RBL-2H3-celler - Betydningen av RBL-2H3 i allergisk respons og immunologiske studier
RBL-2H3-cellelinjen er en basofil leukemicellelinje fra rotter som brukes i immunologisk forskning. Den fungerer som et modellsystem for å studere mastcellenes fysiologi, atferd og funksjoner. Disse cellene brukes også til å studere allergiske reaksjoner, immunologiske prosesser og legemiddeltesting og -utvikling.
Artikkelen gir innsikt i RBL-2H3-cellenes opprinnelse, generelle egenskaper, dyrkingskrav og forskningsanvendelser.
RBL-2H3-celler: Opprinnelse og generelle egenskaper
Før du bruker en basofil cellelinje i forskningen din, bør du kjenne til dens opprinnelse og generelle egenskaper. Denne delen av artikkelen vil informere deg om grunnleggende informasjon om RBL-2H3-celler. For eksempel: Hva er RBL-2H3-mastceller? Hvorfor bruke RBL-2H3-celler? Hva er RBL-2H3-celler i basofil leukemi hos rotter? Hva er RBL-2H3-morfologien? Er RBL-2H3-celler udødelige?
- RBL-2H3 er basofile leukemiceller avledet fra basofile celler fra Wistar-rotter i 1978 ved National Institute of Dental Research Laboratory of Immunology.
- RBL-2H3-celler har c-kit-reseptortyrosinkinase- og mastcelleprotease II (RMCP-II)-reseptorer, noe som gjør dem til en potensiell mastmodell. Derfor kalles de ofte mastceller til tross for at de stammer fra rottebasofiler [1].
- De frigjør histamin og andre mediatorer ved aktivering og uttrykker IgE-reseptorer med høy affinitet.
- RBL-2H3-celler har en fibroblastlignende morfologi.
RBL-2H3-celler: Informasjon om dyrking
Denne delen vil hjelpe deg å lære noen viktige aspekter ved dyrking av RBL-2H3-cellelinjen. Du vil få vite følgende: Hva er RBL-2H3-cellenes fordoblingstid? Hva er RBL-2H3-cellenes såingstetthet? Hva er RBL-2H3-cellekulturprotokollen? Hva er RBL-2H3-cellelinjens frysemedium?
Nøkkelpunkter for dyrking av RBL-2H3-celler
|
Populasjonsfordoblingstid: |
RBL-2H3-mastcellens fordoblingstid er omtrent 50- 60 timer. |
|
Adherent eller i suspensjon: |
RBL-2H3 er en adherent cellelinje. |
|
Subkultiveringsforhold: |
For RBL-2H3-celler holdes delingsforholdet mellom 1:2 og 1:4. Adherente celler vaskes med magnesium- og kalsiumfri 1 x PBS-løsning. Passasjeløsning Accutase tilsettes, og cellene holdes ved omgivelsestemperatur i 10 minutter for å løsne fra bunnen av dyrkningsbeholderen. Fersk medium tilsettes, og cellene sentrifugeres. De høstede cellene resuspenderes forsiktig i nytt medium og helles over i nye kolber som inneholder vekstmedium. |
|
Vekstmedium: |
EMEM-medium som inneholder 10 % FBS, 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 og EBSS-salt, brukes til dyrking av RBL-2H3-celler. Mediet bør skiftes ut 2 til 3 ganger per uke. |
|
Vekstbetingelser: |
RBL-2H3-celler dyrkes i en befuktet inkubator som er innstilt på 37 °C og koblet til en 5 %CO2-kilde. |
|
Oppbevaring: |
Cellene oppbevares i dampfasen av flytende nitrogen eller ved en temperatur på under -150 °C i en elektrisk fryser for å beskytte cellenes levedyktighet på lang sikt. |
|
Fryseprosess og medium: |
CM-1 eller CM-ACF frysemedium brukes til å fryse RBL-2H3-celler ved hjelp av en langsom fryseprosess. Kort fortalt tillater denne metoden en temperaturreduksjon på 1 °C per minutt og beskytter cellene mot sjokk. |
|
Tineprosess: |
RBL-2H3-celler tines i et forhåndsinnstilt vannbad (37 °C) i ca. 60 sekunder. Deretter tilsettes cellene i nytt dyrkingsmedium og sentrifugeres. Dette trinnet er viktig for å fjerne komponenter fra frysemediet. Deretter resuspenderes cellepelleten i et vekstmedium, og cellene fordeles i en kolbe for dyrking. |
|
Biosikkerhetsnivå: |
RBL-2H3-cellene skal oppbevares i laboratorier med biosikkerhetsnivå 1. |
Fordeler og begrensninger ved RBL-2H3 Basofil cellelinje
RBL-2H3-celler brukes ofte i immunologisk forskning. Dette avsnittet beskriver de viktigste fordelene og begrensningene.
Fordeler og begrensninger
- Lett å dyrke: RBL-2H3-celler kan enkelt dyrkes og vedlikeholdes i laboratoriemiljøet. Dette gjør det enklere å gjennomføre kostnadseffektive og reproduserbare eksperimenter, noe som gjør dem til et populært valg for innledende studier innen immunologi.
Begrensninger
- Ikke-menneskelig opprinnelse: RBL-2H3-celler stammer fra basofile celler fra rotter, og det er derfor ikke sikkert at de etterligner humane biologiske prosesser nøyaktig, noe som kan begrense deres anvendelighet i humane forskningsstudier. Dette gjør det nødvendig å tolke dataene med forsiktighet når resultatene ekstrapoleres til humane systemer.
- Forenklet mastcellemodell: Selv om disse cellene utgjør en grunnleggende modell for å studere mastcellefunksjoner, representerer de ikke fullt ut de komplekse mastcelleinteraksjonene i det humane immunsystemet. Derfor er det ikke sikkert at de gir en adekvat modell av mastcellenes mangefasetterte roller i immunresponser eller sykdomstilstander in vivo.
RBL-2H3-cellelinjen: En hjørnestein i immunologisk forskning
Basofil- og mastcelleforskning ved hjelp av RBL-2H3-cellelinjen
RBL-2H3-cellelinjen, som stammer fra Rattus norvegicus, er en viktig modell for studier av basofiler og mastcellers biologi. Disse rotte-mastcellene gir viktig innsikt i frigjøring av mastcellemediatorer, noe som er avgjørende for å forstå allergiske tilstander som allergisk rhinitt. Gjennom disse cellene kan forskerne utforske cellereseptordynamikken og etableringen av immunologiske synapser, som er sentrale for immunsystemets respons på allergener. En interessant studie publisert i 2019 brukte RBL-2H3-cellelinjen og undersøkte mekanismene bak pseudoallergiske reaksjoner fremkalt ved injeksjon av Qingkailing. Studien fant at PI3K-RAC1-signalkaskaden delvis fremkaller denne allergiske responsen i cellene [2]
Immunologisk synapsedynamikk i allergiforskning
RBL-2H3-celler brukes mye i immunologisk forskning, og de er spesielt effektive for å undersøke immunologisk synapsedynamikk. Dette bidrar til å belyse immunsystemets kommunikasjonsprosesser, og kan brukes til å studere både perifert blod og peritoneale mastceller. Slik forskning er avgjørende for en helhetlig forståelse av immunresponsen i både systemiske og lokaliserte sammenhenger
Screening av legemidler og toksisitetstesting
Ved screening og testing av legemidler utnyttes RBL-cellenes respons på ulike stimuli, blant annet ved å studere hvordan H2O2 hemmer IgE-medierte responser. Disse cellene spiller en viktig rolle i utviklingen av behandlinger for sykdommer som streptokokkinfeksjoner, der streptokokker i mitisgruppen hemmer mastcelleaktivering. I tillegg evaluerer forskere de toksiske effektene av ulike stoffer, inkludert kjemikalier, legemidler og nanopartikler, ved hjelp av denne RBL 2H3 mc-modellen. I en nylig studie (2022) ble for eksempel cytotoksisiteten av polystyrenmikroplast vurdert på RBL-2H3-celler. De fant at mikroplast skader RBL-2H3-celleorganeller og fremmer celledød [3]. En annen studie fra 2021 evaluerte det antiallergiske og betennelsesdempende potensialet til et naturprodukt, neferin, ved hjelp av RBL 2H3 mc-modellen. Studien avslørte forbindelsens gode antiallergiske og antiinflammatoriske egenskaper [4]
Avanserte metoder for immunologiske målinger
Den konsekvente og målbare frigjøringen av mediatorer fra RBL-2H3-celler gjør dem ideelle for praktisk fluorimetri, noe som muliggjør presise og nøyaktige målinger som er avgjørende for sykdomsstudier og vurdering av terapeutiske midler.
RBL-2H3-cellelinjen, som stammer fra Rattus norvegicus, er en uvurderlig ressurs i både grunnleggende og anvendt forskning innen immunologi. Den gir store muligheter for å utvikle vår kunnskap om og behandling av immunologiske sykdommer
RBL-2H3-cellelinje for avansert immunologisk forskning
RBL-2H3-celler: Forskningspublikasjoner
Her følger noen spennende forskningspublikasjoner som omhandler RBL-2H3-mastceller:
Hemmende aktivitet av narirutin på degranulering av RBL-2H3-celler
Denne forskningsartikkelen ble publisert i Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Studien foreslo at narirutin, en naturlig forbindelse, utøver hemmende effekter på RBL 2H3-degranulering via regulering av NF-KB, MAPK og tyrosinkinase-signalveien.
Denne forskningen i International Journal of Molecular Sciences (2020) foreslo at apigeninforbindelsen i betydelig grad undertrykker allergiske og inflammatoriske responser fra RBL-2H3- og RAW264.7-celler. Derfor kan det tjene som et potensielt middel for å bekjempe immunrelaterte sykdommer.
Denne forskningsartikkelen i International Journal of Molecular Sciences (2021) evaluerte de antiallergiske og antiinflammatoriske effektene av et naturprodukt, saponarin, ved hjelp av ulike cellelinjer, inkludert RBL-2H3.
Denne evidensbaserte studien av komplementær og alternativ medisin (2014) fant at ekstrakter av Benchalokawichian og noen aktive bestanddeler har en potensiell hemmende effekt på frigjøring av ß-heksosaminidase fra RBL 2H3-celler.
Denne artikkelen ble publisert i 2018 i International Journal of Biological Macromolecules. Studien viste at spirulina maxima, et naturlig produkt, hemmer RBL-2H3-degranulering ved å forhindre MAPK- og AKT-fosforylering.
Ressurser for RBL-2H3 cellelinje: Protokoller, videoer og mer
RBL-2H3 er en mye brukt mastcellelinje. Her nevnes de tilgjengelige ressursene som dekker RBL-2H3-dyrking og transfeksjonsprotokoller:
- RBL 2H3 MC-modell: Denne forskningsartikkelen omfatter protokoller for vedlikehold av RBL-2H3-kulturer og for RBL-2H3-transfeksjon.
Her er noen ressurser som forklarer RBL-2H3-cellekulturprotokollen:
- RBL-2H3-celler: Dette nettstedet er nyttig for deg for å lære celledyrkningsprotokoller for RBL-2H3-cellelinjen. Dessuten inneholder den informasjon om RBL-2H3-cellemedier og dyrkingsforhold.
RBL-2H3-cellelinjen: Viktige spørsmål og svar for forskere
Referanser
- Passante, E. og N. Frankish, The RBL-2H3 cell line: its provenance and suitability as a model for the mast cell. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q., et al., Pseudoallergisk reaksjon forårsaket av Qingkailing-injeksjon delvis via PI3K-Rac1-signalveien i RBL-2H3-celler. Toksikologiforskning, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al., Polystyren mikro (nano) plast skader organellene til RBL-2H3-celler og fremmer MOAP-1 for å indusere apoptose. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Antiallergiske og antiinflammatoriske effekter av neferin på RBL-2H3-celler. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.