam a estudos utilizando esta linha celular.

Proveniência e panorama genético: Originárias do cólon de um homem caucasiano de 48 anos diagnosticado com cancro colorretal, as células HCT116 destacam-se por uma mutação no códon 13 (G13D) do gene KRAS, parte da via de sinalização RAS/RAF/MEK/ERK. Esta mutação específica é fundamental na transformação oncogénica destas células, sublinhando a sua relevância na investigação do cancro.

Morfologia e características de crescimento: Apresentando uma morfologia de tipo epitelial, as células HCT116 crescem tipicamente em culturas de monocamada, mas também podem formar esferóides com diâmetros de 150-400 µm. Esta adaptabilidade nos padrões de crescimento sublinha a sua versatilidade em várias configurações experimentais.

Perfil cromossómico: A composição cromossómica das células HCT116 é quase diploide, com aproximadamente 70% da população celular a possuir 45 cromossomas. Notavelmente, existe uma amplificação recorrente nos braços longos dos cromossomas 8, 10, 16 e 17, enquanto o cromossoma Y está ausente, o que contribui para a sua assinatura genómica única.

Análise comparativa: Linhas celulares HCT116 vs. HT29

Ao comparar a HCT116 com a HT29, outra linha celular de carcinoma colorretal humano, surgem diferenças distintas no seu potencial oncogénico e nas suas capacidades de diferenciação:

Agressividade oncogênica e diferenciação: as células HCT116 caracterizam-se pela sua elevada agressividade oncogênica e potencial de diferenciação limitado, tornando-as um modelo para o estudo de fenótipos tumorais agressivos. Em contrapartida, as células HT29 exibem a capacidade de se diferenciarem em linhagens semelhantes a enterócitos e produtoras de mucina, proporcionando um modelo contrastante que imita diversos aspetos da biologia do cancro colorretal.

Esta compreensão comparativa das linhas celulares HCT116 e HT29 enriquece o conjunto de ferramentas à disposição dos investigadores, permitindo investigações mais matizadas sobre a natureza multifacetada do cancro colorretal.

Pólipos pré-cancerosos que se desenvolvem no cólon.

Manuseamento das células HCT116

Tempo de duplicação:

O tempo de duplicação das células cancerígenas HCT116 varia entre 25 e 35 horas.

Adesivas ou em suspensão:

A linha celular de cancro do cólon HCT116 é aderente, com as células a crescerem em monocamadas.

Densidade de sementeira:

Recomenda-se uma densidade de sementeira de 2 x 104 células/cm² para a cultura celular HCT116. Para a subcultura, as células devem ser desprendidas utilizando solução de Accutase após uma lavagem com PBS 1x. Após a centrifugação, o sedimento celular é ressuspenso em meio de crescimento fresco e transferido para um novo frasco.

Meio de crescimento:

O meio McCoys 5a, suplementado com 3,0 g/L de L-glicose, 1,5 mM de L-glutamina, 3,0 g/L de NaHCO3 e 10% de soro fetal bovino, é ideal para o cultivo de células HCT116. É aconselhável renovar o meio 1 a 2 vezes por semana.

Condições de crescimento (temperatura, CO₂):

O cultivo ocorre numa incubadora humidificada a 37 °C com uma atmosfera de 5% de CO2.

Armazenamento:

As células HCT116 podem ser armazenadas a temperaturas inferiores a -150 °C, tanto na fase vapor como na fase líquida do azoto líquido.

Processo de congelação e meio:

Utilize o meio CM-1 ou CM-ACF para a criopreservação. Recomenda-se um método de congelamento a taxa controlada, permitindo uma diminuição gradual da temperatura de 1 °C por minuto, o que ajuda a manter a viabilidade celular.

Processo de descongelamento:

Descongele as células HCT116 num banho-maria a 37 °C. Após adicionar o meio de crescimento, centrifugue para remover os resíduos do meio de congelamento. Resuspende o sedimento celular em meio fresco e cultive em frascos novos.

Nível de biossegurança:

Nível 1

HCT 116 cells

Células de cancro do cólon HCT116 em cultura, ampliadas a 20x e 10x.

Vantagens da linha celular HCT116

Esta secção aprofunda a linha celular HCT116, destacando o seu papel fundamental na investigação do cancro, particularmente no estudo do cancro colorretal, e discutindo as suas vantagens inerentes.

A linha celular HCT116 destaca-se na investigação do cancro devido a várias vantagens fundamentais:

  • Modelo de cancro colorretal: Serve como um modelo in vitro amplamente reconhecido para o cancro colorretal, o terceiro tipo de cancro mais comum a nível global. A sua relevância na simulação do cancro colorretal humano torna-a inestimável para a compreensão da biologia do cancro e para o teste de estratégias terapêuticas.

  • Homogeneidade: Notavelmente, cerca de 70% das células HCT116 apresentam perfis genéticos consistentes, oferecendo uma população relativamente homogénea. Esta uniformidade é crucial para estudos focados na expressão genética, vias de sinalização celular e avaliação da eficácia de tratamentos farmacológicos, uma vez que garante consistência e fiabilidade nos resultados experimentais.

  • Eficiência de transfecção: Uma das características distintivas das células HCT116 é a sua elevada receptividade à transfecção, especialmente com vetores virais. Esta característica é particularmente benéfica na investigação em terapia genética, permitindo a introdução de material genético com eficiência e precisão, facilitando assim manipulações genéticas avançadas e estudos funcionais.

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Aplicações da linha celular HCT116 na investigação

A linha celular HCT116 tem uma vasta gama de aplicações na investigação do cancro. Algumas aplicações de destaque são:

Biologia do cancro

A linha celular de cancro do cólon HCT116 é utilizada para estudar a progressão e o desenvolvimento do cancro do cólon. Além disso, ajuda a esclarecer os mecanismos subjacentes e as vias de sinalização envolvidas na proliferação, migração e invasão do cancro. Um estudo utilizou células HCT116 para estudar genes envolvidos no desenvolvimento da resistência aos medicamentos. Os investigadores sobreexpressaram o gene MDR1 em células de cancro do cólon e observaram a expressão de isoformas de NOX (óxido de NADPH) e de Nrf2. O estudo revelou que a regulação positiva de NOX2 e Nrf2 causa quimiorresistência nas células cancerígenas; assim, estes genes podem ser alvo de intervenção para superar o desenvolvimento de resistência durante a terapia oncológica [1]. Da mesma forma, uma investigação realizada em 2021 relatou que a via de sinalização NF-κB está envolvida na regulação da proliferação e migração do cancro do cólon. Assim, pode ser alvo de intervenção para desenvolver terapêuticas novas e eficazes contra o carcinoma colorretal [2].

No domínio da oncologia, é fundamental compreender os processos complexos do ciclo celular, da proliferação e crescimento, e da apoptose. Estas funções biológicas são cruciais no estudo de linhas celulares humanas, particularmente aquelas derivadas de células malignas, tais como células de cancro do cólon humano e modelos de cancro do pâncreas. As linhas celulares HCT116 e SW620, por exemplo, são fundamentais para explorar os mecanismos subjacentes ao cancro do cólon e do pâncreas, respetivamente. Através de técnicas como a citometria de fluxo e ensaios clonogénicos, os investigadores podem elucidar os perfis de expressão genética e o comportamento de células independentes dentro dos tumores, esclarecendo como o cancro comunica dentro da matriz extracelular.

O papel da apoptose na progressão do cancro

A apoptose, ou morte celular programada, desempenha um papel crítico na manutenção da homeostase celular e é uma área-chave de estudo na investigação do cancro. A distinção entre a apoptose não relacionada e a apoptose especificamente induzida no contexto do cancro, como a morte de células cancerígenas do cólon, é crucial. Este processo não se resume apenas à eliminação de células, mas envolve uma interação complexa de sinais que podem afetar o crescimento tumoral e a metástase. Ao examinar a apoptose e a morte celular em conjunto com supressores de metástase e a atividade supressora de tumores, os cientistas podem obter insights sobre as vias que regulam a progressão do cancro e o potencial metastático.

Metástase e Marcadores Moleculares no Cancro

A metástase continua a ser um dos aspetos mais formidáveis do cancro, sendo a metástase hematogênica uma preocupação significativa na disseminação de células malignas. A exploração da metástase envolve o estudo do movimento e das capacidades de invasão das células cancerosas, ou locomoção celular, e de como as células interagem com o seu entorno, incluindo a matriz extracelular. Marcadores moleculares como a expressão de CD133 e o recetor do fator de crescimento epidérmico são fundamentais para identificar e compreender o comportamento das células de carcinoma do cólon positivo e de outros tipos de cancro. A via SIRT6, por exemplo, surgiu como uma área de interesse devido ao seu potencial papel na modulação do crescimento tumoral e do cancro do cólon metastático.

Toxicologia/desenvolvimento de medicamentos

A linha celular HCT116 é utilizada como modelo de triagem para novos medicamentos contra o cancro. Foram realizados vários estudos para avaliar a eficácia e a toxicidade de medicamentos anticancerígenos, incluindo produtos naturais e nanopartículas sintetizadas quimicamente. Assim, a investigação avaliou a citotoxicidade de nanopartículas de prata sintetizadas a partir de extratos de uma erva medicinal, a Caesalpinia pulcherrima, em células HCT116 [3]. Num estudo, os investigadores utilizaram a linha celular cancerígena HCT116 para avaliar o potencial anticancerígeno do extrato aquoso de chá de cacau. Descobriram que o extrato de chá de cacau reduz a proliferação do cancro do cólon e induz a morte celular [4]. Outro estudo utilizou células cancerígenas HCT116 e descobriu que os extratos de batata-do-ar, Dioscorea bulbifera, exibem atividade pró-apoptótica em células de carcinoma colorretal através da ativação da cascata de sinalização JNK e da supressão do gene ERK1/2 [5].

Os efeitos da metformina nas células cancerígenas, particularmente no contexto do cancro do cólon e do pâncreas, exemplificam como a compreensão das funções biológicas das células cancerígenas pode conduzir a potenciais estratégias terapêuticas. A investigação sobre a sobrevivência clonogénica, ou a capacidade de formar clones, das células cancerígenas após o tratamento com agentes como a metformina ou que visam vias específicas, tais como o recetor do fator de crescimento epidérmico, pode fornecer informações valiosas sobre tratamentos eficazes contra o cancro. Além disso, a utilização de clones HCT116 e de populações de células HCT116 nestes estudos permite uma compreensão matizada de como as células cancerígenas respondem a diferentes intervenções terapêuticas, abrindo caminho para abordagens mais personalizadas no tratamento do cancro.

Células HCT116: Publicações de investigação

Esta secção irá abordar algumas publicações recentes significativas e mais citadas que apresentam a linha celular HCT116.

Estudo de citotoxicidade de nanopartículas de SnO2 sintetizadas mediadas por sementes de Piper nigrum em linhas celulares de cancro colorretal (HCT116) e de pulmão (A549)

Este estudo foi publicado no Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2017). Os investigadores utilizaram as linhas celulares de cancro do cólon HCT116 e de cancro do pulmão A549 para avaliar os efeitos citotóxicos das nanopartículas de óxido de estanho sintetizadas a partir de sementes de Piper nigrum.

O RNA não codificante longo SNHG15 interage com e estabiliza o fator de transcrição Slug, promovendo a progressão do cancro do cólon

Esta investigação publicada na revista Cancer Letters (2018) propõe que o lncRNA SNHG15 promove a migração das células cancerígenas do cólon em linhas celulares de cancro colorretal, incluindo a HCT116.

A superexpressão do RNA não codificante longo TUG1 promove a progressão do cancro do cólon

Este artigo foi publicado na revista Medical Science Monitor em 2016. O estudo descobriu que o LncRNA oncogénico TUG1 promove a proliferação e a migração das células cancerígenas do cólon HCT116.

A resistência aos medicamentos induz a regulação positiva das enzimas produtoras de H2S nas células cancerígenas do cólon HCT116

Esta investigação, publicada na revista Biochemical Pharmacology (2018), propõe que o desenvolvimento de resistência aos medicamentos aumenta os níveis de enzimas produtoras de H2S nas células cancerígenas do cólon HCT116.

Efeitos apoptóticos e antiproliferativos do extrato aquoso de Inula viscosa L. na expressão de microRNAs na linha celular HCT 116: um estudo in vitro

Este artigo de investigação publicado no International Journal of Environmental Health Research (2023) propõe que o extrato de Inula viscosa L. exerce um efeito anticancerígeno nas células de cancro colorretal HCT116 através da regulação de microRNAs.

Recursos sobre as células HCT116

Abaixo encontram-se alguns recursos sobre as células HCT116.

Perguntas frequentes sobre as células HCT116

A HCT116 é uma linha celular derivada do carcinoma colorrectal humano, amplamente utilizada na investigação do cancro para estudar a biologia, a genética e as respostas ao tratamento do cancro colorrectal
Em condições normais de cultura, as células HCT116, que exibem uma morfologia semelhante à epitelial, medem normalmente cerca de 15 micrómetros de diâmetro
Embora inicialmente consideradas quase diplóides, outras análises genéticas mostraram que as células HCT116 possuem anomalias cromossómicas, tornando-as aneuplóides, o que é uma caraterística de muitas células cancerígenas
O rácio de divisão para as células HCT116, que indica a proporção de células transferidas para um novo recipiente de cultura durante a subcultura, varia normalmente entre 1:3 e 1:6, dependendo da densidade celular e da taxa de crescimento
As células HCT116 e SW480, ambas derivadas de carcinomas colorrectais, diferem nas suas mutações genéticas, capacidades tumorigénicas e respostas a medicamentos, reflectindo a heterogeneidade do cancro colorrectal
Embora ambas as linhas celulares HCT116 e HT-29 sejam utilizadas na investigação do cancro colorrectal, diferem na sua composição genética, caraterísticas morfológicas e respostas à quimioterapia, o que as torna adequadas para diferentes focos de investigação
As células HCT116 são preferidas na investigação do cancro devido ao seu fundo genético bem caracterizado, à reprodutibilidade das experiências e à sua relevância para o cancro colorrectal humano, o que as torna valiosas para estudos sobre a biologia do cancro e a eficácia dos medicamentos

 Referências

  1. Waghela, B.N., F.U. Vaidya e C. Pathak: A regulação positiva de NOX-2 e Nrf-2 promove a resistência ao 5-fluorouracilo em células de carcinoma do cólon humano (HCT-116). Biochemistry (Moscovo), 2021, 86, p. 262-274.
  2. Yang, M., et al., A astragalina inibe a proliferação e a migração das células HCT116 do cancro do cólon humano através da regulação da via de sinalização NF-κB. Frontiers in Pharmacology, 2021, 12: p. 639256.
  3. Deepika, S., C.I. Selvaraj e S.M. Roopan, Triagem das bioatividades de Caesalpinia pulcherrima L. swartz e da citotoxicidade de nanopartículas de prata sintetizadas a partir do extrato na linha celular HCT116. Materials Science and Engineering, C, 2020, 106, p. 110279.
  4. Gao, X., et al., O chá de cacau (Camellia ptilophylla) induz a apoptose dependente das mitocôndrias nas células HCT116 através da geração de ROS e da via de sinalização PI3K/Akt. Food Research International, 2020, 129, p. 108854.
  5. Hidayat, A.F.A., et al., A Dioscorea bulbifera induziu a apoptose através da inibição das vias de sinalização ERK 1/2 e da ativação das vias de sinalização JNK em células de carcinoma colorretal humano HCT116. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2018. 104: p. 806-816.

 

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