Células BEAS-2B - Células BEAS-2B na investigação de doenças respiratórias: Um Guia Abrangente
A BEAS-2B é uma linha celular epitelial pulmonar humana imortalizada e não tumorigénica. É um modelo in vitro amplamente utilizado para estudar a resposta das células pulmonares a vários carcinogéneos e tóxicos. Além disso, é uma valiosa ferramenta de investigação para estudar diferentes infecções e doenças respiratórias, como a COVID-19 e os carcinomas pulmonares.
Neste artigo, abordaremos quase todos os aspectos da linha de células pulmonares BEAS-2B, incluindo a sua origem, informações sobre a cultura de células, vantagens, desvantagens e aplicações na investigação. Nomeadamente, passaremos por:
- Origem e caraterísticas gerais das células BEAS-2B
- Linha celular BEAS-2B: Informações sobre a cultura
- Vantagens e desvantagens das células BEAS-2B
- Aplicações da linha de células BEAS-2B na investigação
- Células BEAS-2B: Publicações de investigação
- Protocolos de cultura de células
1) Origem e caraterísticas gerais das células BEAS-2B
A primeira coisa que se procura numa linha celular é a sua origem e caraterísticas gerais. Aqui, ficará a conhecer as caraterísticas mais importantes e a origem das células epiteliais brônquicas humanas BEAS-2B. Irá estudar: O que é a linha celular pulmonar BEAS-2B? Que tipo de células são as Beas 2B? Qual é a origem das células BEAS-2B?
- BEAS-2B, a linha de células do epitélio brônquico, foi desenvolvida a partir de um tecido pulmonar humano não canceroso em 1988 pelo grupo de Curtis C. Harris [1].
- As células BEAS-2B possuem uma morfologia semelhante à epitelial.
HBEpC Vs BEAS-2B
As HBEpC são células primárias epiteliais brônquicas humanas. À semelhança das BEAS-2B, são células epiteliais brônquicas humanas normais. No entanto, têm um tempo de vida limitado em comparação com as BEAS-2B imortalizadas. Ambas as linhas celulares podem ser utilizadas para estudar a biologia pulmonar, a toxicologia e a modelação de doenças.
2.linha celular BEAS-2B: Informações de cultura
A informação de cultura de uma linha celular pode facilitar o seu trabalho com ela. Nesta secção do artigo, aprenderá todas as noções básicas para a cultura da linha celular pulmonar BEAS-2B. Nomeadamente, saberemos: Qual é o tempo de duplicação da BEAS-2B? O que é o meio BEAS-2B? A linha de células BEAS-2B é aderente? Como se faz a cultura de células BEAS-2B?
Pontos-chave para a cultura de células BEAS-2B
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Tempo de duplicação: |
O tempo de duplicação da população BEAS-2B é de aproximadamente 26 horas. |
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Aderente ou em suspensão: |
A BEAS-2B é uma linha de células aderentes de tipo epitelial. |
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Densidade celular: |
A densidade celular recomendada para a linha de células BEAS-2B é de 1 a 2 ×104 células/cm2. As células BEAS-2B aderentes são lavadas com tampão fosfato salino e incubadas com Accutase à temperatura ambiente durante alguns minutos. Depois de as células se dissociarem, adiciona-se meio fresco e as células são recolhidas por centrifugação. As células colhidas são cuidadosamente ressuspendidas e colocadas num novo frasco para crescimento. |
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Meio de crescimento: |
O meio BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium) contendo 10% de soro fetal bovino é utilizado para a cultura da linha de células pulmonares BEAS-2B. O meio deve ser substituído a cada 2 ou 3 dias. |
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Condições de crescimento: |
A cultura BEAS-2B é mantida a 37°C numa incubadora humidificada com um fornecimento contínuo de 5% de CO2. |
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Armazenamento: |
Os frascos de células BEAS-2B congeladas podem ser armazenados na fase de vapor do azoto líquido ou num congelador elétrico a uma temperatura inferior a -150°C. |
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Processo e meio de congelação: |
Os meios de congelação CM-1 ou CM-ACF são utilizados para congelar a linha de células pulmonares BEAS-2B. As células são congeladas permitindo apenas uma diminuição da temperatura de 1°C por minuto para proteger a viabilidade celular. Este tipo de método é designado por congelação lenta. |
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Processo de descongelação: |
As culturas BEAS-2B congeladas ou criopreservadas são descongeladas num banho de água a 37°C contendo um agente antimicrobiano durante 40 a 60 segundos. Em seguida, as células são adicionadas ao meio e podem ser diretamente cultivadas em novos frascos ou podem ser centrifugadas para remover os componentes do meio de congelação. Em seguida, as células recolhidas são ressuspendidas e cultivadas. No primeiro caso, o meio de congelação é removido após 24 horas. |
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Nível de Biossegurança: |
São necessários laboratórios de nível 1 de segurança biológica para o manuseamento de culturas BEAS-2B. |
3.vantagens e desvantagens das células BEAS-2B
Tal como outras linhas celulares, as células BEAS-2B também estão associadas a alguns prós e contras. Algumas delas são analisadas a seguir.
Vantagens
As vantagens da linha de células BEAS-2B incluem:
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Linha celular imortalizada |
A linha de células epiteliais brônquicas humanas BEAS-2B foi imortalizada. Por conseguinte, continua a crescer sem entrar em senescência. Esta caraterística das células BEAS-2B elimina a necessidade de extração repetida de células epiteliais primárias do pulmão humano com um tempo de vida mais curto. |
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Fácil de cultivar |
As culturas BEAS-2B são de fácil manutenção. As células crescem e propagam-se sem esforço em condições de cultura padrão. Não existem requisitos de cultura de células exigentes ou complicados. |
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Origem humana |
A linha celular BEAS-2B tem origem e relevância humanas. Assim, é um modelo in vitro ideal para estudar as respostas, o comportamento e os processos das células epiteliais das vias respiratórias humanas. |
Desvantagens
As desvantagens associadas à linha celular pulmonar BEAS-2B são as seguintes
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Células epiteliais pulmonares humanas transformadas |
As células BEAS-2B são transformadas com o vírus Ad12-SV40 2B, o que pode alterar o seu comportamento e as suas respostas em comparação com as células epiteliais brônquicas originais derivadas do tecido pulmonar humano. |
4.aplicações da linha celular BEAS-2B na investigação
A linha celular BEAS-2B oferece várias aplicações na investigação biomédica. Algumas aplicações comuns das células BEAS-2B são
- Toxicologia: As células BEAS-2B são frequentemente utilizadas para investigar a genotoxicidade e a citotoxicidade de várias toxinas, poluentes ambientais e produtos químicos. Os investigadores utilizam esta linha de células epiteliais brônquicas para avaliar os efeitos nocivos destas substâncias na saúde pulmonar. Além disso, estudam também os mecanismos moleculares subjacentes. Por exemplo, um estudo realizado em 2021 avaliou a toxicidade do cádmio metálico na linha celular BEAS-2B. Os resultados da investigação revelaram que o cádmio induziu a morte celular e danos mitocondriais na linha de células pulmonares BEAS-2B através da modulação da via de sinalização MAPK [2]. Outro estudo utilizou a linha celular BEAS-2B para avaliar a toxicidade das nanopartículas de óxido de zinco sob stress oxidativo [3].
- Modelação de doenças respiratórias: A linha celular BEAS-2B é uma excelente ferramenta de investigação e um modelo in vitro para estudar doenças respiratórias como a doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC), a asma, o cancro do pulmão e infecções virais como a SARS-CoV-2. Os investigadores tendem a induzir condições relacionadas com a doença na linha celular BEAS-2B e a estudar os mecanismos celulares e moleculares subjacentes. Isto ajuda a identificar potenciais alvos de medicamentos e a desenvolver terapias personalizadas. A investigação realizada em 2022 utilizou a linha celular BEAS-2B e estudou o papel do estrogénio e dos seus receptores na infeção por SARS-CoV-2. Os resultados revelaram que a expressão mais elevada do recetor de estrogénio GPER1 reduz a carga viral do BEAS-2B SARS-CoV-2. Por conseguinte, pode estar envolvido na infeção ou replicação do vírus SARS-CoV-2 [4].
5.células BEAS-2B: Publicações de investigação
Seguem-se alguns estudos de investigação interessantes e mais citados sobre as células BEAS-2B.
Toxicidade do grafeno em células normais do pulmão humano (BEAS-2B)
Este estudo foi publicado em 2011 no Journal of Biomedical Nanotechnology. A investigação propôs que o óxido de grafite induz apoptose e citotoxicidade na linha de células epiteliais brônquicas normais (BEAS-2B).
Este artigo de investigação foi publicado no Journal of Microbiology and Biotechnology (2014). Este estudo explorou o potencial terapêutico da naringenina, um flavonoide, na linha celular BEAS-2B. Os resultados sugerem que a naringenina protege as células pulmonares BEAS-2B contra a toxicidade induzida pelo paraquat ou danos oxidativos.
Este estudo foi publicado na revista Inhalation Toxicology (2011). Neste estudo, os investigadores avaliaram o efeito tóxico das nanopartículas magnéticas com revestimentos de sílica amorfa na linha celular BEAS-2B in vitro.
Este artigo na revista Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) propôs que o ácido ursodeoxicólico pode impedir a migração anormal das células epiteliais das vias respiratórias e prevenir os danos causados pela proteína spike SARS-CoV-2 e pela interação ACE-2. Assim, pode ajudar a restaurar a camada basal do epitélio.
Efeitos do rádon na apoptose induzida pelo miR-34a nas células BEAS-2B do epitélio brônquico humano
Este estudo foi publicado em 2019 no Journal of Toxicology and Environmental Health. Os resultados da investigação indicam que a exposição crónica ao radão pode promover a carcinogénese em células epiteliais brônquicas humanas (BEAS-2B) através da ativação do microRNA-34a.
6.protocolos de cultura de células
O protocolo de cultura celular para células BEAS-2B é mencionado aqui.
- Subcultura de BEAS-2B: Este documento ajudá-lo-á a conhecer os meios BEAS-2B e os procedimentos de subcultura.
- Linha celular BEAS-2B: Este sítio Web contém todas as informações básicas necessárias para começar a trabalhar com a linha de células BEAS-2B, incluindo os seus meios e protocolos para o manuseamento de culturas em proliferação e criopreservação.
Referências
- Han, X., et al., As células BEAS-2B epiteliais do pulmão humano apresentam caraterísticas de células estaminais mesenquimais. PLoS One, 2020. 15(1): p. e0227174.
- Cao, X., et al., Apoptose de células BEAS-2B induzida por cádmio e danos às mitocôndrias via via de sinalização MAPK. Chemosphere, 2021. 263: p. 128346.
- Heng, B.C., et al., A toxicidade das nanopartículas de óxido de zinco (ZnO) nas células epiteliais brônquicas humanas (BEAS-2B) é acentuada pelo stress oxidativo. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): p. 1762-1766.
- Costa, A.J., et al., Overexpression of estrogen recetor GPER1 and G1 treatment reduces SARS-CoV-2 infection in BEAS-2B bronchial cells. Molecular and Cellular Endocrinology, 2022. 558: p. 111775.