T98G-cellelinjen

T98G-celler er en human glioblastomcellelinje som vanligvis brukes i biomedisinsk forskning. Disse cellene brukes spesielt i studier av hjernekreft for å undersøke viktige celler og molekylære faktorer som bidrar til kreft. I tillegg hjelper de forskere med å screene og teste nye kreftmedisiner som kan bidra til utvikling av legemidler.

Denne artikkelen vil inneholde alle viktige detaljer om T98G-cellelinjen som du trenger før du begynner å arbeide med den, for eksempel:

  1. Generelle egenskaper og opprinnelse til T98G-cellelinjen
  2. Informasjon om dyrking av T98G-cellelinjen
  3. T98G-cellelinjen: Fordeler og ulemper
  4. Anvendelser av T98G-celler
  5. Forskningspublikasjoner med T98G-celler
  6. Ressurser for T98G-celler: Protokoller, videoer og mer

1. Generelle egenskaper og opprinnelse til T98G-cellelinjen

Denne delen av artikkelen vil hjelpe deg med å utforske de grunnleggende egenskapene til T98G-cellelinjen. Den vil inkludere informasjon om cellelinjens opprinnelse, morfologi, størrelse og ploidi. Videre vil den gi en omfattende forståelse av følgende spørsmål: Hva er T98G-celler? Hvilken celletype er T98G? Hvor kommer T98G fra? Hva kjennetegner T98G-cellelinjen? Hva er glioblastomcellelinjen T98G U87?

  • T98G-cellelinjen ble etablert av GH Stein. Den består av fibroblastlignende celler som ble avledet fra hjernevev fra en 61 år gammel kaukasisk mann med glioblastoma multiforme [1].
  • T98G-celler er ikke-tumorogene; de forårsaker ikke svulster når de injiseres i nakne mus. De har imidlertid en tendens til å proliferere med passende forankring i cellekulturen.
  • Disse cellene har en fibroblastcellelignende morfologi.
  • Glioblastomcellelinjen T98G representerer hyperpentaploidi. Det modale kromosomantallet varierer mellom 128 og 132. Høyere ploidier kan forekomme i 1,39 % av cellepopulasjonen.

T98 mot T98G

Begge er humane glioblastomcellelinjer og har samme opprinnelse. Den eneste forskjellen mellom disse cellelinjene er antallet kromosomer. T98G har nesten dobbelt så mange kromosomer som T98. Derfor er T98G kjent som den polyploide varianten av T98.

T98G mot U87

U87 og T98G er begge humane glioblastomcellelinjer som brukes i hjernekreftforskning. U87 har en mer aggressiv fenotype sammenlignet med T98G GBM.

Mikroskopisk undersøkelse av et snitt av hjernevev i 100x forstørrelse som avslører de intrikate detaljene i en gliomsvulst.

2. Informasjon om dyrking av T98G-cellelinjen

Det er viktig å kjenne til dyrkingsinformasjon om en cellelinje før du starter arbeidet med den. Det vil hjelpe deg med å håndtere cellelinjen på en enkel og praktisk måte i laboratoriet. Du bør vite følgende Hva er fordoblingstiden for T98G-cellelinjen? Hvilket vekstmedium er best for T98G-celler? Hva er vekstegenskapene til T98G? Hva er såingstettheten for T98G-celler? Hvordan fryser du T98G-celler?

Viktige punkter for dyrking av T98G-celler

Fordoblingstid:

Den omtrentlige fordoblingstiden for T98G-celler er 40 timer. Den kan variere avhengig av dyrkingsforholdene.

Adherent eller i suspensjon:

T98G-celler er adherente. De fester seg til bunnen av dyrkningsbeholdere og danner monolag.

Delingsforhold:

T98G-cellene subkultiveres i et delingsforhold på 1:2 til 1:5. Til dette vaskes cellene først med 1 X PBS-buffer og inkuberes deretter med passasjeløsning (Accutase) i 8 til 10 minutter ved omgivelsestemperatur. Etter inkubasjon tilsettes de løsrevne cellene til nytt vekstmedium og sentrifugeres. Deretter resuspenderes den oppsamlede cellepelleten forsiktig, og cellene fordeles i en dyrkingskolbe som inneholder vekstmedium.

Vekstmedium:

EMEM-medium som inneholder 10 % føtalt bovint serum, 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 og EBSS, brukes til dyrking av T98G-celler. Mediet bør skiftes ut 3 til 4 ganger per uke.

Vekstbetingelser:

T98G-celler holdes i en befuktet inkubator som er innstilt på 37 °C og koblet til en CO2-tilførsel.

Oppbevaring:

Frosne celler kan oppbevares ved temperaturer under -150 °C eller i dampfasen av flytende nitrogen for å beskytte cellenes levedyktighet på lengre sikt.

Fryseprosess og medium:

Det anbefales å fryse T98G-celler i CM-1- eller CM-ACF-cellefrysemedium. Her anbefales en langsom fryseprosess som kun tillater en temperaturreduksjon på 1 °C per minutt. Dette forhindrer at cellene utsettes for sjokk og opprettholder levedyktigheten.

Tineprosess:

Frosne celler tines forsiktig ved å plassere dem i et forvarmet vannbad på 37 grader Celsius i 40 til 60 sekunder. Deretter resuspenderes de i nytt vekstmedium og overføres til en ny kolbe. Etter 24 timers inkubasjon skiftes mediet ut for å eliminere komponenter fra frysemediet.

Biosikkerhetsnivå:

T98G-kulturer holdes i et laboratorium med biosikkerhetsnivå én.

Visualisering av det fibroblastlignende vekstmønsteret til glioblastomcellelinjen T98G ved 10x og 20x forstørrelse.

3. T98G-cellelinjen: Fordeler og ulemper

T98G er en mye brukt glioblastomcellelinje fra mennesker. Den har flere fordeler og ulemper som skiller den fra andre. Noen av de viktigste diskuteres i denne delen av artikkelen.

Fordeler og ulemper

Fordelene med T98G-cellene er

  • Godt karakterisert

    Veletablert og velkarakterisert cellelinje. Omfattende studert og dokumentert i litteraturen.

  • In vitro-modell

    Representerer egenskapene til glioblastom, den mest aggressive hjernesvulsten. Et verdifullt verktøy for sykdomsutredning, forståelse av biologi og utvikling av behandling.

Ulemper

Ulempene forbundet med T98G-celler er:

  • Heterogenitet

    Genetisk heterogenitet i T98G-cellepopulasjonen kan føre til inkonsekvens i eksperimentelle resultater og vanskeliggjøre tolkningen av data.

4. Anvendelser av T98G-celler

T98G-cellelinjen er et verdifullt verktøy i kreftforskningen. Her er noen av de viktigste bruksområdene for T98G-cellene:

  • Kreftforskning: T98G-cellelinjen er et verdifullt verktøy for å undersøke biologien til glioblastomsvulster. Disse cellene brukes hovedsakelig til å studere de intrikate molekylære veiene som ligger til grunn for utvikling og progresjon av glioblastomsykdom. I tillegg brukes de til å identifisere genetiske mutasjoner som driver tumorvekst og andre kreftcellemekanismer. Yang Chen og kollegene arbeidet med disse cellene og fant at overuttrykk av miRNA-21 reduserer PDCD4-nivåene (Programmed cell death protein 4) i T98G-celler. Dette fører til en hemming av PDCD4-mediert T98G-celleapoptose. Studien antyder dermed at miRNa-21 er et potensielt mål for utvikling av terapi [2]. I likhet med denne studien studerte Fanqiang Kong og kolleger rollen til mikroRNA-15a i proliferasjon og invasjon av T98G-glioblastomceller. De fant at miRNA-15a-5p fremmer disse celleprosessene ved å rette seg mot celleadhesjonsmolekyl 1 (CADM1) [3].
  • Legemiddeltesting og terapeutisk utvikling: T98G er en utmerket in vitro-modell for glioblastom for screening av nye legemidler og som en plattform for å evaluere effekten av potensielle kreftbehandlinger. Forskere tester også en rekke ulike forbindelser og behandlingsformer for å identifisere og oppdage legemiddelkandidater med de mest lovende anti-glioblastom-egenskapene. Dette fører til utvikling av nye legemidler og behandlingsstrategier, noe som gir håp for glioblastompasienter. En slik studie undersøkte anti-kreftpotensialet til en naturlig forbindelse kalt corilagin i den temozolomidresistente T98G GBM-cellelinjen. Studien viste at korilagin, i kombinasjon med temozolomid, induserer høyere nivåer av antiproliferative og antiapoptotiske effekter i cellene [4].

5. Forskningspublikasjoner med T98G-celler

Her følger noen interessante og hyppig siterte forskningspublikasjoner om glioblastomcellelinjen T98G.

Kjemoterapeutisk effekt av SR9009, en REV-ERB-agonist, på de humane glioblastom T98G-cellene

Denne publikasjonen i ASN Neuro (2019) undersøkte antikrefteffektene av en REV-ERB-agonist kalt SR9009 på T98G-glioblastomceller.

Quercetin og natriumbutyrat øker synergistisk apoptose i C6-glioblastomceller fra rotter og T98G-glioblastomceller fra mennesker gjennom hemming av autofagi

Denne forskningsartikkelen i Neurochemical research (2019) foreslår at natriumbutyrat og quercetin synergistisk hemmer beskyttende autofagi i T98G-celler og øker celleapoptose.

RNA-sekvensering i hypoksi-tilpassede T98G-glioblastomceller gir støttende bevis for IRE1 som et potensielt terapeutisk mål

Denne studien i Genes (2023) underkastet T98G-hypoksitilpasset cellelinje RNA-sekvensering og foreslo IRE1 (Inositol-requiring enzyme 1) som et lovende terapeutisk mål.

MicroRNA-548c-3p hemmer proliferasjon og migrasjon av T98G-gliomceller ved å nedregulere c-Myb

Denne artikkelen ble publisert i Oncology Letters (2017). Studien undersøkte at miRNA-548c-3p retter seg mot T98G-onkogener (c-Myb) for å hemme spredning og migrasjon av T98G-celler.

Kloroformekstrakt av tibetansk urtemedisin Dracocephalum tanguticum Maxim. Hemmer spredning av T98G glioblastomceller ved å modulere spalting av Caspase-3 og uttrykk av Bax og p21

Denne artikkelen i Journal of Medicinal Plants Research (2011) foreslår at Dracocephalum tanguticum kloroformekstrakt utøver antiproliferative effekter på T98G-celler ved å modulere caspase-3-, Bax- og P21-gener.

6. Ressurser for T98G-celler: Protokoller, videoer og mer

Her finner du tilgjengelige ressurser med protokoller for dyrking og transfeksjon av T98G-celler.

  • T98G-transfeksjon: Denne forskningsartikkelen inneholder protokollen for T98G-transfeksjon. Den forklarer kort metoden og nødvendig reagens.

Følgende lenker vil i stor grad hjelpe deg med å lære T98G-celledyrkingsprotokoll og gjøre arbeidet ditt enkelt med det.

  • T98G-celler: Dette nettstedet inneholder viktig informasjon om protokoller for T98G-celledyrking, inkludert subkulturer og håndtering av proliferative og kryopreserverte kulturer. Videre vil den også hjelpe deg med å lære om cellevekstmedier, betingelser og fordoblingstid.

Referanser

  1. Haehl, E., Endothelial-cell induced radioresistance in glioblastoma. 2021, Universität Tübingen.
  2. Chen, Y., et al., MicroRNA-21 nedregulerer uttrykket av tumorsuppressoren PDCD4 i den humane glioblastomcellen T98G. Cancer letters, 2008. 272(2): p. 197-205.
  3. Kong, F., et al., MicroRNA-15a-5pfremmer spredning og invasjon av T98G-glioblastomceller via målretting mot celleadhesjonsmolekyl 1. Oncology Letters, 2021. 21(2): p. 1-1.
  4. Milani, R., et al., Corilagin induserer høye nivåer av apoptose i den temozolomidresistente T98G-gliomcellelinjen. Oncol Res, 2018. 26(9): p. 1307-1315.

Vi har oppdaget at du befinner deg i et annet land eller bruker et annet språk i nettleseren enn det som er valgt for øyeblikket. Vil du godta de foreslåtte innstillingene?

Lukk