Células BEAS-2B - Células BEAS-2B na investigação de doenças respiratórias: um guia completo
A BEAS-2B é uma linha celular epitelial pulmonar humana imortalizada e não tumorigénica. É um modelo in vitro amplamente utilizado para estudar a resposta das células pulmonares a vários carcinogéneos e substâncias tóxicas. Além disso, é uma ferramenta de investigação valiosa para o estudo de diferentes infeções e doenças respiratórias, tais como a COVID-19 e os carcinomas pulmonares.
- Meio de crescimento
- Utiliza-se o meio BEGM (Meio de Crescimento de Células Epiteliais Brônquicas) contendo 10% de soro fetal bovino para a cultura da linha celular pulmonar BEAS-2B. O meio deve ser substituído a cada 2 a 3 dias.
- Tempo de duplicação
- O tempo de duplicação da população BEAS-2B é de aproximadamente 26 horas.
- Tipo de crescimento
- A BEAS-2B é uma linha celular aderente de tipo epitelial.
- Nível de biossegurança
- BSL-1
- Disponível em
- Cytion — Encomendar BEAS-2B
Neste artigo, iremos abordar quase todos os aspetos da linha celular pulmonar BEAS-2B, incluindo a sua origem, informações sobre a cultura celular, vantagens, desvantagens e aplicações na investigação. Em particular, iremos abordar:
- Origem e características gerais das células BEAS-2B
- Linha celular BEAS-2B: Informações sobre cultura
- Vantagens e desvantagens das células BEAS-2B
- Aplicações da linha celular BEAS-2B na investigação
- Células BEAS-2B: Publicações de investigação
- Protocolos de cultura celular
1. Origem e características gerais das células BEAS-2B
A primeira coisa que se procura numa linha celular é a sua origem e características gerais. Aqui, irá conhecer as características principais e a origem das células epiteliais brônquicas humanas BEAS-2B. Irá estudar: O que é a linha celular pulmonar BEAS-2B? Que tipo de células são as BEAS-2B? Qual é a origem das células BEAS-2B?
- A BEAS-2B, a linha celular do epitélio brônquico, foi desenvolvida a partir de tecido pulmonar humano não canceroso em 1988 pelo grupo de Curtis C. Harris [1].
- As células BEAS-2B possuem uma morfologia semelhante à epitelial.
HBEpC vs. BEAS-2B
As HBEpC são células epiteliais brônquicas primárias humanas. À semelhança das BEAS-2B, são células epiteliais brônquicas humanas normais. No entanto, têm uma esperança de vida limitada em comparação com as BEAS-2B imortalizadas. Ambas as linhas celulares podem ser utilizadas para estudar a biologia pulmonar, a toxicologia e a modelação de doenças.
Linha celular BEAS-2B: Informações sobre cultura
As informações sobre a cultura de uma linha celular podem facilitar o seu trabalho com ela. Nesta secção do artigo, irá aprender todos os conceitos básicos para a cultura da linha celular pulmonar BEAS-2B. Em particular, iremos saber: Qual é o tempo de duplicação da BEAS-2B? O que é o meio de cultura da BEAS-2B? A linha celular BEAS-2B é aderente? Como se cultivam as células BEAS-2B?
Pontos-chave para a cultura de células BEAS-2B
Tempo de duplicação:
O tempo de duplicação da população de BEAS-2B é de aproximadamente 26 horas.
Adesiva ou em suspensão:
A BEAS-2B é uma linha celular aderente de tipo epitelial.
Densidade celular:
A densidade celular recomendada para a linha celular BEAS-2B é de 1 a 2 × 10⁴ células/cm². As células BEAS-2B aderentes são lavadas com solução salina tamponada com fosfato e incubadas com Accutase à temperatura ambiente durante alguns minutos. Após a dissociação das células, é adicionado meio fresco e as células são recolhidas por centrifugação. As células colhidas são cuidadosamente ressuspensas e transferidas para um novo frasco para crescimento.
Meio de crescimento:
Utiliza-se o meio BEGM (Meio de Crescimento de Células Epiteliais Bronquiais) contendo 10% de soro fetal bovino para a cultura da linha celular pulmonar BEAS-2B. O meio deve ser substituído a cada 2 a 3 dias.
Condições de crescimento:
A cultura BEAS-2B é mantida a 37 °C numa incubadora humidificada com um fornecimento contínuo de 5% de CO2.
Armazenamento:
Os frascos de células BEAS-2B congeladas podem ser armazenados na fase de vapor de nitrogénio líquido ou num congelador elétrico a uma temperatura inferior a -150 °C.
Processo de congelação e meio:
Os meios de congelamento CM-1 ou CM-ACF são utilizados para congelar a linha celular pulmonar BEAS-2B. As células são congeladas permitindo apenas uma diminuição de temperatura de 1 °C por minuto para proteger a viabilidade celular. Este tipo de método é denominado congelamento lento.
Processo de descongelação:
As culturas BEAS-2B congeladas ou criopreservadas são descongeladas num banho-maria a 37 °C contendo um agente antimicrobiano durante 40 a 60 segundos. Posteriormente, são adicionados meios às células, podendo estas ser cultivadas diretamente em novos frascos ou ser centrifugadas para remover os componentes do meio de congelação. Em seguida, as células recolhidas são ressuspensas e cultivadas. No primeiro caso, o meio de congelação é removido após 24 horas.
Nível de biossegurança:
São necessários laboratórios de nível de biossegurança 1 para o manuseamento de culturas de BEAS-2B.
Vantagens e desvantagens das células BEAS-2B
Tal como outras linhas celulares, as células BEAS-2B também apresentam algumas vantagens e desvantagens. Algumas delas são discutidas abaixo.
Vantagens
As vantagens da linha celular BEAS-2B incluem:
Linha celular imortalizada
A linha celular epitelial brônquica humana BEAS-2B foi imortalizada. Por conseguinte, continua a crescer sem entrar em senescência. Esta característica das células BEAS-2B elimina a necessidade de extração repetida de células epiteliais pulmonares humanas primárias com um tempo de vida mais curto.
Fácil de cultivar
As culturas de BEAS-2B são fáceis de manter. As células crescem e propagam-se sem esforço em condições de cultura padrão. Não existem requisitos de cultura celular exigentes ou complicados.
Origem humana
A linha celular BEAS-2B tem origem e relevância humanas. Assim, é um modelo in vitro ideal para estudar as respostas, o comportamento e os processos das células epiteliais das vias respiratórias humanas.
Desvantagens
As desvantagens associadas à linha celular pulmonar BEAS-2B são:
Células epiteliais pulmonares humanas transformadas
As células BEAS-2B são transformadas com o vírus Ad12-SV40 2B, o que pode alterar o seu comportamento e respostas em comparação com as células epiteliais brônquicas originais derivadas de tecido pulmonar humano.
Aplicações da linha celular BEAS-2B na investigação
A linha celular BEAS-2B oferece várias aplicações na investigação biomédica. Algumas aplicações comuns das células BEAS-2B são:
- Toxicologia: As células BEAS-2B são frequentemente utilizadas para investigar a genotoxicidade e a citotoxicidade de várias toxinas, poluentes ambientais e produtos químicos. Os investigadores utilizam esta linha celular epitelial brônquica para avaliar os efeitos nocivos destas substâncias na saúde pulmonar. Além disso, estudam também os mecanismos moleculares subjacentes. Por exemplo, um estudo realizado em 2021 avaliou a toxicidade do cádmio metálico na linha celular BEAS-2B. Os resultados da investigação revelaram que o cádmio induziu a morte celular e danos mitocondriais na linha celular pulmonar BEAS-2B através da modulação da via de sinalização MAPK [2]. Outro estudo utilizou a linha celular BEAS-2B para avaliar a toxicidade de nanopartículas de óxido de zinco sob stress oxidativo [3].
- Modelação de doenças respiratórias: a linha celular BEAS-2B é uma excelente ferramenta de investigação e um modelo in vitro para estudar doenças respiratórias, tais como a doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC), a asma, o cancro do pulmão e infeções virais, como o SARS-CoV-2. Os investigadores tendem a induzir condições relacionadas com a doença na linha celular BEAS-2B e a estudar os mecanismos celulares e moleculares subjacentes. Isto ajuda a identificar potenciais alvos farmacológicos e a desenvolver terapias personalizadas. Uma investigação realizada em 2022 utilizou a linha celular BEAS-2B e estudou o papel do estrogénio e dos seus recetores na infeção por SARS-CoV-2. Os resultados revelaram que uma maior expressão do recetor de estrogénio GPER1 reduz a carga viral do SARS-CoV-2 na BEAS-2B. Por conseguinte, pode estar envolvido na infeção ou replicação viral do SARS-CoV-2 [4].
5. Células BEAS-2B: Publicações científicas
Seguem-se alguns estudos de investigação interessantes e mais citados que envolvem células BEAS-2B.
Toxicidade do grafeno em células pulmonares humanas normais (BEAS-2B)
Este estudo foi publicado em 2011 no Journal of Biomedical Nanotechnology. A investigação sugeriu que o óxido de grafite induz a apoptose e a citotoxicidade na linha celular epitelial brônquica normal (BEAS-2B).
Este artigo de investigação foi publicado no Journal of Microbiology and Biotechnology (2014). Este estudo explorou o potencial terapêutico da naringenina, um flavonóide, na linha celular BEAS-2B. Os resultados sugeriram que a naringenina protege as células pulmonares BEAS-2B contra a toxicidade induzida pelo paraquat ou danos oxidativos.
Este estudo foi publicado na revista Inhalation Toxicology (2011). Neste estudo, os investigadores avaliaram o efeito tóxico de nanopartículas magnéticas com revestimentos de sílica amorfa na linha celular BEAS-2B in vitro.
Este artigo publicado na revista Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) propôs que o ácido ursodeoxicólico pode impedir a migração anormal das células epiteliais das vias respiratórias e prevenir os danos causados pela interação entre a proteína spike do SARS-CoV-2 e o ACE-2. Assim, pode ajudar a restaurar a camada basal epitelial.
Efeitos do radão na apoptose induzida pelo miR-34a em células epiteliais brônquicas humanas BEAS-2B
Este estudo foi publicado em 2019 no Journal of Toxicology and Environmental Health. Os resultados da investigação indicam que a exposição crónica ao radão pode promover a carcinogénese em células epiteliais brônquicas humanas (BEAS-2B) através da ativação do microRNA-34a.
Protocolos de cultura celular
O protocolo de cultura celular para as células BEAS-2B é aqui mencionado.
- Subcultura de BEAS-2B: Este documento irá ajudá-lo a conhecer os meios de cultura e os procedimentos de subcultura de BEAS-2B.
- Linha celular BEAS-2B: Este site contém todas as informações básicas de que necessita para começar a trabalhar com a linha celular BEAS-2B, incluindo os seus meios de cultura e protocolos para o manuseamento de culturas em proliferação e criopreservadas.
Referências
- Han, X., et al., As células epiteliais pulmonares humanas BEAS-2B apresentam características de células estaminais mesenquimais. PLoS One, 2020. 15(1): p. e0227174.
- Cao, X., et al., O cádmio induziu a apoptose das células BEAS-2B e danos mitocondriais através da via de sinalização MAPK. Chemosphere, 2021. 263: p. 128346.
- Heng, B.C., et al., A toxicidade das nanopartículas de óxido de zinco (ZnO) nas células epiteliais brônquicas humanas (BEAS-2B) é acentuada pelo stress oxidativo. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): p. 1762-1766.
- Costa, A.J., et al., A superexpressão do recetor de estrogénio GPER1 e o tratamento com G1 reduzem a infeção por SARS-CoV-2 em células brônquicas BEAS-2B. Molecular and Cellular Endocrinology, 2022. 558: p. 111775.