Forståelse av "passasjenummer"

Begrepet "passasjetall" er sentralt innen cellekultur og refererer til antall ganger en cellelinje har blitt subkultivert eller overført til et nytt vekstmedium etter den første gjenopplivingen fra kryopreservering eller mottak fra en referansecellebank. Denne beregningen er avgjørende for å spore en cellekulturs avstamning og historie.

Oversikt over prosessen

• Når cellene når en viss tetthet, overføres de til et nytt medium for å opprettholde veksten og forhindre overkonfluens. Hver slik overføring registreres som en passasje.
• Tradisjonelt sett har vi, når vi har mottatt en cellelinje, for eksempel ved passasje 60 fra innskyteren, fortsatt fra dette passasjenummeret, med en økning for hver subkultur. Denne praksisen opprettholdt en historisk tråd, men førte ofte til høye passasjetall fra starten av. På grunn av den omfattende og ofte flere tiår lange bruken av enkelte cellelinjer, for eksempel HeLa, som ble etablert i 1951, er det ikke mulig å fastslå det totale antallet passeringer siden cellelinjens oppstart.
• For å forbedre klarheten og kvaliteten i celledyrkingsprosessene våre reviderte vi denne tilnærmingen i begynnelsen av 2023. Når vi nå starter en kultur fra et nytt hetteglass, uavhengig av passasjenummeret fra innskyteren, nullstiller vi og begynner å telle på nytt fra passasje én for hver produserte batch

Begrunnelse

Passering er en viktig prosedyre for å sikre at cellekulturer er friske og anvendelige for forskning. Når cellene blir for store, opplever de kontaktinhibering, noe som reduserer proliferasjonshastigheten og kan ha negativ innvirkning på eksperimentelle resultater. For å redusere disse problemene har Cytion strenge kontroller av celletettheten ved subkulturering, og opprettholder dermed lave passasjetall under produksjonen av cellelinjene sine. Denne forholdsregelen bidrar til å forhindre de negative effektene av overdreven passering, for eksempel morfologiske avvik, endringer i veksthastighet og genetisk drift, som kan føre til at cellene skiller seg markant fra sin opprinnelige tilstand. Lengre perioder med subkulturering kan også øke risikoen for mikrobiell kontaminering.

Vårt løfte

Vi sørger for at cellene som leveres til forskere, er så nær den opprinnelige genetiske sammensetningen og de fenotypiske egenskapene som mulig, noe som øker påliteligheten til eksperimentelle data. Ved å dokumentere hver passasje nøye bidrar Cytion dessuten til sporbarhet og reproduserbarhet i forskningen, noe som gjenspeiler de høye standardene for praksis innen cellekultur. Forskere oppfordres til å føre nøyaktige registreringer av passasjenumre, både på dyrkingskarene og i laboratorienotatbøkene, som en referanse for cellekulturenes helse og historie.