Células B16 - Guia fundamental sobre as células de melanoma B16 na investigação oncológica

B16 é a linha celular de cancro da pele (melanoma) de origem murina. Esta linha celular é um modelo in vitro eficaz para o estudo de cancros da pele humanos. É frequentemente utilizada para investigar a formação de tumores sólidos e a metástase de células cancerígenas.

Este artigo irá ajudá-lo a compreender os conceitos básicos da linha celular de melanoma B16. Especificamente, abordará o seguinte:

Características gerais e origem da linha celular B16

Esta secção do artigo abordará as características da linha celular de melanoma B16. Irá encontrar aqui as respostas às seguintes perguntas frequentes. Por exemplo: O que é a linha celular de cancro B16? De onde provêm as células B16? Qual é o tamanho das células B16?

• A linha celular B16 foi estabelecida em 1954. Estas células foram derivadas de ratos C57BL/6J que desenvolveram espontaneamente um tumor na pele nos Laboratórios Jackson, no Maine.
• Trata-se de células epiteliais produtoras de melanina com capacidade de metastizar no baço, fígado e pulmões.
• As células do melanoma B16 crescem em monocamadas e apresentam uma morfologia celular semelhante à epitelial e fusiforme.
• O tamanho da linha celular B16 é de aproximadamente 15,4 μm.
• Existem subclones distintos das células B16, incluindo B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 e B16F10. Estas sublinhas são diferentes das células B16 parentais e mantêm algumas características específicas. Por exemplo, apresentam diferenças na morfologia, no tamanho celular e noutras propriedades. A B16F10 tem elevada capacidade de metástase pulmonar, e a B164A5 é a linha celular de cancro da pele mais agressiva em comparação com a B16F10, a B16-GMCSF e a B16FLT3 [1].

Linha celular B16: Vantagens e desvantagens

Tal como outras linhas celulares, a B16 possui uma combinação única de vantagens e desvantagens. Nesta secção, são enumerados alguns prós e contras significativos desta linha celular de melanoma.

Vantagens

A B16 é a primeira ferramenta murina eficaz amplamente utilizada na investigação da metástase devido às vantagens que oferece. Algumas vantagens desta linha celular de cancro da pele são:

Fácil de cultivar

A linha celular B16 é fácil de cultivar em laboratórios de investigação. É amplamente utilizada para estudar a biologia das células cancerígenas, vias de sinalização e muito mais.

Crescimento rápido

A linha celular de melanoma B16 apresenta uma elevada taxa de proliferação, tornando-a adequada para o estudo dos processos de divisão e crescimento celular.

Tumorigenicidade

A B16 é uma linha celular tumorigénica com propriedades semelhantes às dos tumores, tais como invasão, migração e proliferação. É valiosa para o estudo da formação, progressão e metástase de tumores.

Desvantagens

As desvantagens associadas à linha celular B16 são:

Falta de relevância para o ser humano

Uma vez que a B16 é uma linha celular de melanoma de ratinho, pode não representar com precisão a biologia do cancro da pele humano, limitando a aplicabilidade dos resultados da investigação.

Heterogeneidade

As células B16 são heterogéneas, apresentando propriedades genéticas e fenotípicas variadas dentro da mesma cultura. Isto pode afetar a fiabilidade e a reprodutibilidade dos resultados.

Aplicações das células B16

A linha celular B16 é amplamente utilizada em estudos de investigação. Algumas aplicações promissoras desta linha celular são:

• Biologia tumoral: Esta linha celular de cancro da pele murina é tumorigénica e amplamente utilizada para compreender a biologia tumoral. Foram realizados vários estudos para explorar os mecanismos celulares subjacentes ao crescimento, proliferação e metástase das células tumorais utilizando células B16. Um estudo de investigação realizado em 2020 utilizou células B16 para investigar o papel do RNA não codificante longo, LncRNA MEG3, na formação, crescimento e metástase do melanoma. Esta investigação descobriu que o RNA não codificante modula o eixo miRNA-21/E-Cadherina para estimular estes eventos celulares [2]. Da mesma forma, foi realizada uma investigação para estudar o potencial papel da sinalização Notch1 na imunossupressão induzida por tumores utilizando células B16 [3].
• Descoberta de fármacos: as células B16 são utilizadas para validar e testar os potenciais efeitos terapêuticos de candidatos a fármacos. Um estudo avaliou o efeito antitumoral do ácido neogambogico, um composto natural, utilizando uma linha celular B16. Os resultados do estudo revelaram que este composto modula a via de sinalização PI3K/Akt/mTOR para causar a morte das células cancerígenas [4]. Outro estudo investigou o efeito antitumoral do ginsenosídeo Rg3, uma saponina, utilizando a linha celular B16. A investigação sugeriu que este composto natural exerceu atividade antitumoral através da regulação negativa das vias ERK e Akt [5].

5. Publicações científicas que utilizam as células B16

Aqui estão algumas publicações de investigação significativas sobre a linha celular de melanoma B16.

O LncRNA MEG3 promove o crescimento, a metástase e a formação do melanoma através da modulação do eixo miR-21/E-caderina

Esta publicação na revista Cancer Cell International (2020) propôs que o RNA não codificante longo MEG3 potencia a formação, o crescimento e a metástase das células de melanoma B16 através da modulação do eixo miRNA-21/E-cadherina.

Um novo derivado do psoraleno — o MPFC — potencia a melanogénese através da ativação das vias de sinalização p38 MAPK e PKA nas células B16

Este artigo foi publicado na revista International Journal of Molecular Medicine em 2018. Este estudo investigou o efeito melanogénico e os mecanismos de um derivado do psoraleno — 4-metil-6-fenil-2H-furo[3,2-g]cromen-2-ona (MPFC) — em células B16. O estudo propôs que este derivado promove a melanogénese através da estimulação da sinalização celular da PKA e da p38 MAPK.

A sinalização de Notch1 em células de melanoma promoveu a imunossupressão induzida pelo tumor através da regulação positiva do TGF-β1

Esta investigação foi publicada em 2018 no Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Os resultados do estudo sugerem que a ativação da sinalização Notch1 nas células B16 pode impedir a imunidade antitumoral através do aumento da expressão do gene TGF-β1.

O ácido neogambogico induz a apoptose das células de melanoma B16 através da via de sinalização PI3K/Akt/mTOR

Este estudo foi conduzido por Chunlan Wu e os seus colegas em 2020 e publicado na revista Acta Biochimica Polonica. Esta investigação afirma que o ácido neogambogico, um composto natural, pode causar a morte das células de melanoma B16 através da modulação da cascata de sinalização PI3K/Akt/mTOR.

Um complexo de irídio (III) como potente agente anticancerígeno induz a apoptose e a autofagia nas células B16 através da inibição da via AKT/mTOR

Este artigo de investigação foi publicado no European Journal of Medicinal Chemistry em 2018. Neste estudo, os investigadores analisaram a atividade anticancerígena de um composto, o complexo de irídio (III), utilizando células de melanoma B16.

A ailantona induz a paragem do ciclo celular e a apoptose nas células de melanoma B16 e A375

Este estudo propôs que um bioativo vegetal, a ailantona, possui potencial anticancerígeno, uma vez que pode induzir a apoptose e a paragem do ciclo celular em células de melanoma B16 e A375. Este artigo foi publicado na revista Biomolecules em 2019.

Recursos para a linha celular B16: protocolos, vídeos e muito mais

Existem recursos limitados sobre a linha celular B16 que expliquem os seus protocolos de cultura e transfecção.

• Cultivo de células de melanoma: Este vídeo fornece dicas valiosas para o cultivo de linhas celulares de melanoma.
• Subcultivo de uma linha celular: Este vídeo explica um protocolo geral de subcultivo para uma linha celular.
• Transfecção da linha celular B16F10: Este vídeo explica o protocolo de transfecção para uma sublinha de células de melanoma B16. Pode ajudá-lo a otimizar o protocolo de transfecção para células B16.

Seguem-se alguns protocolos de cultura celular para células B16. 

• Cultura de células B16: Este site contém todas as informações necessárias para a cultura de células B16, incluindo meios de crescimento, subcultura, descongelamento e congelamento de células.

Referências

1. Danciu, C., et al., Comportamento de quatro sublinhas diferentes de células de melanoma murino B 16: pele C57 BL/6J. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2): p. 73-80.
2. Wu, L., et al., O LncRNA MEG3 promove o crescimento, a metástase e a formação do melanoma através da modulação do eixo miR-21/E-caderina. Cancer Cell International, 2020. 20: p. 1-14.
3. Yang, Z., et al., A sinalização Notch1 em células de melanoma promoveu a imunossupressão induzida pelo tumor através da regulação positiva do TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): p. 1-13.
4. Wu, C., et al., O ácido neogambogico induz a apoptose das células de melanoma B16 através da via de sinalização PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
5. Meng, L., et al., Atividade antitumoral do ginsenosídeo Rg3 no melanoma através da regulação negativa das vias ERK e Akt. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): p. 2069-2079.