Células A431 - Análise aprofundada de células de carcinoma epidermoide em investigação dermatológica

A431 é uma linha celular de cancro epidermoide humano. É amplamente utilizada no domínio da investigação biomédica, principalmente em estudos de biologia do cancro, imuno-oncologia e toxicologia. Além disso, as células A431 sobre-expressam o EGFR (recetor do fator de crescimento epidérmico), pelo que são utilizadas como um modelo in vitro valioso para estudar o ciclo celular e as vias de sinalização celular associadas ao cancro.

Este artigo explica os conceitos básicos da linha celular de cancro A431. Ficará a saber o seguinte:

Células A431: Caraterísticas gerais e origem
Linha celular A431: Informações sobre a cultura
Vantagens e desvantagens da linha celular A431
Aplicações de investigação das células A431
Publicações de investigação com células A431
Recursos para a linha de células A431: Protocolos, vídeos e muito mais

1. Células A431: Caraterísticas gerais e origem

Esta secção do artigo irá ajudá-lo a conhecer as informações gerais sobre a linha celular A431 que precisa de saber antes de trabalhar com ela. Por exemplo, qual é a origem da linha de células A431? Quais são as caraterísticas da linha celular A431? Qual é a morfologia das células A431? De onde provêm as células A431?

A A431, uma linha celular de cancro da pele humano, foi obtida a partir da epiderme de uma doente de 85 anos com carcinoma epidermoide [1]. Foi criada por D.J. Giard, et al., que desenvolveu muitas outras linhas celulares de tumores sólidos.
As células A-431 possuem morfologia epitelial. Agregam-se e formam grupos de células.
A linha celular de cancro da pele a431 é hipertriplóide. O número cromossómico modal para esta linha celular é 74, o que ocorre em cerca de 36% das células. Também existem ploidias mais elevadas em cerca de 1% de uma população de células.

Tumor que cresce sob a pele e se infiltra nos tecidos subjacentes.

2.linha celular A431: Informações sobre a cultura

Conhecer os requisitos e procedimentos de cultura de células de uma linha celular pode tornar o seu manuseamento sem problemas. Esta parte do artigo ajudá-lo-á a conhecer os pontos-chave para a cultura da linha de células A431. Por exemplo, saberá: Qual é o tempo de duplicação das células A431? A linha de células cancerígenas A431 é aderente? Que meio de crescimento é utilizado para A431?

Pontos-chave para a cultura de células A431

Tempo de duplicação:	O tempo de duplicação da população de células A431 varia de 80 a 100 horas.
Aderente ou em suspensão:	A431 é uma linha celular aderente.
Densidade de sementeira:	a densidade celular de 1 x¹⁰⁴ ^células/cm2 é ideal para a linha de células A431. As células demoram quase 4 dias a ficar confluentes com esta densidade. As células aderentes são lavadas com PBS (1x) e incubadas com a solução de passagem Accutase. Em seguida, as células foram ressuspendidas num meio de cultura e centrifugadas. As células colhidas foram novamente ressuspensas e distribuídas em novos frascos para crescimento.
Meio de crescimento:	O meio DMEM suplementado com 10% de soro fetal de bovino, 4,5 g/L de glucose, 1,0 mM de piruvato de sódio, 1,5 g/L de NaHCO3 e 4 mM de L-Glutamina é utilizado para cultivar a linha celular A431. O meio deve ser substituído a cada 2 a 3 dias por semana.
Condições de crescimento:	As células cancerígenas A431 são cultivadas numa incubadora humidificada equipada com uma fonte de 5% de CO2 a uma temperatura de 37°C.
Armazenamento:	A linha celular pode ser armazenada num congelador elétrico ou na fase de vapor do azoto líquido a uma temperatura inferior a -150°C, uma vez que ajuda a proteger a viabilidade celular.
Processo e meio de congelação:	CM-1 ou CM-ACF são os dois meios de congelação altamente recomendados para as células A431. As células são congeladas através de um método de congelação lenta que permite que a temperatura desça apenas 1 grau por minuto.
Processo de descongelação:	As células A431 congeladas são descongeladas num banho de água a 37°C com um agente antimicrobiano durante 40 a 60 segundos. Quando apenas restar um pequeno aglomerado de gelo, as células são adicionadas ao meio de cultura e centrifugadas. As células colhidas são ressuspensas e colocadas em frascos de cultura para crescimento.
Nível de biossegurança:	Recomenda-se o nível de biossegurança um para o manuseamento e manutenção de culturas A431.

Esferóides de A-431 em diferentes densidades celulares.

3.vantagens e desvantagens da linha de células A431

A linha de células A431 possui caraterísticas distintas e oferece várias vantagens e desvantagens. De seguida, resumimos algumas delas.

Vantagens

As principais vantagens da linha celular de cancro A431 são

Sobreexpressão de EGFR	As células A431 sobreexpressam o recetor do fator de crescimento epidérmico (EGFR). Servem como controlo positivo para estudar a sinalização EGFR e as suas implicações no cancro. São também utilizadas para avaliar novas terapêuticas contra o cancro.
Tumorigenicidade	As células A431 são tumorigénicas e têm a capacidade de formar tumores. Podem ser utilizadas para desenvolver modelos de cancro de xenoenxerto, que constituem instrumentos valiosos para estudar a dinâmica de crescimento dos tumores e avaliar novos tratamentos contra o cancro.

Desvantagens

As desvantagens das células A431 são as seguintes

Anomalias genéticas	A A431 é uma linha celular cancerígena que contém mutações e alterações genéticas que a podem distinguir das caraterísticas originais do tumor.
Contaminação microbiana	A A431 é suscetível de contaminação microbiana, principalmente bacteriana. No entanto, a manutenção de condições de cultura assépticas normais pode ajudar a evitar essa contaminação nas culturas de células A431.

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4. Aplicações de investigação das células A431

A linha celular A431 é muito utilizada na investigação do cancro. Algumas aplicações promissoras desta linha celular de cancro da pele são aqui enumeradas. Biologia do cancro: A linha celular A431 para o cancro da pele é um excelente instrumento de investigação dos mecanismos celulares e moleculares que determinam o crescimento, o desenvolvimento, as metástases e a invasão do cancro.

Os investigadores têm utilizado extensivamente esta linha celular para estudar intensamente as vias de sinalização celular envolvidas em diferentes processos celulares do cancro. Por exemplo, um estudo realizado em 2018 explorou que a via de sinalização PI3K/AKT/mTOR está envolvida na proliferação de células cancerígenas, e a inibição desta via induz a apoptose em células tumorais da pele, A431 [2]. Além disso, outro estudo também relatou a contribuição da via PI3K/AKT/mTOR na metástase de células de cancro da pele e na transição epitelial para mesenquimal (EMT), indicando o seu papel crucial no desenvolvimento e progressão do cancro [3]. Teste e avaliação de medicamentos: As células A431 são utilizadas para avaliar a eficácia e a eficiência de potenciais candidatos a medicamentos anti-cancro. Os investigadores determinaram os efeitos dos fármacos na proliferação, metástase, invasão e apoptose das células cancerígenas através da realização de várias experiências laboratoriais - investigação conduzida por Nurhidayah Ab. Rahim e colegas utilizaram células A431 e avaliaram o potencial terapêutico de nanopartículas de prata da planta Alstonia angustiloba sintetizadas biogenicamente em 2022. Os resultados revelaram que as angustiloba-AgNPs exerceram efeitos antiproliferativos nas células do carcinoma escamoso da pele [4]. Modelos de xenoenxertos tumorais: A linha celular A431 é tumorigénica e pode formar tumores quando inoculada num modelo de ratinho. Por conseguinte, é uma ferramenta útil para desenvolver modelos de xenoenxertos de ratinho para investigar a biologia do cancro in vivo. Vários estudos utilizaram a linha celular de cancro A431 para desenvolver modelos de xenoenxertos tumorais. Yu Jin Lim e a sua equipa desenvolveram um modelo de rato de xenoenxerto de tumor cutâneo utilizando células A431 para avaliar os efeitos antitumorais e radiossensibilizadores do fator de crescimento epidérmico (EGF) exógeno in vivo [5]. 5. Publicações de investigação com células A431 Eis algumas publicações de investigação importantes com a linha celular de carcinoma cutâneo A431 Eficácia das nanofibras electrospun biopoliméricas PVA-AuNPs e PCL-Curcumina e sua atividade anticancerígena contra a linha celular de cancro cutâneo A431 Este artigo foi publicado na Materials Today Communications em 2020. O estudo avaliou o potencial anticancerígeno de nanofibras electrospun carregadas com curcumina de poli-ε-caprolactona e álcool polivinílico-AuNPs contra células cancerígenas A431. miRNA-221 promove a progressão do carcinoma espinocelular cutâneo visando o PTEN Este estudo publicado na Cellular & Molecular Biology Letters (2019) propôs que o microRNA-221 desempenha um papel oncogénico no carcinoma espinocelular cutâneo visando o gene PTEN. A vincristina fúngica de Eutypella spp-CrP14 isolada de Catharanthus roseus induz apoptose na linha celular de carcinoma escamoso humano-A431 Esta pesquisa em BMC Complementary Medicine and Therapies (2016) sugere que a vincristina, um metabólito secundário isolado de um fungo, Eutypella spp - CrP14, induz apoptose em células A431. A sobreexpressão de CDC42SE1 em células A431 reduziu a proliferação celular através da inibição da via Akt Este estudo foi publicado em 2019 na revista Cells. Esta investigação propôs o gene CDC42SE1 como um importante biomarcador da progressão do cancro da pele, uma vez que a sua regulação negativa facilita a tumorigénese. A metformina inibe a proliferação de células A431 através da modulação da via de sinalização PI3K/Akt Esta investigação foi publicada na revista Experimental and therapeutic medicine em 2015. Propôs que a metformina suprimisse a proliferação da linha celular de cancro da pele a431 através da regulação da via de sinalização PI3K/Akt. 6. Recursos para a linha de células A431: Protocolos, vídeos e mais Aqui estão alguns recursos online que apresentam a linha celular de cancro da pele A431. Transfecção de células A-431: Esta ligação fornece um guia passo a passo para a transfecção de células cancerígenas A431. A seguinte ligação contém informações sobre a cultura de células A431. Linha celular de cancro A431: Esta ligação contém as informações necessárias sobre a cultura de células da linha celular A431. Inclui meios de cultura, densidade celular, manuseamento de culturas criopreservadas e proliferativas, etc. Cultura de células A431: Este sítio Web contém um breve protocolo de cultura da linha de células A431.

Referências

Quadri, M., et al., Investigating Cutaneous Squamous Cell Carcinoma in vitro and in vivo: Novel 3D Tools and Animal Models. Front Med (Lausanne), 2022. 9: p. 875517.

Zeng, N., et al., A atividade anticâncer do éster n-butílico do ácido cafeico contra a linha celular de carcinoma de pele A431 ocorre por meio da indução de apoptose e inibição da via de sinalização mTOR / PI3K / AKT Retração em / 10.3892 / mmr. 2021.12011.

Relatórios de medicina molecular, 2018. 17(4): p. 5652-5657.

Rahaman, A., et al., Eucalyptol tem como alvo a via PI3K / Akt / mTOR para inibir a metástase do câncer de pele.

Carcinogénese, 2022. 43(6): p. 571-583. Rahim, N.A., et al., Investigação dos mecanismos antiproliferativos de nanopartículas de prata de Alstonia angustiloba em carcinoma de células escamosas da pele (linha celular A431).

Jornal de Estrutura Molecular, 2022. 1250: p. 131814. Lim, Y.J., et al., Supressão do crescimento tumoral e aumento da radiorresposta por um fator de crescimento epidérmico exógeno em modelos de xenoenxerto de rato com células A431.

Investigação e Tratamento do Cancro: Jornal Oficial da Associação Coreana do Cancro, 2015. 47(4): p. 921-930.