Linha celular A375 - Um guia sobre a investigação do melanoma
A A375 é uma linha celular de melanoma humano amplamente utilizada na investigação em toxicologia e imuno-oncologia. Os investigadores utilizam esta linha celular para estudar a biologia do cancro e as vias de sinalização, testar ou selecionar potenciais agentes anticancerígenos e desenvolver terapêuticas novas e eficazes.
- Meio de crescimento
- Consulte a página do produto
- Tempo de duplicação
- Ver página do produto
- Tipo de crescimento
- Adesivo
- Nível de biossegurança
- BSL-1
- Disponível em
- Cytion — Encomendar A375
- Origem e características gerais das células A375
- Células A375: Informações sobre a cultura celular
- Vantagens e limitações da linha celular A375
- Compre já as suas células A375
- Aplicações de investigação da linha celular A375
- Células A375: Publicações
- Recursos para a linha celular A375: Protocolos, vídeos e muito mais
- Perguntas frequentes (FAQ) sobre as células A375
- Referências
- Perguntas frequentes
Origem e características gerais das células A375
Conhecer a origem e as características gerais de uma linha celular pode ajudá-lo a planear a sua utilização na investigação. Esta secção do artigo abordará a origem e as características da linha celular A375. Por exemplo, o que é a linha celular A375? Quais são as características da linha celular A375? De onde vêm as células A375? Qual é a morfologia das células de melanoma A375? Qual é o tamanho das células A375?
- A linha celular de cancro da pele A375 teve origem na cultura de explante de um tumor sólido de uma mulher de 54 anos com melanoma maligno [1].
- As células A375 têm uma morfologia de tipo epitelial.
- O tamanho das células A375 é relativamente menor em comparação com outras linhas celulares. Possuem, aproximadamente, um diâmetro de 12 µm.
- As células de melanoma A375 são hipotrilóides. O número modal de cromossomas para esta linha celular é 62. Normalmente, cada célula possui nove cromossomas marcadores e uma cópia dos cromossomas normais N2, N6 e N22.
Células A375: Informações sobre cultura celular
As culturas de células A375 são fáceis de manter. Não têm requisitos de cultura celular exigentes. Esta secção irá ajudá-lo a conhecer as informações necessárias sobre a cultura celular. Por exemplo, qual é o tempo de duplicação das células A375? Qual é o meio de cultura da linha celular A375? Qual é a densidade de sementeira das células A375? As células de melanoma A375 são aderentes?
Pontos-chave para a cultura de células A375
Tempo de duplicação da população:
O tempo de duplicação das células A375 é de 20 horas.
Adesivas ou em suspensão:
A A375 é uma linha celular de melanoma humano aderente.
Densidade de sementeira:
Uma densidade celular de 1 x 10⁴ células/cm² é ideal para culturas de células A375. As células aderentes são lavadas com tampão fosfato salino (PBS) 1x e incubadas com solução de passagem (Accutase). Posteriormente, as células foram adicionadas a meio de cultura e centrifugadas. As células colhidas foram ressuspensas em meio de cultura e distribuídas em novos frascos para crescimento.
Meio de crescimento:
Recomenda-se o DMEM como meio ideal para A375 quando suplementado com 10% de soro fetal bovino (FBS), 4,5 g/L de glicose, 1,5 g/L de NaHCO3, 4 mM de L-glutamina e 1,0 mM de piruvato de sódio. O meio A375 deve ser renovado 2 a 3 vezes por semana.
Condições de crescimento:
As células de melanoma A375 são cultivadas numa incubadora humidificada (37 °C) com um fornecimento de 5% de CO2.
Armazenamento:
As células A375 congeladas devem ser mantidas a temperaturas inferiores a -150 °C na fase de vapor de nitrogénio líquido ou num congelador elétrico.
Processo de congelação e meio:
Utilizam-se meios CM-1 ou CM-ACF para congelar a linha celular A375. Optou-se por um processo de congelamento lento, que permite uma diminuição gradual da temperatura de 1 °C, para proteger a viabilidade celular.
Processo de descongelamento:
O frasco com as células de melanoma A375 congeladas é agitado rapidamente num banho-maria durante 40 a 60 segundos, até restar apenas um pequeno pedaço de gelo. São adicionados meios frescos às células e estas são centrifugadas para remover os elementos do meio de congelamento. O sedimento celular obtido foi novamente ressuspenso e transferido para novos frascos.
Nível de biossegurança:
As culturas de A375 são manuseadas e mantidas em laboratórios com nível de biossegurança 1.
Vantagens e limitações da linha celular A375
Tal como outras linhas celulares, a linha celular de melanoma A375 está associada a uma combinação única de vantagens e limitações, tornando-a uma ferramenta valiosa para a investigação do cancro do melanoma. Esta secção enumera apenas algumas das principais vantagens e desvantagens da linha celular A375.
Vantagens
As vantagens significativas das células A375 são mencionadas abaixo:
- Modelo tumoral de melanoma: A linha celular A375 foi derivada de um tumor de melanoma maligno, servindo assim como um modelo tumoral inestimável para investigar a biologia do melanoma e as intervenções terapêuticas. Estas células exibem propriedades semelhantes às do melanoma, tais como uma elevada taxa de proliferação e invasividade.
- Tumorigenicidade: As células A375 são altamente tumorigénicas, o que significa que podem formar tumores. Foi relatado que as células A375 produzem melanomas amelanóticos agressivos em ratos NIH Swiss tratados com soro anti-timócito (um agente imunossupressor).
- Bem caracterizada: A A375 é uma linha celular geneticamente bem caracterizada. Possui mutações genéticas específicas semelhantes às do melanoma. As mutações da A375 incluem a alteração do gene BRAF, tornando-a sensível a inibidores específicos do BRAF. Este perfil genético torna, assim, as células A375 uma excelente ferramenta de investigação do cancro para estudar vias moleculares subjacentes e terapias direcionadas.
Limitações
As limitações associadas às células A375 são:
- Limitações in vitro: A A375 é um modelo tumoral in vitro. Embora imite as características do melanoma, não consegue representar totalmente a complexidade dos tumores de melanoma. Por conseguinte, deve-se ter cuidado ao generalizar os resultados in vitro para estudos clínicos.
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Aplicações da linha celular A375 na investigação
A linha celular A375 tem amplas aplicações na investigação do cancro. Aqui estão algumas das áreas comuns em que as células A375 são utilizadas.
- Investigação sobre o cancro: As células A375 têm aplicações generalizadas na investigação do melanoma. Os investigadores utilizaram estas células para investigar a biologia do cancro da pele, os processos e os mecanismos de sinalização celular subjacentes, incluindo a proliferação, migração e invasão celular. Isto também pode ajudar os investigadores a identificar novos alvos terapêuticos moleculares. Um estudo realizado por Lin Zhu e colegas em 2019 utilizou células de melanoma altamente agressivas A375 e descobriu o papel do microRNA-3662 no crescimento e invasão das células de melanoma A375. Os resultados do estudo indicam que o microRNA-3662 tem como alvo o gene ZEB1 e regula o crescimento das células de melanoma in vitro e in vivo no modelo tumoral A375 [2]. De forma semelhante, uma investigação realizada em 2018 descobriu que as vias PI3K/AKT e MAPK/ERK estão envolvidas na proliferação e metástase da linha celular A375 [3].
- Descoberta e teste de fármacos: a linha celular A375 é um modelo tumoral in vitro útil para testar e selecionar potenciais agentes anticancerígenos. Os investigadores avaliam a toxicidade e a eficácia de novos fármacos quimioterapêuticos, compostos e outras terapias utilizando estas células de melanoma A375. Por exemplo, um estudo explorou as propriedades anticancerígenas de micro e nanovesículas derivadas da toranja em células cancerígenas de melanoma humano A375. Os resultados revelaram que as micro e nanovesículas induzem a paragem do ciclo celular e a apoptose e inibem a expressão genética na proliferação, migração e invasão celular [4].
Células A375: Publicações
Mencionam-se aqui algumas publicações de investigação significativas que apresentam as células A375.
Este estudo foi publicado no Journal of Oncology em 2019. O estudo propôs que o tratamento combinado com vitamina D e análogos melhora a atividade anticancerígena da cisplatina e da dacarbazina nas células de melanoma A375.
Esta investigação foi publicada no Journal of Herbal Medicine em 2022. Este estudo explorou os efeitos antimelanoma do gel de aloé vera em células de melanoma A375.
Este estudo publicado na revista Oncogene (2021) propôs que o membro 2 da família da fermitina (FERMT2 ou kindlin-2) estimula a progressão do melanoma através da ativação da MAPK por meio da ligação com p-α-Pix e Rac1.
Este estudo publicado na revista The American Journal of Dermatopathology (2019) propôs que a FARP1 pode facilitar o desenvolvimento e a progressão do melanoma cutâneo. Assim, pode constituir um alvo terapêutico útil.
Este artigo de investigação foi publicado na revista Bioengineered (2019). Este estudo explorou a atividade citotóxica e apoptótica de um extrato da planta Phyllodium elegans em linhas celulares de carcinoma humano, incluindo a A375.
Recursos para a linha celular A375: protocolos, vídeos e muito mais
Seguem-se alguns recursos online sobre as células A375.
- Transfecção de células A375: Este tutorial em vídeo irá ajudá-lo a aprender a realizar a transfecção de células A375 passo a passo.
- Cultura celular: Este vídeo contém informações muito úteis sobre a cultura de linhas celulares.
Os protocolos de cultura celular para as células A375 estão listados aqui.
- Linha celular A375: Esta ligação contém informações úteis sobre a cultura e manutenção da linha celular A375, incluindo meios de cultura A375 e o manuseamento de culturas A375 congeladas e em proliferação.
Perguntas frequentes (FAQ) sobre as células A375
Referências
- Avram, S., et al., Padronização de modelos de melanoma humano A375 em membrana corioalantóica de embrião de galinha e ratos Balb/c nude. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
- Zhu, L., et al., O microRNA-3662 tem como alvo a ZEB1 e atenua a invasão da linha celular de melanoma altamente agressiva A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
- Peng, X., et al., A oxyfadichalcone C inibe a proliferação e a metástase das células do melanoma A375 através da supressão das vias PI3K/Akt e MAPK/ERK. Life sciences, 2018. 206: p. 35-44.
- Stanly, C., et al., As micro e nanovesículas derivadas da toranja apresentam perfis metabolómicos distintos e atividades anticancerígenas na linha celular de melanoma humano A375. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.