U87MG-celler - Glioblastomforskning ved hjelp av U87MG og dens innvirkning på studier av hjernekreft
U-87 MG, den primære glioblastomcellelinjen fra mennesker, er mye brukt i biologisk forskning. Disse cellene brukes særlig innen nevrovitenskap og immunonkologi.
Generelle egenskaper og opprinnelse til U-87 MG-cellelinjen
Denne delen vil gå over opprinnelsen og de generelle egenskapene til U87-cellelinjen. Du vil lære Hva er U-87 MG-celler? Hvor kommer U87-cellen fra? Hva er den fulle formen av U-87 MG? Hvor store er U87-celler? Hva er morfologien til U87-cellelinjen?
- U87-cellelinjen er en glioblastom, astrocytomcellelinje. Den ble etablert i 1966 ved Uppsala universitet. Cellene ble hentet fra en 44 år gammel kaukasisk mann som led av glioblastomsykdom. Denne cellelinjen kalles formelt U 87 MG, som står for Uppsala 87 Malignant Glioma.
- U 87 MG-cellene har en epitelcellelignende morfologi.
- Størrelsen på U 87 MG-cellene varierer mellom 12 og 14 µm i diameter.
- Denne humane glioblastomcellelinjen er hypodiploid og har et modalt kromosomtall på 44 i ca. 48 % av cellepopulasjonen. Det finnes imidlertid også høyere ploidier i 5,9 % av cellepopulasjonen.
Informasjon om dyrking av U-87 MG-celler
Før du arbeider med U-87 MG-celler, bør du sette deg inn i følgende viktige punkter for dyrking av disse glioblastomcellene. Spesielt bør du vite følgende: Hva er populasjonsdoblingstiden for U 87 MG-celler? Hvilke medier brukes til dyrking av U87-celler? Hva er såingstettheten for U 87 MG-cellelinjen?
Nøkkelpunkter for dyrking av U-87 MG-celler
|
Populasjonsfordoblingstid: |
U-87 MG-celler har en populasjonsfordoblingstid som varierer fra 18-38 timer. |
|
Adherent eller i suspensjon: |
U 87 MG er en adherent cellelinje. Cellene har en langstrakt form og vokser som monolag. |
|
Såingstetthet: |
Glioblastomcellelinjen U 87 MG anbefales å sås ved en celletetthet på 1 x104 celler/cm2. Adherente U87-celler vaskes med 1 x PBS og inkuberes med Accutase-løsning. Deretter sentrifugeres de dissosierte cellene og gjenvinnes. Cellene resuspenderes forsiktig og tilsettes i nye kolber som inneholder vekstmedium. |
|
Vekstmedium: |
U 87 MG-cellelinjen dyrkes i EMEM (Eagle's minimal essential medium) tilsatt 1,0 g/L L-glukose, 2,0 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3, 1 % NEAA, 1 mM natriumpyruvat og 10 % FBS-løsning. Mediet bør fornyes hver 2. til 3. dag. |
|
Vekstbetingelser: |
U-87 MG-celler krever en befuktet inkubator med 5 % CO2-tilførsel og en temperatur på 37 °C for optimal vekst. |
|
Oppbevaring: |
U87-cellene oppbevares enten i dampfasen av flytende nitrogen eller ved en temperatur under -150 °C for å opprettholde maksimal levedyktighet av glioblastomceller. |
|
Fryseprosess og medium: |
CM-1 eller CM-ACF frysemedium er egnet for frysing av U87 MG-celler. En langsom fryseprosess anbefales, da det forhindrer at cellene utsettes for sjokk og beskytter cellenes levedyktighet. |
|
Tineprosess: |
Frosne U-87 MG-cellelinjeampuller tines i et 37 °C varmt vannbad. Cellene tilsettes vekstmedium, resuspenderes og fordeles til dyrking i nye kolber. I motsetning til dette kan U87-celler sentrifugeres for å fjerne frysemediet og deretter dyrkes. |
|
Biosikkerhetsnivå: |
Biosikkerhetsnivå 1 er påkrevd for håndtering av U 87 MG-cellekulturer. |
Fordeler og ulemper med U-87 MG-celler
Når vi tenker på en cellelinje, er det første som slår oss: Hva er fordelene med å bruke U-87 MG-celler? Hva er ulempene med U87-celler?
Fordelene
U 87 MG-cellelinjer er mye brukt i forskning. Noen få fordeler forbundet med denne cellelinjen er:
Fordeler
- Lett å dyrke: U 87 MG-celler er enkle å holde i kultur. De krever ikke masete eller kompliserte krav til celledyrking
- Homogenitet: U-87 MG er en homogen cellelinje. De fleste cellene i en populasjon har samme genetiske sammensetning og deler dermed lignende egenskaper. Disse cellene brukes til å studere celleprosesser, screening av legemidler og testing
- Godt karakterisert: Denne glioblastomcellelinjen er godt karakterisert med hensyn til vekstegenskaper, morfologi og genuttrykk, noe som gjør den til et verdifullt forskningsverktøy
Ulemper
- Begrenset anvendelighet: U 87 MG er en glioblastomcellelinje, så bruksområdene er først og fremst begrenset til studier av glioblastomer og underliggende molekylære mekanismer. Den egner seg kanskje ikke til å undersøke andre krefttyper.
Forskningsanvendelser med U-87 MG-celler
U87MG glioblastomcellelinjen er mye brukt i kreftstudier, særlig innen glioblastomforskning. Noen av forskningsformålene med U-87 MG-celler er
- Kreftbiologisk forskning: U87-cellelinjen brukes til å studere kreftvekst og -utvikling, underliggende molekylære mekanismer, signalveier og tumormikromiljø. En studie publisert i 2020 brukte en in vitro-modell for glioblastom, U-87 MG-cellelinjen, til å undersøke BMAL1-genet (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) som et terapeutisk mål. Funnene viste at BMAL1-genet hemmer proliferasjon, migrasjon og invasjon av glioblastomceller ved å undertrykke syklin B1, metalloproteinase-9 og fosfo-AKT-genuttrykk [1]. En annen forskning utført i 2019 brukte U87-cellelinjen og undersøkte at nedregulert uttrykk av transkripsjonsfaktoren lipopolysakkaridindusert tumornekrosefaktor-alfa-faktor (LITAF) kan øke gliomcellenes radiosensitivitet gjennom oppregulering av FOXO-1-veien. LITAF er også kjent som p53-indusert gen 7 (PIG7) [2].
- Oppdagelse og utvikling av legemidler: U-87 MG-celler kan brukes til screening og testing av legemidler, slik at forskere kan identifisere nye potensielle kreftlegemidler og vurdere deres effekt og toksisitet. I en undersøkelse ble U-87 MG glioblastomcellelinje brukt til å evaluere antioksidant- og antikreftpotensialet til Inula helenium (L.)-ekstrakt [3]. I en annen publikasjon ble U87-cellelinjen brukt til å teste den cytotoksiske og apoptotiske effekten av planteekstrakter [4]. Videre ble det i 2018 publisert forskning som studerte den cytotoksiske effekten av sesquiterpenalkaloider ekstrahert fra Nuphar-planter på følsomme og legemiddelresistente U 87 MG-cellelinjer [5].
Bestill din U87 MG-gliomcellelinje i dag
U-87 MG cellelinje: Forskningspublikasjoner
Her er noen fremtredende forskningspublikasjoner som omhandler U-87 MG cellelinje.
Denne artikkelen publisert i Neuroreport 2018 foreslår at hypoksi kan øke migrasjon og invasjon av humane glioblastomceller ved å regulere PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α-signalveien.
Denne studien er publisert i Frontiers in Pharmacology i 2020. Forskningsresultatene viser at et flavonoid, Eriodictyol, utøver krefthemmende effekter på U87-cellelinjen og undertrykker celleproliferasjon og metastase. Forbindelsen medierer sine antitumoregenskaper ved å modulere PI3K/Akt/NF-κB-banen.
Denne forskningen i Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) tyder på at en kinesisk urteformel kalt Xihuang-pille kan indusere apoptose i U87-celler ved å rette seg mot ROS-aktivert Akt/mTOR/FOXO1-kaskade.
LITAF forbedrer strålefølsomheten til humane gliomceller via FoxO1-banen
Denne forskningsartikkelen ble publisert i tidsskriftet Cellular and Molecular Neurobiology i 2019. Studien foreslår at en transkripsjonsfaktor, LITAF, nedregulerer og forbedrer strålefølsomheten til gliomceller ved å regulere FOXO-1-signalveien.
Fremstilling avPLGA-nanopartikler med curcumin og undersøkelse av cytotoksiske effekter på humane glioblastom U87MG-celler
Denne artikkelen ble publisert i Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Forskerne brukte U-87 MG-celler for å undersøke den cytotoksiske effekten av PLGA-nanopartikler tilsatt curcumin.
Ressurser for U-87 MG-celler: Protokoller, videoer og mer
U87MG glioblastomcellelinjen brukes i mange kreftforskningslaboratorier. Noen få ressurser med denne cellelinjen er:
- Transfeksjon av U87-cellelinjen: Dette dokumentet beskriver en transfeksjonsprotokoll for U 87 MG-celler.
- Transfeksjon av U 87 MG-cellelinjen: Denne videoen er en veiledning som trinn for trinn forklarer transfeksjonsprotokollen for U87-celler.
Ressursen for cellekulturprotokollen for U87-celler er oppført nedenfor:
- U87 MG-celler: Denne lenken inneholder grunnleggende informasjon om U 87 MG cellelinje. Den inkluderer korte protokoller for celledeling, frysing og tining av celler.
Innblikk i forskning på U87 MG-gliom: Ofte stilte spørsmål
Referanser
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 undertrykker spredning, migrasjon og invasjon av U87MG-celler ved å nedregulere Cyclin B1, Phospho-AKT og Metalloproteinase-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al, LITAF forbedrer strålefølsomheten til humane gliomceller via FoxO1-veien. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., antioksidant- og kreftbekjempende aktiviteter av ekstrakt av Inula helenium (L.) i human U-87 MG glioblastomcellelinje. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh og A. Ghasempour, Cytotoxicity and apoptosis induction in breast cancer, skin cancer and glioblastoma cells by plant extracts. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Cytotoksisitet av sesquiterpenalkaloider fra Nuphar-planter mot følsomme og medikamentresistente cellelinjer. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.