Linha celular KG-1
As célulasKG-1 constituem uma linha celular de leucemia derivada do ser humano que é amplamente utilizada na investigação biomédica. Oferecem diversas aplicações na investigação em imunologia, cancro e toxicologia. Os investigadores utilizam estas células para estudar os mecanismos das doenças e testar potenciais terapias. Este artigo fornecerá informações completas sobre a linha celular KG-1 que o poderão ajudar no seu trabalho. Nomeadamente, abordará:
- Caraterísticas gerais e origem da linha celular KG-1
- Informações de cultura sobre a linha celular KG-1
- Linha celular KG-1: Vantagens e limitações
- Aplicações das células KG-1 na investigação
- Publicações sobre as células KG-1
- Recursos para a linha celular KG-1: Protocolos, vídeos e muito mais
1. Caraterísticas gerais e origem da linha de células KG-1
A origem e as caraterísticas gerais de uma linha celular ajudam o investigador a decidir a sua utilização no seu trabalho. Pode investigar esta informação antes de começar a trabalhar com ela. Esta secção do artigo é sobre a origem e as caraterísticas dos macrófagos KG-1. Aqui, ficará a saber: O que são as células KG-1? O que é a linha celular KG-1a? Qual é a origem da linha de células KG-1? Qual é a morfologia da KG-1?
- A KG-1 é uma linha celular do tipo linfoblasto derivada do aspirado de medula óssea de um homem caucasiano (59 anos) com leucemia mielogénica aguda. Foi criada por Koeffler e Golde em 1978. Estas células encontram-se principalmente no estádio de maturação de promielócitos ou mieloblastos [1].
- As células KG-1 possuem uma morfologia semelhante à dos linfoblastos.
- O cariótipo da linha celular KG-1 apresenta um número modal pseudodiplóide de cromossomas.
KG-1 e KG-1a
A KG-1a é uma sub-linhagem das células parentais KG-1. Foi desenvolvida após 35 passagens da linha celular KG1. É menos diferenciada do que a linha celular KG-1. Além disso, esta sub-linhagem é citoquímica, morfológica e funcionalmente menos madura em comparação com a linha celular parental (KG-1).
2. Informações sobre a cultura da linha celular KG-1
Esta secção do artigo abordará todas as informações imperativas sobre a cultura de células KG-1 que podem facilitar o seu trabalho. Aqui ficará a saber: Qual é o tempo de duplicação da linha de células KG-1? Quais são as condições de cultura dos macrófagos KG-1? Como é que se fazem culturas de células KG-1?
Pontos-chave para a cultura de células KG-1
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Tempo de duplicação: |
O tempo de duplicação de KG-1 é de aproximadamente 45 horas. No entanto, pode variar consoante as condições de cultura. |
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Aderentes ou em suspensão: |
As células KG-1 crescem em suspensão. |
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Densidade celular: |
A densidade celular óptima para a linha de células KG1 é de 1 a 3 x105 células/ml. Para fazer uma subcultura, a suspensão de células é transferida para um tubo estéril e centrifugada. As células colhidas são então adicionadas com meios frescos e cuidadosamente ressuspendidas. Em seguida, as células são distribuídas para novos frascos e cultivadas a uma densidade celular óptima. As células podem ser divididas quando atingem uma densidade celular máxima de 1 - 2 x106 células/ml. |
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Meio de crescimento: |
O meio IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) contendo 10% de FBS, 4,5 g/L de glucose, 4 mM de L-Glutamina, 1,0 mM de piruvato de sódio e 3,0 g/L de NaHCO3 é utilizado para cultivar células KG-1. O meio deve ser substituído ao fim de três dias. |
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Condições de crescimento: |
A linha de células KG1 AML é cultivada numa incubadora humidificada a uma temperatura de 37°C e com um fornecimento de 5% de CO2. |
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Armazenamento: |
As células congeladas são mantidas na fase de vapor do azoto líquido ou a uma temperatura inferior a -150 °C num congelador elétrico de temperatura ultrabaixa para proteger a viabilidade das células. |
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Processo e meio de congelação: |
O CM-1 ou CM-ACF é adequado para a congelação de células KG-1. As células são congeladas utilizando um processo de congelação lenta para as proteger de qualquer choque. Este método permite uma descida gradual da temperatura de 1 °C por minuto. |
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Processo de descongelação: |
As células são descongeladas num banho de água pré-aquecido a 37 °C até que reste um pequeno aglomerado de gelo. As células descongeladas são adicionadas ao meio fresco e centrifugadas para remover os componentes do meio de congelação. O pellet de células é cuidadosamente ressuspenso e vertido em novos frascos contendo meio de crescimento. |
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Nível de Biossegurança: |
O laboratório de nível de biossegurança 1 é essencial para a manutenção das culturas de células KG-1. |
3. Linha celular KG-1: Vantagens e limitações
Tal como outras linhas celulares, a linha celular de leucemia mieloide KG-1 também está associada a muitas vantagens e limitações. Nesta secção, vamos conhecer algumas das mais notáveis que podem ser cruciais para decidir a sua utilização na sua investigação.
Vantagens
As principais vantagens das células KG-1 são
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Facilidade de cultura
As células KG-1 são facilmente cultivadas em laboratórios de investigação, apresentando requisitos de cultura de células sem complicações. A sua fácil manutenção e condições de crescimento permitem o acesso a um vasto espetro de investigadores com instalações básicas de cultura de células.
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Modelo de Leucemia Mieloide Aguda (LMA)
Derivada de um doente do sexo masculino com leucemia mieloide aguda (LMA), a linha celular KG-1 LMA constitui uma ferramenta valiosa para a investigação da biologia da LMA e para a realização de investigação sobre potenciais terapêuticas, oferecendo conhecimentos sobre os mecanismos subjacentes a esta doença e as estratégias de tratamento.
limitações
As limitações associadas à linha celular KG1 são as seguintes
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Modelo in vitro
As células KG-1 são um modelo in vitro valioso para a investigação da LMA; no entanto, é importante notar que podem não reproduzir totalmente a complexidade da doença in vivo, servindo como um modelo celular simplificado que pode não abranger todos os aspectos da biologia da LMA.
4. Aplicações das células KG-1 na investigação
O KG-1 oferece várias aplicações promissoras na investigação biomédica. Algumas das importantes aplicações de investigação dos macrófagos KG1 incluem:
- Investigação do cancro: As células KG-1 foram derivadas de um doente com leucemia mieloide aguda e, por isso, são consideradas uma ferramenta de investigação valiosa para investigar a biologia da LMA. Os investigadores utilizam estas células para estudar os mecanismos celulares e moleculares que conduzem ao desenvolvimento, crescimento e resistência aos medicamentos da LMA. Isto também envolve a identificação e descoberta de novos biomarcadores, mutações genéticas e vias de sinalização associadas à LMA. Por exemplo, um estudo realizado em 2019 investigou que o RNA longo não codificante linc00239 facilita a resistência à doxorrubicina e o comportamento maligno em células de leucemia mieloide aguda, KG-1. Um estudo adicional revelou que o lncRNA ativa a sinalização PI3K/Akt/mTOR para exercer estes efeitos nas células AML [2].
- Toxicologia: A linha celular KG1 é amplamente utilizada na investigação toxicológica. Os investigadores testam a toxicidade e a eficácia de potenciais agentes terapêuticos, incluindo fármacos quimioterapêuticos e terapias direcionadas em células de leucemia mieloide KG1, para identificar candidatos a fármacos promissores para futuras avaliações pré-clínicas e clínicas. A investigação realizada em 2018 analisou a toxicidade dos nano-niossomas contendo doxorrubicina na linha celular KG1 AML. O estudo propôs que o nano-niossoma é um transportador adequado para a administração de medicamentos, uma vez que aumenta a eficácia do tratamento [3]. Noutro estudo, os investigadores exploraram os efeitos terapêuticos do chá de urtiga preparado a partir das folhas da planta Urtica dioica. O estudo revelou que este extrato aquoso de folhas da planta exerce efeitos antitumorais em células de leucemia mieloide aguda, KG-1 e U937 [4].
5. Publicações sobre células KG-1
Esta secção do artigo enumera algumas publicações de investigação interessantes sobre as células KG-1.
Este artigo foi publicado no Journal of Cellular Physiology (2019). O estudo propôs que o composto de quercetina sensibiliza a linha celular KG1 AML contra o ligante indutor de apoptose relacionado ao TNF (TRAIL) e pode aumentar o efeito da citotoxicidade induzida por TRAIL nas células.
Este artigo no Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022) propôs que a regulação negativa do fator de transcrição krüppel-like 8 suprime a proliferação e a glicólise das células da LMA, incentivando a apoptose através da regulação da via de sinalização AKT/mTOR.
Este estudo no Cell Journal (Yakhteh) (2020) explorou os potenciais efeitos do trióxido de arsénio e do sorafenib nas células U937 e KG-1.
Este estudo publicado na Medical Oncology (2020) avaliou a OXPHOS e a glicólise como alvos terapêuticos na linha celular de LMA, KG-1.
Esta publicação Drug Design, Development, and Therapy, 2020 propôs que os compostos de curcumina e talidomida exercem sinergicamente efeitos apoptóticos nas células KG-1 através da diminuição da expressão de STAT3 e Bcl-xL.
6. Recursos para a linha celular KG-1: Protocolos, vídeos e muito mais
De seguida apresentam-se alguns recursos online disponíveis sobre as células KG-1.
- Subcultura de células em suspensão: Este vídeo descreve o protocolo para subcultura de culturas de células em suspensão como a KG-1.
A ligação seguinte contém o protocolo de cultura de células KG-1:
- Linha celular KG-1: Este sítio Web está repleto de informações básicas sobre a cultura de células da linha celular KG-1. Inclui informações sobre os meios da linha celular e protocolos para subcultura e manuseamento de culturas criopreservadas e proliferativas.
Referências
- Pelliccia, F., V. Ubertini, and N. Bosco, The importance of molecular cytogenetic analysis prior to using cell lines in research: O caso da linha celular de leucemia KG-1a. Oncol Lett, 2012. 4(2): p. 237-240.
- Yang, Y., et al.,RNA longo nãocodificantelinc00239 promove comportamentos malignos e quimiorresistência contra doxorrubicina parcialmente via ativação da via PI3K / Akt / mTOR em células de leucemia mieloide aguda. Oncology Reports, 2019. 41(4): p. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F., et al., Preparação e estudo de nano-niossomas contendo doxorrubicina e avaliação de sua toxicidade na linha celular de leucemia mieloblástica aguda KG-1. Payavard Salamat, 2018. 12(4): p. 309-323.
- Hodroj, M.H., et al., O chá de urtiga inibe o crescimento de células de leucemia mieloide aguda in vitro, promovendo a apoptose. Nutrientes, 2020. 12(9): p. 2629.