Publisert: 2023 | Sist oppdatert: mai 2026

Forståelse av «passasjenummer»

Begrepet «passasjenummer» er sentralt i cellekultur og refererer til antall ganger en cellelinje har blitt subkultivert eller overført til et nytt vekstmedium etter den første gjenopplivningen fra kryokonservering eller mottak fra en referansecellebank. Denne måleenheten er avgjørende for å spore avstamningen og historikken til en cellekultur.

Prosessoversikt

I rutinemessig cellekulturpraksis overføres celler til nytt medium når de når en viss tetthet, for å opprettholde veksten og forhindre overkonfluens. Hver slik overføring registreres som en passasje.
Tradisjonelt, når vi for eksempel mottok en cellelinje ved passasje 60 fra deponenten, fortsatte vi fra dette passasjenummeret og økte det ved hver subkultur. Denne praksisen, selv om den opprettholdt en historisk tråd, førte ofte til høye passasjenumre fra starten av. Gitt den omfattende og ofte tiår lange bruken av visse cellelinjer, som for eksempel HeLa-linjen som ble etablert i 1951, er det ikke mulig å fastslå det totale antallet passasjer siden cellelinjens opprinnelse.
For å øke klarheten og kvaliteten i våre cellekulturprosesser reviderte vi denne tilnærmingen i begynnelsen av 2023. Nå, når vi starter en kultur fra et nytt hylse, uavhengig av passasjenummeret fra deponenten, nullstiller vi og begynner å telle på nytt fra passasje én for hvert produserte parti.

Begrunnelse

Passering er en viktig prosedyre for å sikre helsen og bruken av cellekulturer for forskning. Når celler vokser for mye, opplever de kontaktinhibering, noe som reduserer deres proliferasjonshastighet, noe som kan påvirke eksperimentelle resultater negativt. For å redusere disse problemene implementerer Cytion strenge kontroller av celletettheten ved subkultivering, og opprettholder dermed lave passasjenumre under produksjonen av sine cellelinjer. Denne forholdsregelen bidrar til å forhindre de negative effektene av overdreven passasjering, slik som morfologiske anomalier, endringer i veksthastighet og genetisk drift, som kan føre til at cellene avviker markant fra sin opprinnelige tilstand. Langvarig subkultivering kan også øke risikoen for mikrobiell kontaminering.

Vårt løfte

Vi sikrer at cellene som leveres til forskere er så nær den opprinnelige genetiske sammensetningen og fenotypiske egenskapene som mulig, noe som forbedrer påliteligheten av eksperimentelle data. Videre bidrar Cytion, ved å dokumentere hver passasje nøye, til sporbarheten og reproduserbarheten av forskningen, et engasjement som gjenspeiler de høye standardene for praksis innen cellekultur. Forskere oppfordres til å føre nøyaktige oversikter over passasjenumre, både på dyrkningsbeholderne og i laboratorienotatbøkene, som referanse for helsen og historikken til cellekulturene deres.

Tips og vanlige feil

Det er viktig å følge riktig protokoll, men det kan være like viktig å forstå vanlige fallgruver. Cellekulturprosedyrer er følsomme for små avvik i teknikk, timing og reagenskvalitet. Følgende tips gjenspeiler beste praksis anbefalt av Cytions vitenskapelige team basert på omfattende erfaring med cellekultur.

Forvarm alltid reagenser til 37 °C før bruk for å minimere termisk sjokk på cellene.
Arbeid raskt, men forsiktig – minimer tiden cellene tilbringer utenfor inkubatoren.
Bruk sertifiserte, mykoplasmatestede reagenser for å unngå forurensning som kan kompromittere eksperimentelle resultater.
Dokumenter hvert trinn, inkludert passasjenummer, dato og observasjoner av cellemorfologi.
Valider protokollen din med et lite piloteksperiment før du skalerer opp, for å unngå å kaste bort dyre reagenser.

Anbefalte Cytion-reagenser

Cytion tilbyr en rekke validerte cellekulturreagenser som er spesielt utviklet for å støtte denne protokollen. Alle reagensene er testet for ytelse med vanlige cellelinjer og er tilgjengelige med full dokumentasjon. Besøk cytion.com/Media-Reagents for å se hele porteføljen.