NCI-H460-celler - navigering i lungekreftforskning med NCI-H460-innsikt
NCI-H460 er humane ikke-småcellede lungekreftceller som ofte brukes i forskning på lungekarsinom og toksikologi. Denne cellelinjen er et verdifullt verktøy for å studere ulike kreftbiologiske aspekter som involverer tumorutvikling, vekst og legemiddelresistens. NCI-H460-celler er dessuten en egnet modell for utvikling av kreftreagenser.
NCI-H460-celler: Opprinnelse og generelle egenskaper
Opprinnelsen og de generelle egenskapene til en cellelinje bidrar i stor grad til dens forskningsmessige bruksområder. Denne delen av artikkelen vil hjelpe deg med å lære opprinnelsen og de fremtredende egenskapene til NCI-H460 lungekreftceller. Du vil få vite mer: Hva er NCI-H460-celler? Hva er NCI-H460-cellelinjetypen? Hva er morfologien til NCI-H460?
- NCI-H460-cellelinjen stammer fra pleuraeffusjon fra en europeisk mann med storcellet lungekreft. Den ble etablert i 1982 av A.F. Gazdar og kolleger.
- NCI-H460 lungekreftceller har en epitelial morfologi.
- NCI-H460 er en tumorigen cellelinje med en hypotriploid karyotype. Det modale kromosomnummeret for disse cellene er 57. NCI-H460-celler har også 58 modale kromosomtall i sammenlignbare frekvenser.
- Disse lungekreftcellene har mange NCI-NCI-H460-mutasjoner som ikke-småcellede lungesvulster, for eksempel NCI-H460 KRAS-mutasjon, som er involvert i celleproliferasjon, vekst, invasjon og metastase.
Informasjon om dyrking av NCI-H460-celler
Du bør kjenne til følgende viktige punkter for riktig håndtering og vedlikehold av NCI-H460-cellelinjen. Her finner du informasjon om NCI-H460 doblingstid, NCI-H460 dyrkingsmedium og grunnleggende prosedyrer for dyrking av NCI-H460 lungekreftceller.
Nøkkelpunkter for dyrking av NCI-H460-celler
|
Fordoblingstid: |
NCI-H460-cellenes fordoblingstid er ca. 33 timer. |
|
Adherent eller i suspensjon: |
NCI-H460-lungekreftcellene er adherente. |
|
Subkultiveringsforhold: |
Det anbefalte delingsforholdet for NCI-H460-cellelinjen er 1:2 og 1:4. Etter at det gamle mediet er fjernet, skylles de adherente cellene med 1 x fosfatbuffersaltvann. Deretter inkuberes cellene med Accutase-passasjeløsning i 8 til 10 minutter ved omgivelsestemperatur. Dissosierte celler resuspenderes i et kulturmedium og sentrifugeres. De høstede cellene resuspenderes igjen og helles over i en ny kolbe for dyrking. |
|
Vekstmedium: |
RPMI 1640 brukes som NCI-H460-kulturmedium. Det er supplert med 10 % føtalt bovint serum, 2,1 mM stabil glutamin og 2,0 g/L NaHCO3. Mediet bør skiftes ut 2 til 3 ganger i uken. |
|
Vekstbetingelser: |
NCI-H460-kulturer holdes ved 37 °C i en fuktig inkubator med kontinuerlig tilførsel av 5 % CO2. |
|
Oppbevaring: |
NCI-H460 lungekreftceller kan langtidslagres i dampfasen av flytende nitrogen eller ved temperaturer under -150 °C i en elektrisk fryser med ultralave temperaturer. |
|
Fryseprosess og medium: |
CM-1- eller CM-ACF-medium brukes til å fryse og oppbevare NCI-H460-celler. En langsom nedfrysingsmetode anbefales for å beskytte maksimal cellelevedyktighet. |
|
Tineprosess: |
Frosne NCI-H460-celler tines i et forvarmet vannbad (ved 37 °C) i 40 til 60 sekunder til det bare er en liten isklump igjen. De tinte cellene tilsettes ferske medier og sentrifugeres for å fjerne komponenter fra frysemediet. Den oppsamlede cellepelleten resuspenderes igjen, og cellene fordeles i nye kolber som inneholder vekstmedium. Det kan ta nesten 24 timer før NCI-H460-celler fester seg til overflaten av kolben. |
|
Biosikkerhetsnivå: |
NCI-H460 lungekreftceller håndteres og vedlikeholdes i laboratorier på biosikkerhetsnivå 1. |
Fordeler og ulemper med NCI-H460-celler
NCI-H460 er en mye brukt cellelinje i lungekreftforskning. I dette avsnittet tar vi for oss de generelle fordelene og ulempene knyttet til NCI-H460-lungekreftceller.
Fordeler og ulemper
Fordelene med NCI-H460-cellelinjen for ikke-småcellet lungekreft er
-
Tumorens opprinnelse
NCI-H460-cellelinjen stammer fra en pasient med storcellet lungekarsinom, som representerer denne spesielle lungekrefttypen. De brukes som modell for å studere lungekreftbiologi og utvikle nye og effektive behandlinger. NCI-H460-celler har tumorgenetisk potensial og kan injiseres i immundefekte mus for å skape in vivo-svulstmodeller for å studere svulstvekst, utvikling og effekt av potensielle legemidler.
-
Høy proliferasjonsrate
NCI-H460 har høyere veksthastighet enn andre cellelinjer for ikke-småcellet lungekreft, som for eksempel A549. Denne fordelen øker tilgjengeligheten og gjør det enklere for forskere å gjennomføre reproduserbare og tidssensitive eksperimenter.
Ulemper
Ulempene forbundet med NCI-H460 lungekreftceller er:
-
Homogenitet
NCI-H460-celler er homogene, ettersom de er hentet fra én enkelt pasientsvulst. Derfor mangler de generelt den kompleksiteten og heterogeniteten som observeres i pasientsvulster.
Forskningsmessige anvendelser av NCI-H460-celler
NCI-H460-lungekreftcellene brukes i stor utstrekning i studier knyttet til lungekarsinom. Her er noen av de viktigste bruksområdene for NCI-H460-celler i forskning:
- Lungekreftforskning: NCI-H460-celler er en uvurderlig modell for å undersøke celle- og molekylære mekanismer som er involvert i tumorutvikling, vekst og metastasering. I tillegg brukes den til å studere imperative signalveier, molekylære mål og ulike genetiske mutasjoner som er forbundet med utviklingen av lungekreft. Det er gjennomført flere studier på NCI-H460-celler for å studere disse faktorene på en effektiv måte. En studie utført i 2019 foreslo at overuttrykt nukleært allestedsnærværende kasein- og syklinavhengig kinasesubstrat (NUCKS) er involvert i tumorcellevekst via regulering av PI3K/AKT-signalveien [1]. I en in vitro- og in vivo-studie ble NCI-H460-celler brukt til å studere eIF4E-genets rolle. Funnene viste at eIF4E-genet er involvert i lungekarsinomvekst og angiogenese, og at det kan brukes som mål for utvikling av lovende legemidler mot lungekreft [2].
- Oppdagelse og utvikling av legemidler: NCI-H460, en cellelinje for lungekreft hos mennesker, er mye brukt i studier av legemiddelutvikling og -oppdagelse. Forskere bruker disse cellene til å undersøke toksisitet og effekt av nye legemiddelkandidater, målrettede terapier og behandlinger som hovedsakelig er rettet mot NCI-H460 KRAS-mutasjoner. I en studie utført av Haoyue Hu og kolleger i 2023 ble NCI-H460-celler brukt til å studere anlotinibs krefthemmende effekt. Resultatene viste at anlotinib delvis påvirket veksten av KRAS-muterte lungekreftceller ved å hemme MEK/ERK-signaleringskaskaden [3]. På samme måte ble en fenolisk forbindelse, karnosinsyre, undersøkt for antiproliferative og proapoptotiske aktiviteter ved bruk av NCI-H460-celler [4].
- Resistens mot legemidler: NCI-H460-cellelinjen er ideell for å studere lungekarsinomets resistensmekanismer. Forskere bruker disse cellene til å utvikle resistensmodeller for å identifisere underliggende gener, molekylære faktorer og signalveier. I en studie ble det for eksempel utviklet Pemetrexed-resistente NCI-H460-celler for å studere de underliggende molekylære mekanismene for pemetrexed-resistens i ikke-småcellet lungekreftceller [5].
Kjøp NCI-H460-cellelinjen: Din inngangsport til lungekreftforskning
Forskningspublikasjoner med NCI-H460-celler
Her er noen interessante forskningspublikasjoner om NCI-H460 lungekarsinomcellelinjen.
Et naturlig glukan fra svart bønne hemmer spredning av kreftceller via PI3K-Akt og MAPK-veien
Denne studien i Molecules (2023) foreslo at et naturlig α-1,6-glukan, BBWPW, fra svart bønne hemmer spredningen av NCI-H460-celler via regulering av PI3K/AKT/MAPK-veien.
Denne artikkelen i Phytomedicine (2019) undersøkte at dioscin-6′-O-acetat, en ny naturlig forbindelse, har en antiproliferativ effekt på NCI-H460 lungekreftceller.
miRNA-425-5p øker veksten av lungekreft via PTEN/PI3K/AKT-signalaksen
BMC Pulmonary Medicine (2020) viser at mikroRNA-425-5p forsterker lungekreftsvulster gjennom PTEN/PI3K/AKT-signalveien.
Denne artikkelen i Molecular Medicine Reports (2017) beskriver antitumorpotensialet og de underliggende mekanismene til quinalizarinforbindelsen i NCI-H460 og andre lungekreftceller.
Denne forskningen i Food and Function (2019) fremhever den potensielle anti-krefteffekten av Eucalyptus globulus labill. ekstrakt ved bruk av NCI-H460-celler. Funnene viste at planteekstraktet hadde disse effektene ved å øke uttrykket av p53 i NCI-H460-celler og modulere cellesyklusprofilen.
Ressurser for NCI-H460 cellelinje: Protokoller, videoer og mer
Her er noen nettressurser med NCI-H460 lungekreftceller.
- Transfeksjon av NCI-H460-celler: Denne videoveiledningen er en trinnvis veiledning for transfeksjon av NCI-H460-celler med plasmid-DNA.
Følgende lenker inneholder viktig informasjon om celledyrking for H460-celler.
- NCI-H460-celler: Dette nettstedet inneholder viktig informasjon om NCI-H460-cellemedier, subkulturer, fryse- og tineprosedyrer.
- Passering av NCI-H460-celler: Dette dokumentet vil veilede deg om passering og subkulturering av NCI-H460-cellelinjen. Dessuten vil det også hjelpe deg med å lære transfeksjonsprotokoll for NCI-H460-celler.
Utforskning av NCI-H460-cellelinjen: Vanlige spørsmål og innsikt
Referanser
- Hu, C., et al., NUCKS fremmer spredning, migrasjon og invasjon av lungekreftceller gjennom Pi3k/Akt-signalveien. Klinisk og undersøkende medisin, 2021. 44(2): s. E55-61.
- Qi, X., et al., EGPI-1, en ny eIF4E/eIF4G-interaksjonshemmer, hemmer lungekreftcellevekst og angiogenese gjennom Ras / MNK / ERK / eIF4E-signalvei. Kjemisk-biologiske interaksjoner, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al., Anlotinib utøver anti-krefteffekter på KRAS-muterte lungekreftceller gjennom å undertrykke MEK/ERK-signalveien. Cancer Management and Research, 2020: s. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., Carnosic acid exhibits antiproliferative and proapoptotic effects in tumoral NCI-H460 and nontumoral IMR-90 lung cells. Journal of Toxicology and Environmental Health, del A, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L., et al., Etablering og karakterisering av pemetrexed-resistente NCI-H460/PMT-celler. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (tidligere Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.