Linha celular BxPC-3
A BxPC-3 é uma linha celular de cancro pancreático derivada de humanos. É amplamente utilizada em estudos sobre o cancro. Os investigadores utilizam principalmente estas células para estudar a biologia do cancro do pâncreas, identificar alvos terapêuticos e desenvolver medicamentos anti-cancro.
Este artigo inclui informações cruciais sobre a linha celular BxPC-3 que podem ajudá-lo significativamente a trabalhar com ela. Abordará principalmente:
- Informações gerais e origem da linha celular BxPC-3
- Cultura de células BxPC-3
- Linha celular BxPC-3: Vantagens e limitações
- Aplicações das células BxPC-3 na investigação
- Publicações de investigação sobre células BxPC-3
- Recursos para a linha de células BxPC-3: Protocolos, vídeos e muito mais
1. informações gerais e origem da linha celular BxPC-3
O conhecimento da origem de uma linha celular é fundamental para a sua aplicabilidade na investigação. A familiaridade com as suas caraterísticas, incluindo a morfologia, o tamanho das células e a ploidia, torna a sua utilização mais simples e conveniente. Neste artigo, ficará a conhecer a origem e os atributos gerais das células BxPC-3: O que são as células BxPC-3? O que é a linha celular BxPC-3? Qual é a origem da linha de células BxPC-3? Qual é a morfologia da BxPC-3?
- As células BxPC-3, de carcinoma pancreático humano, foram derivadas de uma mulher europeia de 61 anos com adenocarcinoma pancreático em 1986. Estas células foram confirmadas como tumorigénicas mesmo depois de a doente ter sido submetida a várias sessões de rádio e quimioterapia. Assim, a linha celular estabelecida é um modelo inestimável para estudar o desenvolvimento e a progressão do cancro.
- As células BxPC-3 possuem uma morfologia semelhante à das células epiteliais.
- O número cromossómico modal da BxPC-3 é 59. Estas células apresentam uma deleção homozigótica no cromossoma 18q, que codifica a proteína SMAD4/DPC4. Além disso, a linha celular não apresenta a mutação kras do BxPC-3, comum nos tumores pancreáticos. A deleção BxPC-3 braf também é encontrada nestas células de cancro pancreático.
Qual é a diferença entre BxPC3 e PANC-1?
As células BxPC-3 PADC (adenocarcinoma ductal pancreático) e PANC-1 são linhas celulares de cancro pancreático primário com uma morfologia epitelial. Neste caso, as células anteriores possuem propriedades mais epiteliais, enquanto as posteriores apresentam atributos mais mesenquimatosos [1].
2. cultura de células BxPC-3
A linha celular BxPC-3 é amplamente utilizada em laboratórios de investigação sobre o cancro. É necessário conhecer os seguintes pontos-chave para uma cultura eficiente desta linha de células de cancro pancreático. Ficará a saber: Qual é o tempo de duplicação da bxpc3? Como se faz a cultura da linha de células BxPC-3?
Pontos-chave para a cultura de células BxPC-3
|
Tempo de duplicação da população: |
O tempo de duplicação das células BxPC-3 varia entre 48 e 60 horas. |
|
Aderente ou em suspensão: |
A BxPC-3 é uma linha celular aderente. |
|
Rácio de divisão: |
As células BxPC-3 são subcultivadas numa proporção de 1:2 a 1:4. As células são lavadas com 1 x PBS e incubadas com uma solução de passagem chamada accutase. Após 8-10 minutos, é adicionado meio fresco às células e estas são centrifugadas. O pellet é novamente ressuspenso em meio e as células são vertidas para um novo recipiente de cultura para crescimento. |
|
Meio de cultura: |
O meio RPMI 1640 é utilizado para a cultura da linha de células BxPC-3. É suplementado com 10% de soro fetal bovino, 2,1 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO3 para obter um crescimento celular ideal. O meio deve ser substituído 2 a 3 vezes por semana. |
|
Condições de crescimento: |
As culturas de células BxPC-3 são mantidas numa incubadora humidificada a 37 °C ligada a um fornecimento de 5% de CO2. |
|
Armazenamento: |
As células congeladas são geralmente armazenadas a uma temperatura inferior a -150 °C ou na fase de vapor do azoto líquido para proteger a viabilidade das células. |
|
Processo e meio de congelação: |
CM-1 ou CM-ACF podem ser utilizados para congelar culturas de células BxPC-3. Segue-se um processo de congelação lento que permite apenas uma descida de 1 °C na temperatura para evitar qualquer choque nas células. |
|
Processo de descongelação: |
As células BxPC-3 congeladas são descongeladas num banho de água pré-definido a 37 °C durante 40 a 60 segundos. Depois de deixar um pequeno aglomerado de gelo, as células são adicionadas a meios de cultura frescos e centrifugadas para remover os elementos dos meios de congelação. Em seguida, o pellet de células é ressuspendido e as células são dispensadas no frasco para crescimento. |
|
Nível de biossegurança: |
As culturas de células BxPC-3 são mantidas em laboratórios de nível de biossegurança 1. |
3. linha celular BxPC-3: Vantagens e limitações
A BxPC-3 é uma linha celular de adenocarcinoma pancreático bem conhecida, associada a várias vantagens e limitações. As principais vantagens e desvantagens da linha celular são aqui enumeradas.
Vantagens
As principais vantagens das células BxPC-3 são
-
Modelo in vitro do cancro do pâncreas
As células BxPC-3, derivadas de doentes com adenocarcinoma pancreático, apresentam caraterísticas relevantes, o que as torna um modelo adequado para estudar o comportamento do cancro pancreático in vitro.
-
Linha celular tumorigénica
As células BxPC-3 possuem propriedades tumorigénicas e podem formar tumores quando injectadas em ratinhos nus ou imunocomprometidos. Estes tumores assemelham-se muito aos tumores de adenocarcinoma pancreático primário, tornando o modelo de xenoenxerto BxPC-3 ideal para estudar o crescimento e a progressão do cancro.
Limitações
As limitações associadas à linha celular BxPC-3 são
-
Contaminação cruzada
A linha celular BxPC-3, como qualquer outra, comporta um risco de contaminação cruzada. Os investigadores devem ter cuidado e aderir a protocolos rigorosos de prevenção da contaminação quando manuseiam estas células.
-
Taxa de crescimento lento
As células BxPC-3 apresentam uma taxa de proliferação relativamente lenta, com um tempo de duplicação que varia entre 48 e 60 horas. Esta caraterística pode exigir períodos de incubação mais longos para experiências específicas, causando potencialmente atrasos no progresso da investigação.
4. aplicações das células BxPC-3 na investigação
As células BxPC-3 oferecem muitas aplicações na investigação do cancro. As aplicações mais comuns são:
- Investigação do cancro pancreático: As células BxPC-3 imitam o adenocarcinoma pancreático, pelo que são utilizadas para explorar os mecanismos genéticos e moleculares subjacentes ao desenvolvimento e crescimento do tumor. Além disso, os investigadores descobrem novos biomarcadores e alvos terapêuticos utilizando estas células. Além disso, as células BxPC-3 expressam significativamente factores angiogénicos, ou seja, interleucina-8 (IL-8), prostaglandina E2 (PGE2) e fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), que as tornam adequadas para o estudo da angiogénese. Neste caso, a angiogénese é um processo crucial associado ao crescimento do cancro e à metástase. Um estudo publicado em 2022 estudou que a sobreexpressão da laminina-5 gama-2 (LAMC2) no BxPC3 PDAC (adenocarcinoma ductal pancreático) aumenta a sua tumorigénese através da regulação da via de sinalização EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR do BxPC3 [2].
- Descoberta e desenvolvimento de medicamentos: A linha celular BxPC-3 serve como um modelo valioso para o ensaio de medicamentos anticancerígenos. Os investigadores examinam os efeitos citotóxicos, anti-metastáticos e apoptóticos de potenciais medicamentos no PDAC BxPC3. Um estudo realizado por Alexandria Turner e colegas em 2020 explorou as propriedades apoptóticas dos extractos de frutos de Elaeocarpus reticulatus em células de cancro pancreático BxPC-3 [3]. Da mesma forma, foi realizada uma investigação em 2020 que determinou o potencial anti-cancro de um extrato metanólico de uma planta chamada Oxialis obtriangulata em células BxPC-3. Além disso, os investigadores também estudaram a via mecanicista celular através da qual o extrato da planta estava a exercer efeitos terapêuticos [4].
5.publicações de investigação sobre células BxPC-3
Esta secção enumera algumas das publicações mais citadas e interessantes sobre a linha celular BxPC-3.
Esta publicação na Chemico-Biological Interactions (2020) explorou os efeitos apoptóticos de um produto natural, a licocumarona, nas células de cancro pancreático BxPC-3.
Este artigo de investigação foi publicado na revista Anticancer Research (2022). O estudo propôs que a hidroxicloroquina provoca a morte das células BxPC3 através da inibição do gene BCL-XL.
Esta pesquisa foi publicada em 2020 no Journal of Cellular Biochemistry. O estudo indica que um composto natural, o salidrosídeo, apresenta actividades anticancerígenas nas células BxPC-3 regulando a cascata de sinalização HIF-1α (fator induzível pela hipóxia) e LOXL2.
Este artigo da revista Biomedicine & Pharmacotherapy sugere que o ibrutinib pode ser utilizado como um excelente radiossensibilizador em doentes com cancro do pâncreas. In vitro, o estudo em células BxPC-3 indica que diminui a fosforilação do EGFR em BxPC3 e a expressão de pAKT e de genes a jusante, que são regulados pela radioterapia.
Este estudo na Integrative Cancer Therapies propôs que um produto natural, a quelidonina, exerce atividade apoptótica nas células pancreáticas humanas BxPC-3 através da regulação da sinalização BxPC3 p53 e GADD45a.
6. recursos para a linha celular BxPC-3: Protocolos, vídeos e muito mais
A linha celular BxPC-3 tem muitas vantagens cativantes que a tornam adequada para uso em investigação. Muitos recursos online sobre a linha celular BxPC-3 mencionam o seu manuseamento, manutenção e protocolo de transfecçãos.
- Transfecção de BxPC3: Este vídeo é um guia passo a passo para aprender o protocolo de transfecção para células BxPC-3.
Esta secção do artigo inclui algumas ligações que explicam os protocolos de cultura de células BxPC3.
- Cultura de células BxPC3: Este sítio Web ajudá-lo-á a aprender protocolos para a subcultura e manuseamento de culturas criopreservadas e proliferativas de BxPC-3.
Referências
- Kim, Y., et al., Perfil proteómico comparativo de linhas celulares de adenocarcinoma ductal pancreático. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., A superexpressão de laminina-5 gama-2 promove a tumorigênese do adenocarcinoma ductal pancreático através da cascata EGFR / ERK1 / 2 / AKT / mTOR. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Os extratos de frutas Elaeocarpus reticulatus reduzem a viabilidade e induzem apoptose em células de câncer pancreático in vitro. Relatórios de biologia molecular, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Potencial anticancerígeno de Oxialis obtriangulata em células de cancro pancreático através da regulação da via mediada por ERK/Src/STAT3. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.